扶正抗癌方通过PTEN/PI3K/Bad通路调控肺癌A549细胞增殖与凋亡

目的:观察扶正抗癌(FZKA)方对肺癌细胞A549增殖的调控作用,探讨其作用的分子机制。方法:以非小细胞肺癌细胞A549为研究对象,以FAKA方0.8,1.2,1.6,2.0,2.4,2.8,3.2 g·L~(-1)干预,空白组,分别孵育24,48,72 h后,设立采用噻唑蓝(MTT)比色法检测FZKA方对A549细胞活力的影响;以FAKA方1.2,1.6,2.0 g·L~(-1)干预,设立空白组,培养24 h后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测FZKA方对A549细胞人第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)mRNA水平的影响;孵育24 h后,采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)分析FZKA方对PTEN,磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K),磷酸化的促凋亡蛋白Bad(Phospho-Bad,p-Bad)表达的影响并探讨其相关性。结果:与空白组比较,FZKA方能明显抑制A549细胞增殖,处理24 h后,FZKA从0.8 g·L~(-1)开始,处理48,72 h后,FZKA方从0.4 g·L~(-1)开始,细胞存活率明显降低(P0.05,P0.01);与空白组比较,处理24 h后,FZKA方从0.8 g·L~(-1)开始以浓度依赖性上调PTEN mRNA和蛋白的表达(P0.05,P0.01),FZKA方从1.6 g·L~(-1)开始以浓度依赖性下调PI3K蛋白表达(P0.05,P0.01),从2 h开始以时间依赖性上调p-Bad蛋白的表达(P0.05,P0.01)。结论:FZKA方可通过上调PTEN来调控下游PI3K/Akt/Bad通路相关蛋白的表达进而抑制A549的增殖,促进肺癌细胞凋亡。     

精氨酸-天冬氨酸抗涎腺腺样囊性癌实验性肺转移的研究

目的 研究精氨酸－天冬氨酸（Arg-Asp,RD)抗涎腺腺样囊性癌实验性肺转移（salivary adenoid cystic carcinoma lung metastation,SACC-LM)的作用。方法 观察不同剂量、不同时间RD灌胃对SACC－LM的影响。结果30mg/kg和120mg/kgRD灌胃可抑制SACC－LM的形成；7．5mg/kg、30mg/kg、120mg/kgRD灌胃均可延长SACC－LM鼠的生存期。结论 RD毒性小、可经口给药，具有抗SACC－LM的作用。     

融合防龋DNA疫苗pGLUA-P的构建及其细胞表达研究

目的 将变形链球菌（Streptococcus mutans)表面蛋白PAc编码A区和P区（A－P）的序列克隆到真核载体pGLU中，构建出GTF－PAc融合防龋DNA疫苗，并检测其在原核细胞和真核细胞中的表达。方法 将pCIA-P质粒中A－P片段序列与pGLU质粒连接，构建出GTF－PAc融合防龋DNA疫苗pGLUA-P。将pGLUA-P转化大肠杆菌BL21（DE3），以SDS－PAGE电泳鉴定目的蛋白GLUA－P的表达。通过脂质体将pGLUA-P转染大鼠原代肌母细胞，以免疫组织化学检测GLUA－P的表达。结果 GTF－PAc融合防龋DNA疫苗pGLUA-P经酶切分析证实携带GLU和A－P片段。pGLUA-P转化的大肠杆菌BL21（DE3）经IPTG诱导能够表达完整的融合蛋白。pGLUA-P转染的大鼠原代肌母细胞中可检测到融合蛋白的表达。结论 成功地构建了融合防龋DNA疫苗pGLUA-P，所携带的基因序列正确，能够在原核和真核细胞中表达正确的融合蛋白。     

纯钛表面牙周韧带细胞牙骨质附着蛋白的表达

目的以牙骨质附着蛋白为分化指标，分析牙周韧带细胞在纯钛表面的分化趋势，并探讨诱导矿化对牙周韧带细胞牙骨质附着蛋白表达的影响。方法第三代牙周韧带细胞在商用纯钛表面接种后，分别进行常规培养和矿化液诱导矿化培养，通过免疫荧光原位检测牙骨质附着蛋白的表达，并比较诱导矿化对牙骨质附着蛋白表达的影响。结果牙周韧带细胞在纯钛表面初期呈条纹状生长，常规培养和诱导矿化培养务件下均能表达牙骨质附着蛋白，诱导矿化对牙骨质蛋白的表达无明显影响。结论在常规培养务件和诱导矿化培养条件下，纯钛表面生长的牙周韧带细胞能高度表达牙骨质附着蛋白，提示纯钛表面体外培养的牙周韧带细胞具有形成牙骨质的分化趋势，从而可为种植体周构建牙周韧带结构提供在种植体侧的锚着点。     

骨纤维异常增殖症发病机制的研究进展

骨纤维异常增殖症是一种口腔颌面部较常见的纤维骨病变,近年来对其发病机制研究较多。本文就激活型G蛋白α亚基基因(Gsα基因)突变在骨纤维异常增殖症发病中的作用和骨纤维异常增殖症患者的骨病变、内分泌功能亢进及皮肤色素斑的具体机制作一综述。     

颌骨骨肉瘤中BMP-2mRNA的表达及其与淋巴结转移的关系

目的：观察颌骨骨肉瘤(osteosarcoma of the jaw，OSJ)中BMP-2 mRNA的表达，并探讨其与淋巴结转移的关系。方法：采用原位杂交方法．对21例OSJ标本进行BMP-2 mRNA检测。应用卡方检验．对OSJ中BMP-2 mRNA表达与淋巴结转移问的关系作统计分析。结果：21例OSJ中，17例BMP-2mRNA表达阳性(80.95％)，包括全部15例成骨细胞型和2例(2／4)成软骨细胞型OSJ。梭形或多边形的肿瘤细胞．细胞质中可见明显的阳性染色。12例出现淋巴结转移的OSJ标本，BMP-2mRNA表达均为阳性，而无BMP-2mRNA表达的OSJ标本中，无1例出现淋巴结转移。淋巴结阳性组，BMP-2mRNA的阳性表达率为100％；淋巴结阴性组，BMP-2mRNA的阳性表达率为55．56％．两者差异有统计学意义(P=0．021)。结论：BMP-2mRNA主要在成骨细胞型及部分成软骨细胞型OSJ中表达，其表达可能与OSJ的淋巴结转移存在一定关系。     

煅石膏、骨形成蛋白及羟基磷灰石三元复合人工骨修复骨缺损的实验研究

以煅石膏(PLP）作为颗粒型羟基磷灰石(HA)人工骨粘接成形剂和骨形成蛋白(BMP)的载体，制成三元复合人工骨．分别用HA—bBMP、HA—PLP和单纯HA植入狗下颌骨实验性骨缺损中，采用组织学、定量组织学、免疫组织化学、X线摄片和扫描电镜观察的方法评价该复合人工骨的生物学性能。术后1，2，4，8和16周观察发现，HA—bBMP—PLP复合人工骨具有明显的骨诱导活性．PLP可充当BMP缓慢释放系统载体．增强BMP骨诱导活性，和作为颗粒型HA的粘接成形剂．使复合人工骨具有一定的可塑性和成形性，可达到准确的植入，植入后早期可有效防止HA颗粒移动。本研究证实．HA—bBMP—PLP三元复合人工骨不但可限制植入后HA颗粒的早期移动，更重要的是可以迅速增加新骨形成量．从形态和功能上大大提高了复合人工骨修复骨缺损的质量。     

细菌素免疫蛋白调控变形链球菌抗菌敏感性及生物膜形成的实验研究

目的 观察细菌素免疫蛋白相关基因对变形链球菌抗菌敏感性及生物膜形成的影响,探讨细菌素免疫蛋白与细菌抗菌剂耐受性的关系,为生物膜抗菌敏感性的研究提供基础数据.方法筛选培养细菌素免疫蛋白基因突变株,绘制生长曲线.酶标仪检测不同质量浓度氨苄青霉素(0.04、0.05、0.06、0.07及0.08 mg/L)、氟化钠(50、100、150、200及250 mg/L)及不同质量分数的次氯酸钠(0.078%、0.156%、0.313%、0.625%及1.250%)作用下变形链球菌标准株、△immA-和△immB-突变株菌液的吸光度值.应用最小生物膜清除浓度(minimal biofilm eradicatin concentration,MBEC)桩钉96孔板以连续稀释法检测醋酸氯己定对3种菌株生物膜的MBEC.应用激光共聚焦扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)定量分析标准株和突变株生物膜结构.结果 △immA-和△immB-突变株的迟缓期和稳定生长期均比标准株延时1 h.氨苄青霉素为0.06 mg/L时,标准株、△immA-突变株和△immB-突变株菌液吸光度值分别为0.334±0.016、0.027±0.016及0.047±0.018;氟化钠质量浓度为150 mg/L时,3种菌株菌液吸光度值分别为0.254±0.018、0.129±0.011及0.167±0.01;当次氯酸钠质量分数为0.313%时,3种菌株菌液吸光度值分别为0.467±0.008、0.017±0.006及0.050±0.006,以上各组抗菌剂中,标准株与突变株吸光度值差异均有统计学意义(P<0.01).醋酸氯己定对3种菌株的MBEC分别为6.25、1.57及3.13 mg/L.标准株生物膜厚度显著高于△immA-和△immB-突变株(P<0.01);标准株各层活菌比例均高于△immA-突变株(P<0.05);标准株中、外层活菌比例高于△immB-突变株(P<0.01),但内层活菌比例差异无统计学意义(P=0.191).结论细菌素免疫蛋白参与调控浮游细菌生长,尤其在生长初期;细菌素免疫蛋白相关基因缺陷使浮游态变形链球菌抗菌敏感性提高、抗菌剂MBEC降低及生物膜结构不成熟.     

淋巴管生成与肿瘤转移

恶性肿瘤细胞的转移是癌症致死的主要原因。长期的临床研究表明与肿瘤相关的淋巴管因其可以为肿瘤细胞提供扩散的途径而成为癌症转移的关键要素，然而目前仍不清楚的是：在肿瘤发生前已经存在淋巴管是否足以行使上述功能？是否还需要新生的淋巴管或是淋巴管径的扩大？在许多种人类癌症中，原发灶内血管内皮生长因子C的表达增高与肿瘤细胞局部淋巴结扩散增加相关，本文将对淋巴管生成机理，特别是肿瘤细胞的转移以及血管内皮生长因子C在此过程中所起的作用作一综述。     

蛋白多糖与种植材料的关系

种植材料植入体内后在其表面会吸附一层次分子物质，这些物质会影响种植材料的生物相容性，其中蛋白多糖（PG）起着重要的作用。超微结构显示在不同的种植材料与骨界面均发现有PG样物质存在，体外细胞培养也观察到种植材料表面有PG，PG通过其核心结构氨基多糖（GAG）与钛和羟基磷灰石发生吸附，其吸附机理可能是静电作用，龈沟液中GAC的变化反映了牙周组织特别是牙槽骨的反应状况，因而PC可作为种植体周围炎的检测指标，将PG与种植材料复合植入体内可以加快种植材料与骨创的愈合，并能促进上皮细胞在种植材料表面形成半桥粒结构。