辽细辛中十二碳四烯酰胺A,B的定性及定量分析研究

建立辽细辛中2个主要的直链酰胺成分十二碳四烯酰胺A与十二碳四烯酰胺B的定性与定量分析方法,并测定其在42份辽细辛(37份不同年份收集的北细辛及5份汉城细辛)中的含量。利用HPLC-IT-TOF-MS/MS技术结合对照品鉴定北细辛甲醇提取液中的十二碳四烯酰胺A与B;对2种成分的含量测定采用超高效液相色谱-二极管阵列检测器(UPLC-PDA),ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相为纯水-乙腈,梯度洗脱,柱温45℃,检测波长254 nm。结果表明,HPLC-IT-TOF-MS/MS鉴别细辛中十二碳四烯酰胺A、B的准分子离子[M+H]+为m/z 248.20;2种成分在UPLC-PDA上分离度良好,在检测范围内呈良好线性,平均加样回收率为97.90%和99.86%。在所测定辽细辛样品中,十二碳四烯酰胺A的含量为0.11~3.89 mg·g-1,十二碳四烯酰胺B为0.24~6.65 mg·g-1。含量测定结果显示随着贮藏时间的延长,十二碳四烯酰胺A与十二碳四烯酰胺B的含量均呈现降低的趋势,与2013年收集样品相比,2002~2003年收集样品中两者的平均含量分别降低34%和36%;这2种成分在汉城细辛中的平均含量[十二碳四烯酰胺A:(0.78±0.52)mg·g-1;十二碳四烯酰胺B:(1.69±0.83)mg·g-1]均显著低于北细辛[十二碳四烯酰胺A:(1.59±0.75)mg·g-1;十二碳四烯酰胺B:(2.90±1.17)mg·g-1](P<0.05);辽细辛地上部分十二碳四烯酰胺A的含量为0.11~0.33 mg·g-1,十二碳四烯酰胺B含量为0.24~0.60 mg·g-1,两者的含量均明显低于同一植株的地下部分(分别为0.73~3.89,2.11~6.24 mg·g-1)。本方法快速简便、结果准确,对2种直链酰胺类成分可达到良好的分离并满足含量测定的要求,可用于辽细辛药材中这2种成分的定性与定量分析,为辽细辛药材质量控制方法的进一步提高提供依据。     

化州柚与柚的性状及组织显微鉴别

目的：鉴别化州柚与柚。方法：性状及组织显微特征鉴别。结果：化州柚茎表皮外有非腺毛，皮层含较多淀粉粒，韧皮部方晶较多；叶栅栏组织较厚，最外层栅栏组织含草酸钙方晶，叶脉皮层较厚。其余特征与柚类似。结论：上述特征可用于化州柚与柚的鉴别。     

不同种植基地滇重楼根茎中甾体皂苷有效成分差异的研究

目的:探讨不同种植基地滇重楼根茎中甾体皂苷有效成分的差异。方法:采用超高效液相色谱法(UHPLC)测定不同种植基地滇重楼根茎中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ及总皂苷的含量,并用液质联用(LC-MS)技术定性分析其甾体皂苷有效成分的差异。结果:不同种植基地滇重楼根茎中重楼皂苷Ⅰ及总皂苷含量差异较小,重楼皂苷Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ含量差异较大;重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅲ(薯蓣皂苷)、重楼皂苷Ⅴ、重楼皂苷Ⅶ是不同种植基地滇重楼根茎中甾体皂苷的主要存在形式,不同种植基地滇重楼根茎中重楼皂苷Ⅱ、重楼皂苷H、重楼皂苷Ⅵ、纤细薯蓣皂苷差异较大;根据不同种植基地滇重楼根茎正离子模式下液质数据的主成分分析(PCA)模型可将其分为四类。结论:不同种植基地滇重楼根茎中重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ及总皂苷的含量、甾体皂苷有效成分及化学成分种类差异较大。     

反相高效液相色谱法测定溪黄草中二萜类成分的含量

目的通过溪黄草中二萜成分含量测定方法的建立及商品药材质量分析,为溪黄草质量标准的制定提供依据。方法采用RP-HPLC法测定6,7-去氢罗伊林酮和(15S)-12,16-环氧-11,14-二羟基-8,11,13-松香烷-7-酮的含量;流动相:0.05%三氟乙酸-乙腈(25∶75),检测波长:210 nm;理论塔板数按6,7-去氢罗伊林酮计算应不低于6 000,按(15S)-12,16-环氧-11,14-二羟基-8,11,13-松香烷-7-酮计算应不低于5 000。结果11批次的测试样品中6,7-去氢罗伊林酮的含量范围在91.5~182.5μg.g-1,(15S)-12,16-环氧-11,14-二羟基-8,11,13-松香烷-7-酮的含量范围在35.4~84.2μg.g-1,建议药材中6,7-去氢罗伊林酮和(15S)-12,16-环氧-11,14-二羟基-8,11,13-松香烷-7-酮的含量限度分别不得低于113.4μg.g-1和52.3μg.g-1。结论经过系统的方法学考察,所建立的测定方法具有操作简便、稳定、专属、可重复的特点,可用于溪黄草药材及含溪黄草的复方制剂的质量控制。     

甘草种子及其混淆品的醋酸纤维薄膜电泳鉴定

目的：鉴别甘草（Gycyrrhiza wralense Fisch野生）种子和它的2种混淆品蒙古黄芪（Astragalus membranaceus（Fisch）Bge·var．monghotlicus（Bge．）Hsiao家种）种子及苦豆子（Sophora lohpecuroide L．野生）种子。方法：采用醋酸纤维素薄膜蛋白电泳技术进行分析。结果：3种种子蛋白质电泳图谱具有明显差异。结论：电泳图谱法可以用于甘草种子及其混淆品的鉴定。     

重楼提取物抗骨肉瘤作用及机制研究

目的探讨重楼提取物(PPEE)抗骨肉瘤作用及其机制。方法不同质量浓度的PPEE处理骨肉瘤细胞,采用MTT法、Hoechst 33342染色、流式细胞术、Matrigel培养、免疫印迹法分别检测细胞增殖抑制率、细胞凋亡、细胞周期、血管生成拟态(VM)形成及相关蛋白表达情况。裸鼠移植瘤模型观察PPEE的体内抑瘤效果。结果 PPEE对骨肉瘤细胞半数抑制浓度(IC50)为10～60μg/m L,对成骨细胞增殖影响较小。PPEE可浓度依赖性地将骨肉瘤143B细胞阻滞在G2/M期,上调细胞周期相关蛋白p-CDK1、p-Cdc25C、p-Chk2表达,下调cyclinB1表达;促进细胞凋亡,上调cleavedCaspase-3、8、9和PARP表达,上调Bax/Bcl-2;抑制细胞体外VM形成,下调FAK、Mig-7、MMP-2和MMP-9表达。体内实验显示PPEE能明显抑制骨肉瘤生长和体内VM形成,延长荷瘤裸鼠生存期。结论 PPEE在体内外均具有良好的抗骨肉瘤活性,其作用机制可能与诱导骨肉瘤细胞凋亡、阻滞细胞周期及破坏骨肉瘤VM形成有关。     

Effects of TGFbeta1 and extracts from Cervus korean TEMMINCK var. mantchuricus Swinhoe on acute and chronic arthritis in rats

AIM OF THE STUDY: To elucidate the pharmacological activities of deer antler acupuncture and TGF61538;1 on the acute and chronic phases of rheumatoid arthritis diseases. MATERIALS AND METHODS: Polyarthritis rats were administered with TGF61538;1 and water extract of deer antler acupunture (DAA), prepared from the pilose antler of Cervus korean TEMMINCK var. mantchuricus Swinhoe. TGF61538; (0.1 to 2 61549;g/animal) and DAA (5-100 61549;g/kg animal) were initiated 1 day before an arthritogenic dose of streptococcal cell wall fragments to see the effects on the joint swelling and distortion during the acute phase and the chronic phase of the disease. Arthritic index suppression of rat arthritis model was examined by TGF61538; and DAA administrations. RESULTS: TGF61538;1 and DAA diminished the polyarthritis development in rats. TGF61538; and DAA eliminated the joint swelling and distortion observed during the acute phase and the chronic phase of the disease. The TGF61538; and DAA suppressed the arthritis progress when administration was begun after acute phase of arthritis. DISCUSSION: Consistent with the inhibition of inflammatory cell recruitment into the synovium, TGF61538;1 and DAA reversed the leukocytosis associated with the chronic phase of the arthritis, respectively.     

北细辛根化学成分研究

[目的] 研究北细辛根乙醇提取部分的化学成分。[方法] 应用硅胶柱层析、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶、制备高效液相等方法分离纯化化合物,并通过核磁共振、质谱等方法对化合物进行结构鉴定。[结果] 从北细辛根二氯甲烷部分分离鉴定了15个化合物,分别为：（1R,2S,5R,6R）-5''-O-methylpluviatilol、咖啡酸甲酯、（2E,4E,8E）-N-isobutyl-2,4,8-decatrienamide、升麻酸、（1S,4S,5S）-5-isopropyl-2-methyl-2-cyclohexene-1,4-diol、（±）-asarinol A、对羟基苯甲醛、3-甲氧基-4-羟基苯甲酸、4-羟基-苯乙醇、对羟基肉桂酸、β-谷甾醇、L-细辛脂素、3,4-亚甲二氧基苯甲酸、卡枯醇和3,4-二甲氧基肉桂醇。[结论] 结果中前10个化合物1~10为首次从北细辛中分离得到。     

湖北恩施州宽叶缬草含硒量测定

采用原子荧光法测定湖北恩施州3个地区的宽叶缬草及土壤样品的硒含量,发现当地宽叶缬草硒含量明显高于其它地区样品,可作为一项开发成道地药材的依据和有效鉴定评价指标。     

八厘麻毒素的提取及其半数致死量研究

目的从干燥羊踯躅果实中提取八厘麻毒素并测定八厘麻毒素的半数致死量（LD50）。方法将羊踯躅果实粉碎后,经乙醇浸泡、加热回流、硅胶层析及重结晶获得八厘麻毒素。选取18～22g小鼠20只,予不同剂量八厘麻毒素灌胃给药,观察15min内小鼠死亡与存活状况,采用Dixon-Mood法计算LD50。结果 13kg羊踯躅果实共提取出3g八厘麻毒素,采用序贯法测得八厘麻毒素的LD50为7.609mg/kg。结论应设法减少或消除羊踯躅中有效成分八厘麻毒素的毒副作用,在临床应用中发挥其最佳降压效果。