利用转录组测序分析与华重楼种子休眠解除相关差异基因

为探究华重楼种子休眠解除过程中差异基因的表达情况及相关代谢通路,以华重楼休眠解除前后种胚为材料,利用新一代高通量测序手段对供试样品进行转录组测序并进行系统生物信息学分析。从cDNA文库中分别获得62 882 650,62 263 366个clean reads,共得到69 248个差异表达基因,上调的表达基因有56 426个,下调的表达基因有12 822个。共有138 267个差异表达基因被GO功能注释到生物进程、分子功能和细胞组分3个大类58个亚类,注释的差异表达基因与代谢过程、生物调控、细胞组分合成和酶催化活性等密切相关。对58 722个差异表达基因进行pathway显著性富集分析,共发现139个代谢通路,休眠前后的DEGs主要富集在碳代谢、次生代谢产物生物合成和多糖代谢等途径。基于KEGG数据库中注释结果,共发现16条与华重楼休眠解除相关的代谢通路。华重楼种子发育与休眠解除过程中大量与种胚形态建成、多糖分解及蛋白质合成的差异基因参与表达,涉及到多个代谢途径的相互作用,构成复杂的休眠解除调控网络。     

柱前衍生HPLC分析黄连多糖的单糖组成

目的:建立柱前衍生HPLC测定黄连多糖中的单糖组成,并分析3种黄连多糖的单糖差异。方法:采用水提醇沉法提取黄连多糖,经硫酸水解后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生,再利用HPLC法分析单糖的PMP衍生物。结果:黄连多糖主要由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖7种单糖组成,其中半乳糖醛酸含量最高,葡萄糖次之。另外,雅连多糖、云连多糖和味连多糖中的7种单糖的平均摩尔比分别为1∶2.34∶0.38∶17.58∶12.40∶6.11∶5.93,1∶2.43∶0.25∶16.76∶15.18∶6.51∶9.78和1∶3.25∶0.40∶22.35∶12.96∶6.66∶10.28。结论:建立的方法简便、准确,重复性好,可用于黄连多糖中单糖的组成分析和含量测定。雅连多糖、云连多糖和味连多糖中的7种单糖含量有差异。     

黄连生育期间可溶性糖和氨基酸含量动态的研究

目的:通过研究黄连生育期间可溶性糖和游离氨基酸的变化动态规律,为制定黄连规范化栽培措施提供理论依据。方法:黄连游离氨基酸含量测定用茚三酮比色法,黄连可溶性糖含量测定使用硫酸蒽酮水合热法。结果与结论:黄连生育前期(1~2年)各器官的氨基酸和可溶性糖含量低,黄连生育中期(3~4年)的氨基酸和可溶性糖含量显著上升,生育后期(5年)的根茎和花苔的游离氨基酸含量继续上升,须根和叶游离氨基酸含量下降;除了花苔可溶性糖含量呈现上升趋势外,根茎、叶、须根可溶性糖含量呈现下降趋势。在同年生的黄连中,不同物候期间黄连植株各器官的游离氨基酸和可溶性糖含量随着生长中心的转移而发生规律性变化。     

栽培射干化学成分的分离与鉴定(Ⅱ)

从栽培射干根茎中分离出两个异黄酮类化合物Ⅲ和Ⅳ。根据理化常数和光谱数据,证明成分Ⅲ为鸢尾甙(tectoridin);成分Ⅳ为鸢尾甙元(tectoriginin)。     

山东产中药瞿麦原植物的调查与鉴定

通过调查和分类鉴定,山东产中药瞿麦原植物有4种2变种,其中山东石竹为一新种,兴安石竹为山东分布新记录。石竹为山东产瞿麦药材的主流,兴安石竹和辽东石竹次之,偶见山东石竹;瞿麦和长萼瞿麦未形成商品药材。     

不同溶剂对弥猴桃果实中氨基酸与微量元素提取率的影响

目的　考察 95 %的乙醇 ;75 %的乙醇及水对弥猴桃果实中氨基酸与微量元素的提取差异。方法　用氨基酸自动分析仪 ,原子吸收分光光度计分别对不同溶剂提取的氨基酸、微量元素样品进行测定。结果　以 75 %的乙醇提取效果优于 95 %的乙醇及水的提取。结论　以 75 %的乙醇提取为最佳。     

石香薷精油对白纹伊蚊的生物活性研究及其成分分析

目的测定石香薷（Moslem chinensis Maxim）精油对白纹伊蚊（Aedes albopictus）的生物活性,分析石香薷精油的化学成分,为开发植物源蚊虫控制剂提供研究基础。方法水蒸汽蒸馏法提取石香薷精油;采用浸液法测定精油对白纹伊蚊4龄期幼虫及蛹的毒杀活性;采用人体局部涂肤法测试其对成蚊的驱避活性;通过气相色谱-质谱联用法分析石香薷精油的化学成分。结果 （1）石香薷精油对4龄期幼虫及蛹的24hLC50值分别为78.820和122.656μg/ml;（2）涂抹1.5mg/cm^2的纯精油,对成蚊有（2.330±0.167）h的完全保护时间,6h后仍然有56%的保护率;（3）从精油中共检出44种化合物,鉴定出39种,占总量的98.67%。主要成分有：对-聚伞花素（23.17%）、香荆芥酚（16.83%）、百里香酚（14.92%）、2-异丙基-4-甲基茴香醚（12.89%）、桉树脑（8.48%）、石竹烯（3.96%）、α-石竹烯（3.16%）和乙酸瑞香酯（2.71%）。结论石香薷精油对白纹伊蚊幼虫及成蚊均有较强的生物活性,具有从中发现新的灭蚊天然活性化合物和研发成环保型蚊虫控制剂的潜力。     

川渝产黄连提取液颜色与有效成分相关性研究

目的探讨四川、重庆所产黄连的提取液颜色值与其有效成分的相关性。方法依据CIE L^*a^*b^*数字化系统,采用分光测色计测定色度值,HPLC测定有效成分含量。结果黄连的亮度与盐酸小檗碱、黄连碱呈显著负相关,红色方向与盐酸小檗碱、黄连碱呈显著正相关,且其黄色方向与盐酸小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱的含量均呈显著正相关。结论黄连提取液的色度值与有效成分具有相关性,黄连提取液的色度值可以反映黄连的成分含量,为黄连建立简捷、快速质量评价技术方法奠定基础。     

HPLC法测定石见穿中丹酚酸B的含量

目的:建立测定石见穿中丹酚酸B含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Thermo C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(21∶79,V/V),流速为1.0 ml/min,检测波长为286 nm,柱温为23℃。结果:丹酚酸B的进样量在0.153³.060μg范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 8);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<1%;平均加样回收率为97.70%,RSD=0.56%(n=6)。结论:该方法操作简便、准确可靠、重复性好,可作为石见穿药材的质量控制方法。     

不同品系黄连产量和质量的研究

目的考察和比较湖北黄连GAP基地选育的3个不同品系黄连(大花叶、无光叶、小花叶)的产量和质量。方法采用田间随机区组设计,连续3年采集3个品系黄连根茎样品,分别以烘干法测定其质量,用紫外分光光度法和高压液相色谱法分别测定其总生物碱和盐酸小檗碱的量。结果在考察的3个品系药材样本中,各品系三年生黄连产量没有显著差异(P>0.05),在四年生和五年生黄连中,大花叶和无光叶品系产量均明显高于小花叶品系(P<0.05);在三年生、四年生、五年生黄连中,各品系总生物碱和盐酸小檗碱的量无明显差异(P>0.05)。结论大花叶和无光叶品系的黄连产量高、质量合格,可作为黄连规范化种植的种子基原。