耐药基因检测及体外药敏试验在卵巢癌个体化治疗中的价值

目的 探讨卵巢癌耐药基因表达与体外药敏试验及临床生物学行为的关系.方法 采用流式细胞术和MTT法对60例卵巢癌患者分别检测组织中的COX-2、CX43、P-gp基因表达和对常用化疗药物的敏感性,并对其临床近期疗效关系进行分析.结果 COX-2表达在顺铂(DDP)耐药组高于DDP敏感组,差异有统计学意义(P=0.01).CX43表达在DDP耐药组低于DDP敏感组,差异有统计学意义(P=0.005).P-gp表达在对依托泊苷(VP16)耐药组高于VP16敏感组,差异有统计学意义(P=0.009).CX43表达在对紫杉醇(Taxol)耐药组低于Taxol敏感组.差异有统计学意义(P=0.001).COX-2高表达、CX43低表达、P-gp高表达的癌组织对化疗药物的敏感性低于COX-2低表达、CX43高表达、P-gP低表达者.5-Fu、CBP、VCR、PYM、EPI、GEM的敏感性与COX-2、CX43、P-gp表达高低无显著相关性.结论 卵巢癌组织中COX-2与P-gp高表达、CX43低表达与部分化疗药物的体外药敏试验敏感性有关.耐药基因相关蛋白COX-2、P-gp、CX43的检测,结合肿瘤药敏试验结果选择敏感化疗方案能提高化疗疗效.从而使卵巢癌治疗个体化.     

急性淋巴细胞白血病骨髓基质细胞缝隙连接功能的研究

目的：研究急性淋巴细胞白血病骨髓基质细胞缝隙连接的功能方法：体外培养正常（正常对照组）及急性淋巴细胞白血病（急淋组）原代骨髓基质细胞,采用细胞免疫组化法及计算机灰度检测观察两组之间Connexin 43表达的变化,采用细胞划痕染料传输技术比较两组之间缝隙连接细胞间通讯（GJIC）功能的差异。结果：急性淋巴细胞白血病骨髓基质细胞Connexin 43的表达较正常骨髓基质细胞明显减低,GJIC功能减弱。结论：急性淋巴细胞白血病骨髓基质细胞缝隙连接功能下降可能与白血病骨髓造血微环境功能异常有关。     

缝隙连接通讯抑制剂对Cx43cDNA转染后化疗旁观者效应的影响

背景与目的:有研究通过转染Cx43cDNA观察到C6细胞化疗过程中存在旁观者效应,并推测缝隙连接细胞间通讯可能为化疗旁观者效应机制之一,本研究旨在探讨脑胶质瘤化疗旁观者效应与缝隙连接细胞间通讯功能的关系。方法:(1)质粒扩增,提取纯化及酶切鉴定:氯化钙法将质粒转入JM109菌株扩增,提取纯化后酶切鉴定;(2)基因转染:LipofectAMINE2000介导C6细胞质粒DNA转染,G418筛选,半定量RT-PCR及划痕荷载染料传输实验(SLDT)鉴定。(3)将转染后细胞分为实验组和对照组:将VM-26处理细胞与VM-26未处理细胞按不同比例在无VM-26环境混合培养,培养液中加入缝隙连接细胞间通讯功能抑制剂18α-次甘草酸(AGA)为实验组,不加AGA为对照组,以MTT法及流式细胞仪技术观察AGA对Cx43cDNA转染后化疗旁观者效应的影响。结果:(1)获得转染了相应质粒的细胞株C6-Cx43及C6-Non;(2)C6-Cx43细胞Cx43mRNA表达显著增加,染料传输能力较C6-Non明显增强;(3)C6胶质细胞缝隙连接细胞间通讯功能低下;(4)当转染Cx43cDNA,明显上调C6细胞缝隙连接细胞间通讯功能后...     

连接蛋白43在鼻咽癌组织细胞中的表达

目的 :探讨连接蛋白 4 3(Connextion ,Cx4 3)的表达与鼻咽癌组织细胞的相关性。方法 :采用激光扫描共聚焦显微镜和荧光技术 ,对 18例鼻咽癌和 10例鼻咽慢性炎症组织细胞中 ,Cx4 3的表达进行形态观察和定量分析。结果 :Cx4 3在鼻咽癌组织细胞膜中的表达显著低于鼻咽慢性炎症组织 ,两组细胞膜的Cx4 3荧光值之间差异具有非常显著性意义 (P <0 .0 1)。结论 :Cx4 3的表达水平与鼻咽癌的发生和发展有关 ,细胞间隙连接通讯减弱或缺失是鼻咽癌形成及恶性转变的重要因素之一。     

连接蛋白43在正常胎儿和室间隔缺损患儿心脏的表达

目的 探讨正常胎儿和室间隔缺损患者心脏连接蛋白43（Cx43)表达的分布规律。方法 应用SP免疫组化方法。检测10例正常胎儿和5例室间隔缺损患者心肌细胞Cx43的蛋白表达。结果 1、Cx43主要在心室肌表达，心房较少，2、正常胎儿心室肌细胞的Cx43多数分布于细胞表面，少数位于闰盘处，3、室间隔缺损心肌Cx43表达的颗粒细小，分布不均。结论 Cx43的表达在胎儿时期主要位于心肌细胞表面，闰盘处少。室间隔缺损在未出现心功能异常之前对Cx43的表达影响不明显。     

连接蛋白与心房颤动相关性的研究进展

心房颤动是一种常见的心律失常,微波折返和异位起搏点的驱动触发作用在心房颤动起始和维持中有着重要的意义。连接蛋白是构成缝隙连接的主要成分,缝隙连接的主要功能是提供细胞间电流通路,保证动作电位协同的扩布。由于连接蛋白表达水平和空间分布的改变引起的传导速度不均和各向异性减弱,在微波折返以及肺静脉袖的异位起搏中发挥重要作用。因此,连接蛋白在心房颤动的发生、发展中意义重大。     

整合素β3和细胞间隙连接蛋白43与体外受精-胚胎移植妊娠结局的关系

目的:探讨子宫内膜整合素β3、细胞间隙连接蛋白43表达水平与体外受精-胚胎移植妊娠结局的关系,进而分析其与子宫内膜容受性的相关性。方法:前瞻性收集了IVF/ICSI-ET病例36例,其中11例临床妊娠者作为妊娠组,25例未妊娠者作为非妊娠组。于黄体中期取内膜,应用单克隆抗体免疫组化方法检测子宫内膜整合素β3和Cx43表达情况。结果:妊娠组与非妊娠组子宫内膜腔上皮整合素β3表达的HSCORE平均分数分别为0.55(0.00~1.60)和0.07(0.00~1.10),差异有显著性(P=0.02);而子宫内膜腺上皮整合素β3表达比较,两组之间差异无显著性;子宫内膜间质细胞和上皮细胞中Cx43表达在两组均未发现统计学差异。结论:子宫内膜腔上皮整合素β3表达水平可能与体外受精-胚胎移植妊娠结局有相关性。     

Cx基因在胃癌细胞株中的表达及诱导分析

目的：探讨胃癌细胞株ＭＧＣ８０３在全反式维甲酸（ａｌｌ－ｒａｎｓ－ｒｅｔｉｎｏｉｃ,ＲＡ）、佛波酯（ｐｈｏｒｂｌｏ ｅｓｔｅｒ,ＴＰＡ）及二甲基亚砜（ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ,ＤＭＳＯ）３种诱导剂分别作用后,胃癌细胞中间隙连接蛋白（ｃｏｎｎｅｘｉｎ,Ｃｘ）基因表达变化。方法;采用比较多重ＲＴ－ＰＣＲ－Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法检测。结果：维甲酸、二甲基亚地胃癌细胞基因组中Ｃｘ４３基     

Characterization of gap junctions between osteoblast-like cells in culture

Summary The structure of gap junctions in osteoblast-like cells (OBs) and the connexins (cx) that build up these structures were characterized by ultrastructural, immunocytochemical, and molecular techniques. Ultrastructural studies revealed numerous gap junctions which were mostly located on processes of neighboring cells. Immunofluorescence labeling using two different antibodies (specific to mouse live cx26 and cx32 and to a peptide-specific rat heart gap junction protein cx43) gave evidence that in OBs, gap junctions consist mainly of cx43. The presence of cx43 in cultured OB was also confirmed by Western blot analysis. Dye-coupling with Lucifer yellow led to a staining of up to 30 neighboring cells. Parallel intracellular recordings showed that membrane potential amplitude changes (4–5 mV) are typically related to those in the coupled cells. Thus, there is morphological and functional evidence for intercellular communication between OB in culture. OBs in culture express the same connexins as observed in vivo and may serve as a model to investigate electrophysiological events in response to different stimulation signals.     

Audiological profile of the prevalent genetic form of childhood sensorineural hearing loss due to GJB2 mutations in northern Greece

The present study describes the audiological profile of genetic hearing loss resulting from GJB2 mutations in northern Greece, as this represents the most frequent single cause of childhood sensorineural hearing loss. The 35delG mutation in homozygosity was detected in 27 of 107 patients (25.2%). The audiological profile is that of a profound or severe sensorineural hearing loss, with a sloping or flat configuration of the audiogram, mostly symmetrical, non-progressive and affecting more the higher frequencies. This profile underlines the importance of early identification and genetic family counseling leading to the future possibility of prevention of deafness.