血清 PCT 和 hs－CRP 检测在 AECOPD 患者中的临床价值

目的：探讨血清降钙素原（PCT）和超敏C反应蛋白（hs－CRP）检测在慢性阻塞性肺疾病急性加重期（ AECOPD）患者加重病因判定中的临床价值。方法：选择慢性阻塞性肺疾病（ COPD）稳定期患者50例（稳定组）和加重期患者50例（加重组）,测定血清PCT和hs－CRP。结果：加重组患者血清PCT和hs－CRP 水平均高于稳定组,差异有统计学意义（ P＜0．05）。感染组患者血清PCT 和hs－CRP水平均高于非感染组,差异有统计学意义（ P＜0．05）。判定AECOPD 患者是否由感染因素加重,血清PCT的敏感性87．50％、特异性72．22％、准确性82．00％,血清hs－CRP 的敏感性90．63％、特异性66．66％、准确性82．00％,二者联合的敏感性96．88％、特异性94．44％、准确性96．00％。结论：COPD患者急性加重期血清PCT和hs－CRP水平升高,因感染原因加重者血清PCT和hs－CRP 水平更高,血清PCT联合hs－CRP 有利于判定COPD加重的原因。     

新疆四个苯丙酮尿症家系的基因诊断

目的：研究新疆苯丙酮尿症（PKU）家系苯丙氨酸羧化酶（PAH）基因突变位点及其遗传标记,探索适合新疆各民族PKU基因诊断和产前基因诊断途径。方法：联合采用PCR－STR、APSCR和PCR－SSCP3种基因诊断方法进行分析。结果：（1）PCR－STR连锁分析表明：除家系4母亲为STR纯合型外,其余家系双亲皆为杂合子,对家系1（维吾尔族）1例风险胎儿（妊娠6周,流产）进行产前基因诊断和1例新生儿（出生1d）进行症前基因诊断,均为携带者,并经出生后证实。（2）采用ASPCR法在家系1、2和3均未检出R243Q和R413P两种常见突变。（3）应用PCR－SSCP分析发现,家系2（回族）患儿为外显子7突变纯合子,家系4（汉族）患儿为外显子7和外显子11突变复合体,其外显子11突变位于第399位点（GTA→GTT）,可能为一致病突变。结论：上述3种基因诊断方法联合使用简便、快捷,适合新疆地区的基因诊断和产前基因诊断。     

MMP-9/TIMP-1在脂多糖和N-乙酰半胱氨酸干预体外孵育胎膜中的表达及意义

目的探讨感染引发早产的可能机制及N-乙酰半胱氨酸(NAC)预防感染引发早产的可行性。方法取20例正常择期剖宫产孕妇(无妊娠合并症及临产征兆)的胎膜在体外进行孵育,共分成5组:0 h组(取下后未经孵育的胎膜),24 h组,48 h组,72 h细菌内毒素脂多糖组(LPS组),72 h LPS NAC组(LPS NAC组)。首先评价体外孵育胎膜的存活力,然后应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分别测定5组胎膜的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)mRNA表达水平的变化,最后比较LPS组和LPS NAC组MMP-9/TIMP-1比值的变化。结果体外孵育胎膜的存活力达到83%±1.9%,RT-PCR可见0 h组及48 h组的MMP-9表达微弱,24 h组的表达较前两组增强(P<0.05),LPS组的表达最强(与24 h组比较P<0.01),LPS NAC组的表达低于LPS组(P<0.01),各组TIMP-1的表达无明显区别(P>0.05),LPS NAC组较LPS组MMP-9/TIMP-1比值明显降低(P<0.01)。结论MMP-9/TIMP-1比值升高可能是感染引发早产的机制之一,NAC有望在预防和治疗早产中发挥作用。     

山东省HCV分离株C 区及NS5 区核苷酸序列分析

①目的 探讨山东省丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）分离株Ｃ区、ＮＳ５区的核苷酸序列及其基因型别。②方法 以ＲＴ－ｎｅｓｔ－ＰＣＲ方法从１例临床ＨＣＶ感染者血清中分别扩增出ＨＣＶＣ区（４３２ｂｐ）及ＮＳ５区（３１９ｂｐ）的基因片段,将其克隆于Ｔ载体上,以双脱氧末端终止法自动测序并进行序列分析。③结果 该分离株与ＧｅｎＢａｎｋ中５０多个１ｂ型分离株同源性均在９０％以上,其中Ｃ区与中国北京的１ｂ型株ＨＣＵ６３３７     

标本因素对荧光定量PCR检测HBV DNA的影响

目的: 探讨标本溶血、黄疸、脂血对荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒(HBV)DNA的影响。方法: 荧光定量PCR检测无溶血、无黄疸、非脂血血清和溶血、黄疸、高脂血清标本的HBV DNA。结果: 溶血、黄疸、高脂血血清与无溶血、无黄疸、非脂血血清HBV DNA定量检测结果差异均无统计学意义(P>0.05)。结论: 标本溶血、黄疸、脂血对荧光定量PCR检测HBV DNA无干扰。     

小干扰RNA干扰大鼠神经元Nogo受体mRNA表达的实验研究

目的观察大鼠Nogo受体(NgR)特异性小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)在原代神经元干扰其mRNA表达的效果。方法体外培养大鼠原代皮层和海马细胞,应用阳离子脂质体转染试剂转染4对化学合成的大鼠NgR特异性siRNA,72h后提取细胞总RNA,实时荧光定量RT-PCR检测NgR mRNA表达情况。结果4对siRNA均能够下调靶基因NgR的mRNA表达水平,siNgR199、siNgR562、siNgR772和siNgR964等干扰后,NgR mRNA的表达分别为对照siRNA干扰组的6.5%、62.4%、15.2%和6.86%,与对照siRNA干扰组比较有统计学意义(P<0.05)。结论化学合成的NgR特异性siRNA能够有效的干扰大鼠原代皮层和海马细胞内NgR基因mRNA的表达水平。     

多重耐药大肠埃希菌基因分型及其与耐药表型的关系

目的分析福州地区临床分离的多重耐药大肠埃希菌的基因型及其与细菌耐药表型的关系。方法收集临床分离的多重耐药大肠埃希菌88株,采用K—B法进行药敏试验。多重PCR法进行基因分型。结果多重PCR法可将大肠埃希菌分为4个基因型,其中检出D型42株,B2型17株,A型17株,B,型12株。4组基因型对阿米卡星、头孢他啶、头孢曲松、头孢噻肟和妥布霉素的耐药率差别有统计学意义（P〈O．05）。结论多重耐药大肠埃希菌对多种抗生素具有很高的耐药性。基因分型以致病性较强的B2型与D型为主,应采取相应措施预防院内感染。     

利用退火反应产生粘性末端的基因克隆新方法

目的通过引物设计和退火反应产生内切酶的粘性末端,旨在开发一种高效、简单、可靠的分子克隆方法。方法选定限制性内切酶（平末端或者粘性末端）设计3条或4条引物,同时进行两次独立的聚合酶链式反应（PCR）,随后把两次PCR产物回收后混在一起经过解链退火,再将其与双酶切的载体质粒进行连接反应,最后转化即可得到目的克隆。结果利用此方法成功一次性将若干靶基因（P90rsk、Nprl2、Mios、Ragc、S6k、Pkca）构建在经EcoRV和NotI双酶切后的pcDNA3.1(+)载体上,经酶切及测序验证。结论该方法无需考虑靶基因内部是否存在酶切位点,可省去PCR产物酶切及之后的纯化回收过程,可快速并准确地克隆目标基因。     

高碘酸银钾合成宏观反应动力学

建立了在强碱、强氧化条件下,由硝酸银合成高碘酸银钾的液固配合反应宏观动力学模型,推导了两种条件下的动力学方程式,并经实验验证。高碘酸根的初始浓度c0AL≤55.6 mmol/L时,反应为传质控制,动力学表达式为［1-(1-xB)1/2］·(1+110.7x1/2.04B)=t;当55.6 mmol/L≤c0AL≤139 mmol/L时,反应处于传质和反应阻力共存区,动力学表达式为100.6［1-(1-xB)1/2］·［1-(1-xB)1/1.51］=t。与实际数据相比较,两种情况下的动力学方程式均有良好的     

丙型肝炎病毒感染与HCC相关性的研究

目的：探讨丙型肝炎病毒（HCV）感染与肝细胞癌发生的关系。方法：用聚合酶链反应（PCR）对淮南地区92例肝癌、117例肝硬化和100例肝癌切 除的肝组织标本进行HCV-RNA检测,并以限制性片段长度多态性分析对其中89例HCV-RNA阳性血清进行了HCV基因分型。结果：肝癌组HCV感染率29.3%,肝硬化组HCV感染率26.5%,肝组织标本组HCV感染率31.0%;各组均以HCVⅡ型为（65.2%）,HCVⅢ型次之（31.5%)。结论：淮南地区肝癌的诱发与HCV感染密切相关,HCVⅡ型在本地区HCV相关性肝癌和肝硬化的发生中可能起主要作用。