超高效液相色谱－串联质谱联用检测血清胆汁酸谱方法的建立及初步临床应用

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)联用方法检测血清中胆汁酸表达的方法,并初步探讨胆汁酸亚型与肥胖的关系.方法 采用固相萃取方法处理血清标本,经UPLCHSS T3色谱柱梯度洗脱后,用负离子多反应监测模式对血清中的胆汁酸组分进行质谱检测,并根据中国国家食品药品监督管理局(SFDA)的指导原则对该方法的特异性、线性范围、灵敏度、不精密度和相对回收率进行性能验证.利用UPLC-MS/MS方法检测10例单纯性肥胖者和10名健康对照者血清胆汁酸浓度,并采用秩和检验进行统计分析.结果 UPLC-MS/MS方法可同时检测人血清中14种胆汁酸亚组分,在10～20 000 nmol/L范围内线性相关良好.其对不同亚组分的最低检出限(LOD)为0.02～7.90 nmol/L,最低定量限(LOQ)为0.07～44.20 nmol/L;其日内不精密度为0.35％～12.41％;日间不精密度为1.11％ ～13.04％;相对回收率为89.8％～114.6％.初步临床应用显示,单纯性肥胖者及健康对照者血清胆汁酸谱色谱图有一定差异,单纯性肥胖者血清中游离胆汁酸和结合胆汁酸浓度分别为0.49(0.45 ～1.90)、1.44(0.84～3.72) μmol/L,均低于健康对照组的0.98(0.53～3.06)、1.99(0.67 ～2.88) μmol/L,但差异均无统计学意义(Z=-0.958、-0.801,P均＞0.05).结论 建立的UPLC-MS/MS方法可有效分离并定量检测血清中各种胆汁酸亚型,其线性范围广、灵敏度高、精密度好,可用于临床标本游离胆汁酸和结合胆汁酸的分析测定.     

实验大鼠侵袭性肺曲霉病早期诊断的研究

目的 建立高效液相色谱技术（HPLC）检测（1-3）-β-D-葡聚糖的方法，并与巢式聚合酶链反应（PCR）方法进行比较，评价其在实验大鼠侵袭性肺曲霉病（IPA）早期诊断中的意义。方法 将烟曲霉孢子注入实验大鼠左肺以制作IPA模型；采集各组实验大鼠血样及脏器标本，进行巢式PCR、HPLC及培养方法的检测。结果 HPLC检测（1-3）-β-D-葡聚糖最低检测限度为1～2pg／ml，临界值为15pg／ml。模型组检测值和阳性率均较对照组高，差异有统计学意义（P〈0．01）；随感染时间延长检测值和阳性率逐渐上升，各组差异有统计学意义（P〈0．01）；感染死亡大鼠血液标本的检测值与死亡时间呈负相关关系，其相关系数r为-0．949（P〈0．01）。1周内HPLC方法敏感度（77．8％）和特异度（91．7％）均较巢式PCR高，但差异无统计学意义（P〉0．05），两者敏感度均高于血培养，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论HPLC检测大鼠血中（1-3）-β-D-葡聚糖浓度，在早期预测大鼠肺曲霉感染的发生、发展及预后判断方面明显优于传统的血培养，也要优于巢式PCR方法。     

高效液相色谱柱后衍生荧光法测定尿液中硫酸软骨素分解产生的不饱和双糖

目的 探讨高效液相色谱柱后衍生荧光法测定尿液中硫酸软骨素(CS)分解产生的不饱和双糖的效果.方法 分别用离心过滤法和常规沉淀法进行尿液的预处理,处理后的样品加CS裂解酶消化,用高效液相色谱柱后衍生荧光法测定分解产生的不饱和双糖(ADi-0S、△Di-4S、ADi-6S)的量,比较两种预处理方法中CS标准品回收率的差别.结果 高效液相色谱柱后衍生荧光检测系统运转效果良好,该法对于双糖的最低检出量为10 ng.尿样经离心过滤法处理后,CS标准品分解产生的△Di-0S、△Di-4S、△Di-6S的回收率分别为86.93%、87.28%、85.03%;而在常规沉淀法中,3种双糖的回收率仅为75.09%、72.96%、77.70%.结论 高效液相色谱柱后衍生荧光法较为灵敏,可用于测定CS分解产生的不饱和双糖.在尿液样品的预处理方法中,离心过滤法优于常规沉淀法,可应用于尿液中CS的微量测定.     

Seroprevalencia de infección frente a SARS-CoV-2 en trabajadores de la salud en un hospital monográfico pediátrico en Madrid (España)

IntroductionAs of 30 April 2020, 203.715 SARS-CoV-2 infections had been reported in Spain, 54.486 in Madrid, 21.4% were health care workers. Our objective is to determine seroprevalence of COVID-19 among workers in a monographic pediatric hospital.MethodsBetween April13^th and 30^th, 1.523 health workers were recruited to be tested for SARS-CoV-2 serology screening (All Test®) and they answered a questionnaire with demographic, epidemiological and clinical information and previous exposure to COVID-19.FindingsOne thousand two hundred ninety two (84.8%) were tested. Positive serology (IgM and/or IgG) to SARS-CoV-2 was found in 17.2% (222/1.292), in 15.5% (201/1.292) if only IgG was considered. Median age was 44±13 years, 73% were female. The 33.8% (75/222) were asymptomatic. Eighty one had a previous positive rRT-PCR. The 14% (32/222) referred a family contact.ConclusionSerology prevalence for SARS-CoV-2 in workers of a pediatric hospital was higher than in general population. Many of them had an unnoticed infection.     

肺结核合并糖尿病对抗结核药物血药浓度的影响

目的 研究肺结核合并糖尿病对吡嗪酰胺、左氧氟沙星的血药峰浓度的影响,为糖尿病合并肺结核患者用药提供理论依据。方法 以随机数字表法选取糖尿病合并肺结核的患者为观察组（左氧氟沙星组30例,吡嗪酰胺组20例）,单纯肺结核为对照组（左氧氟沙星组30例,吡嗪酰胺组20例）,两组分别服用抗结核药物吡嗪酰胺、左氧氟沙星,在服药7 d后,用高效液相色谱法（HPLC）测定患者抗结核药物的血药峰浓度,两组间进行对比,采用SPSS 13.0软件进行统计分析。结果 左氧氟沙星在糖尿病合并肺结核组的血药峰浓度较单纯肺结核组明显升高［分别为（8.03±2.60）μg/ml和(6.66±1.76) μg/ml,t=2.39,P=0.02］;而吡嗪酰胺在两组间差异无统计学意义［分别为(14.24±4.79)μg/ml和(14.86±5.74)μg/ml,t=0.37,P=0.71］。结论 左氧氟沙星在糖尿病合并肺结核患者体内的血药峰浓度较单纯肺结核患者明显升高,提示糖尿病患者在应用左氧氟沙星时应该注意其血药峰浓度。有无糖尿病对吡嗪酰胺在体内血药浓度没有影响。     

快速免疫色谱测定法在骨关节结核诊断及鉴别诊断中的价值

目的探讨快速免疫色谱法对活动性骨关节结核的诊断价值。方法采用ＩＣＴ快速免疫色谱法检测７５例活动性骨关节结核、６９例以肿瘤为主的骨病患者及７２名正常人血清中的抗体。结果骨关节结核组阳性率为８０％，其中脊柱结核阳性率为９０％，脊柱以外的关节结核阳性率为６１％，合并其它部位结核阳性率为７６％；骨病组３例阳性，正常组２例阳性，假阳性率分别为４％和３％。结论ＩＣＴ快速免疫色谱法是骨关节结核诊断和鉴别诊断的一项有用的辅助手段     

益卫康宝胶囊的质量控制

［摘要］目的建立益卫康宝胶囊(主要组分为延胡索、当归、三棱等)的质量标准。方法鉴别采用薄层色谱法（TLC）,检查项考察装量差异及崩解时限等,含量项采用高效液相色谱法（HPLC）测定制剂中延胡索乙素。色谱条件：SinoChrom ODS BP (4.6 mm×250 mm,5 μm) 柱,流动相：0.1%磷酸(用三乙胺调节pH 值为6.0) 甲醇（40：60）,检测波长282 nm。结果TLC具有专属性,装量差异在±10%范围内,供试样品在7.9～10.7 min的时间范围内全部崩解,含量测定方法准确可靠,线性关系良好,平均回收率97.20%,RSD 1.26%。结论该质量标准准确、全面、可靠,适用于益卫康宝胶囊的质量控制。     

GC法测定盐酸左旋咪唑片的含量

目的:建立GC法测定盐酸左旋咪唑片中盐酸左旋咪唑的含量。方法:毛细管气相色谱法,以联苯胺为内标。结果:线性范围0.5～2.5mg/ml;r=0.9991。回收率为99.4%,RSD=0.74%。结论:方法简便,精确,重现性好,可很好地控制盐酸左旋咪唑的内在质量。