胱硫醚β合成酶、甲硫氨酸合成酶基因型与复发自然性流产的相关性研究

目的探讨胱硫醚β合成酶（CBS）基因844ins68、甲硫氨酸合成酶（MS）基因A2756G位点多态性与复发性自然流产的关系。方法采用PCR-RFLP方法,检测141例习惯性流产患者和160例正常孕妇（对照组）CBS 844ins68、MS A2756G基因型。结果复发性自然流产组CBS844ins68、MS A2756G各种基因型频率与等位基因频率与对照组之间无统计学差异（P〉0.05）。结论 CBS 844ins68、MS A2756G突变可能不是宁夏汉族复发性自然流产的遗传性危险因子。     

2型糖尿病的同型半胱氨酸及胱硫醚β合成酶CBS844ins68基因多态性特点

目的探讨2型糖尿病患者的同型半胱氨酸水平(homocysteine,Hcy)及Hcy代谢相关酶胱硫醚β-合成酶(cysta-thionineβ-synthase,CBS)基因的844 ins68的多态性的特点。方法选择72例新发2型糖尿病患者(DM)及83例健康对照者,检测了所有研究对象的Hcy、叶酸、维生素B12浓度。应用PCR分析CBS 844ins68基因多态性。结果 DM组Hcy水平明显低于对照组,差异具有统计学意义(10.9μmol/L vs 12.7μmol/L,P<0.05)。DM组叶酸水平明显高于对照组(8.3ng/ml vs 5.5ng/ml,P<0.05)。DM组维生素B12水平与对照组差异无统计学意义(396pg/ml vs 431pg/ml,P>0.05)。糖尿病组与对照组CBS844ins68的基因型及等位基因频率的差异均无统计学意义,P>0.05。结论初发2型糖尿病Hcy水平可能减低,CBS844ins68基因多态性可能与糖尿病无关。     

硫化氢与小鼠恶唑酮结肠炎肠黏膜损伤的相关性

背景：研究发现内源性气体递质H2S可能具有抗炎活性。关于H2S在溃疡性结肠炎（UC）中的作用,目前研究结果不一。目的：探讨H2S与恶唑酮诱导的小鼠实验性结肠炎肠黏膜损伤的相关性。方法：健康雄性昆明小鼠96只随机分为正常对照组、模型组、NH2OH组、NaHS组,后三组建立恶唑酮结肠炎模型,NH2OH组和NaHS组分别腹腔注射H2S合成关键酶胱硫醚B合酶（CBS）抑制剂NH2OH和H2S供体NaHS干预3d或7d。实验期间评估疾病活动指数（DAI）。干预结束后处死小鼠,取病变结肠组织行组织学损伤评分,以ELISA法测定白细胞介素-4（IL-4）含量,以realtimeRT—PCR测定CBSmRNA表达,同时检测血浆H2S含量。结果：模型组、NH2OH组、NaHS组DAI评分、结肠黏膜组织学损伤评分和结肠组织IL-4含量、CBSmRNA表达明显高于正常对照组,NH2OH组高于模型组,NaHS组低于模型组,差异均有统计学意义（P〈0．05）。NH2OH组血浆H2S含量明显低于正常对照组和模型组,NaHS组明显高于正常对照组和模型组,差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：内源性H2S与小鼠恶唑酮结肠炎的肠黏膜损伤之间存在明显相关性,可能起抗炎和肠黏膜保护作用。     

慢性脑供血不足患者血清CBS、H_2S水平变化及意义

目的:探讨胱硫醚-β合酶(cystathionine beta-synthase,CBS)和硫化氢(H2S)在慢性脑供血不足(chron-ic cerebral circulation insufficiency,CCCI)发病机制中的作用及与CCCI高危因素的关系。方法:采用ELISA试剂盒和分光光度法分别检测98例CCCI患者和108名健康体检者的血清CBS、H2S含量,并按年龄、性别及合并症对两组含量测定结果进行分层比较,分析CCCI高危因素与血清CBS、H2S水平的关系。结果:⑴CCCI患者血清CBS、H2S水平均明显低于健康对照组(P<0.01);⑵4个年龄段CCCI患者血清CBS、H2S水平均明显低于同年龄段健康对照组(P均<0.01);⑶CCCI患者中,大于60岁、男性及合并高血压和/或糖尿病亚组的血清CBS、H2S水平分别明显低于55岁以下、女性及无合并症亚组(P均<0.01)。结论:血清CBS、H2S可能参与CCCI的发病过程,且其水平可能与CCCI高危因素相关。     

反复热性惊厥过程中气体信号分子硫化氢对一氧化氮/一氧化氮合酶体系的影响

目的：探讨硫化氢（H₂S）对热性惊厥（FS）大鼠一氧化氮（NO）/一氧化氮合酶（NOS）体系表达的影响。方法:大鼠随机分为对照组、FS组、FS+NaHS组、FS+HA（hydroxylamine）组。采用热水浴诱导大鼠FS，隔日诱导1次，共10次。采用分光光度计法测定大鼠血浆中H₂S和NO含量；用原位杂交观察nNOS mRNA表达情况；用免疫组化方法观察NOS蛋白表达情况。结果:FS+NaHS组NO含量低于FS组，同时NOS表达也低于FS组；而FS+HA组NO含量高于FS组，同时NOS表达也强于FS组。结论:用H₂S外源性供体NaHS和胱硫醚-β-合成酶抑制剂HA的干预研究表明，反复热性惊厥过程中，H₂S的改变可影响NO/NOS体系的表达。     

Homocysteine and atheromatous renal artery stenosis

Hyperhomocysteinemia is an independent risk factor for vascular disease, frequently observed in patients with severe renal impairment. Hyperhomocysteinemia has never been considered as a possible risk factor in renal artery stenosis. We investigated plasma folate and vitamin B₁₂, methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) C577T and cystathionine β-synthase (CBS) 844ins68 polymorphisms, and homocysteine levels before and after methionine (100 mg/kg) loading in 58 patients with angiographically documented renal artery stenosis and mildly impaired renal function. One hundred and two normotensive subjects with angiographically normal coronary arteries and no history or clinical or angiographic evidence of atherosclerosis in other vascular districts, were considered as a control group. Mean total homocysteine levels were significantly higher in patients than in controls (P<0.01), as was the prevalence of hyperhomocysteinemia (51.7% vs. 32.3%, P<0.05). However, MTHFR alleles and genotypes as well as CBS 844ins68 mutation frequencies were similar in the two groups, whereas a lower folate level was observed in the patients. Moreover, patients with MTHFR A/A genotype showed a poorer folate status than control subjects, suggesting that a subclinical folate deficiency may be very frequent in renal artery stenosis, regardless of C677T mutation. In conclusions, hyperhomocysteinemia is common in patients with atheromatous renal artery stenosis; a subclinical folate deficiency seems to be involved, regardless of MTHFR thermolabile or CBS insertion genotypes. Folate supplementation might be useful in the management of overall vascular risk of these patients. Received: 13 November 2001 / Accepted: 13 December 2001     

硫化氢在ob/ob小鼠皮肤创面愈合中的作用与调控机制

目的:观察硫化氢(H2S)对ob/ob小鼠皮肤创面愈合的影响并探讨其作用机制。方法:将ob/ob小鼠随机分为生理盐水组、胰岛素组和NaHS(H2S供体)组,C57BL/6小鼠作为对照组,构建小鼠背部皮肤创面模型。干预后检测各组H2S释放量;用Western blot检测胱硫醚γ-裂解酶(CSE)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白的表达差异;用RT-qPCR检测CSE的mRNA表达变化;使用免疫组织化学法检测中性粒细胞及单核/巨噬细胞的浸润数量;使用ELISA检测肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6的水平;用Masson染色检测胶原沉积情况。结果:ob/ob小鼠皮肤创面肉芽组织中H2S释放及CSE蛋白、mRNA的表达水平以及胶原沉积显著低于C57BL/6小鼠(P0.05)。外源性H2S可加速ob/ob小鼠皮肤创面愈合(P0.05),增加胶原沉积。ob/ob小鼠创面中性粒细胞及单核/巨噬细胞浸润数量,TNF-α、IL-6的水平及MMP-9蛋白表达水平显著增加(P0.05),NaHS组显著降低。结论:H2S可显著改善糖尿病难愈性溃疡的愈合,作用机制可能与其抗炎作用有关。     

反复热性惊厥前后硫化氢/胱硫醚-β-合成酶体系表达的改变

目的:研究反复热性惊厥(febrile seizures,FS)对发育期大鼠脑内硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)/胱硫醚-β-合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)体系表达的影响.方法:采用热水浴诱导大鼠反复热性惊厥.隔日诱导惊厥1次,共诱导10次.发育期大鼠随机分为对照组(N组, n=8)及10次热性处理组(n=22).10次热性处理组依其是否出现惊厥又分为10次高热组(H组, n=9)及10次热性惊厥组(FS组,n=8).10次热性处理组中虽出现惊厥但不足10次者用于其他实验.用亚甲基蓝法测定大鼠血浆H2S含量;用原位杂交和免疫组化法分别观察CBS基因和蛋白表达情况.结果:FS组大鼠血浆H2S含量明显高于对照组和高热组,FS组大鼠海马CBS基因和蛋白表达明显高于对照组和高热组.结论:反复热性惊厥可使大鼠血浆H2S含量升高,并可使大鼠海马CBS基因和蛋白表达增强.     

胱硫醚β-合酶基因C572T突变与妊娠期高血压疾病的相关性

目的:探讨同型半胱氨酸(Hcy)代谢相关酶胱硫醚β-合酶(CBS)基因C572T突变与妊娠期高血压疾病发病的相关性。方法:采用等位基因特异性扩增(ASA)技术检测63例妊娠期高血压疾病患者和32例孕期经过顺利的正常孕妇(对照组)CBSC572T基因型,并用酶联免疫分析法(ELISA)测血浆Hcy。结果:妊娠期高血压疾病组CBS基因C572TT/T、C/T和C/C型突变频率分别为4.76%、84.13%和11.11%;对照组分别为3.13%、87.50%和9.37%;妊娠期高血压疾病组C等位基因频率为53.17%、T等位基因频率为46.83%,对照组分别为53.13%和46.87%,二者比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:CBSC572T基因突变与妊娠期高血压疾病无明显相关性,其基因突变不足以构成妊娠期高血压疾病发病的遗传危险因素。