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目的 Smad4是细胞内的信号转导蛋白,在TGF-β家族信号转导过程中发挥重要作用,其表达缺失或突变与肿瘤的发生、发展密切相关。文中通过慢病毒载体技术,使肝癌细胞中Smad4低表达,观察Smad4对肝癌细胞SMMC-7721迁移过程的影响并探讨可能的机制。方法构建Smad4的RNA干扰(RNA interference,RNAi)慢病毒载体,经包装、浓缩及检测病毒滴度后感染肝癌细胞SMMC-7721,检测Smad4的表达;筛选出2组Smad4干扰效率高的细胞,RNAi-Smad4-2组和RNAi-Smad4-12组,对照组为肝癌细胞SMMC-7721和感染慢病毒空载体的肝癌细胞(RNAi-NC);细胞划痕及三维(three-dimension,3D)培养方法检测细胞迁移能力变化;Western blot法检测fascin和cortactin蛋白水平的变化。结果酶切、PCR结果表明Smad4的RNAi慢病毒载体构建成功,RNAi-Smad4-2组和RNAi-Smad4-12组细胞中Smad4蛋白表达明显降低(P<0.05);较之SMMC-7721组和RNAi-NC组,RNAi-Smad4-2组及RNAi-Smad4-12组细胞的划痕愈合时间更快,3D培养环境中干扰组细胞边缘不规则,向周围凝胶渗透;RNAi-Smad4-2组和RNAi-Smad4-12组细胞中fascin和cortactin的蛋白表达量均高于SMMC-7721组和RNAi-NC组细胞(P<0.05)。结论低表达Smad4后可通过上调细胞骨架相关蛋白fascin和cortactin,进而促进肝癌细胞SMMC-7721的迁移能力。 相似文献
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目的 检测具有不同转移能力的结肠癌细胞亚系中皮层肌动蛋白的表达,探讨皮层肌动蛋白的差异表达与结肠癌转移的相关性.方法 本实验应用具有不同肝转移能力的结肠癌细胞系SW1116、人结肠癌皮下5代细胞系(SW1116_5)、人结肠癌肝转移细胞系1代(CRCLM1)和人结肠癌肝转移细胞系3代(CRCLM3).4种细胞在皮下成瘤后再原位种植到裸鼠结肠观察其肝脏转移能力的差异,用Western blotting和real time-PCR检测皮层肌动蛋白表达的差异,同时行体外迁移侵袭实验检测癌细胞的侵袭转移能力的差异,免疫组化方法分析临床86例结肠癌组织中皮层肌动蛋白的表达情况及其与临床病理特征之间的关系.结果 Western blotting和real time-PCR均证实在4种细胞中皮层肌动蛋白表达自SW1116、SW1116_5、CRCLM1、CRCLM3逐渐增高,四者两两比较差异有统计学意义,均P<0.05;动物实验证实CRCLM3(100%)和CRCLM1(89%)与SW1116(40%)和SW1116_5(44%)相比具有较强的转移能力,免疫组化提示皮层肌动蛋白表达在86例中57例(66%)为强阳性,29例(34%)为阴性.结论 皮层肌动蛋白差异表达与结肠癌的转移以及临床分期呈正相关,皮层肌动蛋白有可能成为结肠癌临床分期以及肿瘤转移的判断指标. 相似文献
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目的探讨Cortactin及Exo70在肝细胞肝癌(HCC)中的表达及临床意义。方法回顾性选取2017年1月至2019年12月空军特色医学中心治疗的106例HCC患者并作为HCC组,以及收集同期正常肝组织40例作为对照组。采用免疫组织化学染色法检测Cortactin及Exo70表达。分析Cortactin及Exo70表达与HCC患者临床病理特征、预后的关系。分析Cortactin与Exo70表达相关性。结果HCC组Cortactin及Exo70阳性表达率(59.43%、50.94%)明显高于对照组(27.50%、17.50%),差异有统计学意义(P<0.05)。HCC组TNM分期Ⅲ~Ⅳ期组织Cortactin及Exo70阳性表达率(82.93%、80.49%)高于Ⅰ~Ⅱ组织(44.62%、32.31%),差异有统计学意义(P<0.05);有淋巴结转移组织Cortactin及Exo70阳性表达率(75.51%、79.59%)高于无淋巴结转移(45.61%、26.32%),差异有统计学意义(P<0.05);有门静脉侵袭组织Cortactin及Exo70阳性表达率(80.65%、77.42%)高于无门静脉侵袭组织(50.67%、40.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。HCC组织中Cortactin与Exo70表达呈正相关(rs=0.611,P<0.05);Cortactin和Exo70共阳性表达患者中位总体生存时间为19个月(95%CI:16.16~21.84),明显短于Cortactin和Exo70共阴性表达患者34个月(95%CI:31.45~36.54),差异有统计学意义(P<0.05),与Cortactin和Exo70单阳性表达患者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论HCC组织Cortactin及Exo70表达上调,与TNM分期、淋巴结转移及门静脉侵袭有关,同时两者表达间存在正相关关系,与患者预后可能存在一定关系。 相似文献
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目的探讨蛋白激酶C-ζ(PKC-ζ)、皮质肌动蛋白(Cortactin)在大肠癌组织、癌前病变组织(腺瘤性息肉)、正常组织中的综合表达及其意义。方法采用免疫组织化学SP法,检测三种不同组织中PKC-ζ和Cortactin的表达,分析PKC-ζ、 Cortactin在大肠癌中的表达意义、与临床病理因素的关系及其两者表达的相互关系。结果(1)PKC-ζ和Cortactin表达均数大肠癌组织比大肠腺瘤组织及正常组织高,差异有统计学意义(P<0.05);(2)PKC-ζ与Cortactin的表达均与肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤部位、大小和组织类型无关(P>0.05);(3)PKC-ζ的阳性表达与Cortactin的阳性表达正相关(r=0.574,P<0.05)。结论PKC-ζ和Cortactin可作为大肠癌预后判断及肿瘤分期监测的有价值的指标。联合检测PKC-ζ和Cortactin对预测大肠癌的侵袭转移潜能及评估大肠癌病人的预后有重要意义。PKC-ζ与Cortactin可能作为大肠癌检测的肿瘤标记物和治疗的分子靶点。 相似文献
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沉默Cortactin表达对大肠癌细胞伸展、迁移和侵袭的抑制 总被引:1,自引:0,他引:1
目的: 研究Cortactin对大肠癌细胞运动性和侵袭力的影响.方法: HT- 29细胞常规培养,在体外合成Cortactin siRNA后转染结肠癌细胞,通过Western blot和免疫荧光观察转染后Cortactin表达量变化,通过癌细胞体外迁移侵袭实验和伸展实验来观察转染后癌细胞伸展、迁移和侵袭能力的改变.结果: Western blot和免疫荧光显示Cortactin在siRNA处理后癌细胞内的表达水平明显下降;癌细胞经过Cortactin siRNA处理后细胞的胞膜展开比对照组晚;Cortactin siRNA处理的大肠癌细胞和对照GFP siRNA处理的癌细胞通过涂胶基膜和微孔的细胞数目统计分别为60±15个和340±45个,两者差异有统计学意义( P<0.01).结论: Cortactin可能对大肠癌的侵袭转移发挥作用. 相似文献
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Cortactin in tumor invasiveness 总被引:3,自引:0,他引:3
Weaver AM 《Cancer letters》2008,265(2):189-166
Cortactin is a cytoskeletal protein and src kinase substrate that is frequently overexpressed in cancer. Animal studies suggest that cortactin overexpression increases tumor aggressiveness, possibly through promotion of tumor invasion and metastasis. Recently, many studies have documented a role for cortactin in promoting cell motility and invasion, including a critical role in invadopodia, actin rich-subcellular protrusions associated with degradation of the extracellular matrix by cancer cells. Here, I review the evidence and potential mechanisms for cortactin as a critical mediator of tumor cell invasion. 相似文献
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Cortactin的特征、功能及与肿瘤的关系 总被引:1,自引:0,他引:1
细胞皮质区肌动蛋白结合蛋白(cortical actin-binding protein,Cortactin)是一种含有特殊重复序列结构域的微丝肌动蛋白结合蛋白,它直接参与了细胞皮层微丝细胞骨架的组建。它又是细胞内Src类酪氨酸蛋白激酶主要底物之一,代表了一类高度保守的胞内皮层信号蛋白质家族。近几年来,对于Cortactin在细胞中的作用及其在细胞运动中分子机制的研究取得很大进展。 相似文献
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目的研究皮动蛋白基因在结直肠组织中的表达,分析其与临床病理因素及肿瘤侵袭性转移和预后的关系。方法采用免疫组化ELIVISION二步法,检测皮动蛋白基因在27例正常黏膜组织,13例结肠腺瘤组织及80例结直肠癌组织中的表达。结果皮动蛋白表达在结直肠癌中明显高于结肠腺瘤和正常黏膜组织,正常黏膜中表达率为11.1%,结肠腺瘤中表达率为76.9%,结直肠癌中皮动蛋白阳性表达率为82.5%,组间差异均具有统计学意义(P<0.01);皮动蛋白阳性表达在低中分化癌中均显著高于高分化癌(P<0.01);有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P<0.01);TNM分期Ⅲ~Ⅳ期组中表达显著高于Ⅰ期组(P<0.01);同时皮动蛋白的表达水平与肿瘤浸润深度、5年生存率有显著相关性(P<0.01);与性别、年龄、部位、肿瘤大小、病理类型等无关(P>0.05)。结论皮动蛋白基因的高表达与肿瘤细胞的侵袭性转移性有关,可以被用作判断结直肠癌预后的一个标志。皮动蛋白的高表达不仅可以判断结肠癌的预后而且对诊断癌前易感病变具有重要参考价值,同时提示可能在大肠腺瘤的形成中起重要作用。 相似文献