微波消解-原子荧光光谱法测定宫瘤消片中的砷、镉

目的:测定宫瘤消片中的砷、镉。方法:采用微波消解的制样方法,利用原子荧光光谱法测定了宫瘤消片中镉、砷微量元素的含量。结果:测得2种元素,标准曲线的r>0.9992,回收率为91.5%～97.8%,RSD<5%。结论:本法快速、准确且灵敏度高,为宫瘤消片中重金属含量测定提供了较好的方法,结果满意。     

原子荧光光谱法测定隔山消中砷、汞、镉、铅的含量

目的 建立中药隔山消中砷、汞、镉、铅的原子荧光光谱检测方法.方法 采用原子荧光分光光度法测定隔山消中砷、汞、镉、铅4种元素的含量,并对测定方法进行方法学考察.结果 对于所测元素,标准曲线的相关系数r＞0.999 3,回收率为99.4%～102.3%,RSD＜5%,隔山消中的砷、汞、镉、铅4种重金属含量符合2005年版<中华人民共和国药典>中重金属的限量标准.结论 该方法快速、简便、准确且灵敏度高、效果满意,为隔山消中重金属含量测定提供了较好的方法.     

Taurine and vitamin C influence 8-nitroguanine brain expression following sub-chronic arsenic exposure in the mouse

BACKGROUND： Arsenic-induced overproduction of reactive nitrogen species results in damage to biomacromolecules in tissues. This is one of major mechanisms of toxic effects due to arsenic. It is assumed that taurine and vitamin C prevent overproduction of peroxynitrite （ONOO） and resist arseniasis by decreasing oxygen-free radical production. OBJECTIVE： To investigate the intervention effects of taurine and vitamin C on 8-nitroguanine （8-NO2-G） expression in the brain of mice exposed to arsenic. DESIGN, TIME AND SETTING： A randomized, controlled, animal experiment was performed at the Department of Occupational and Environmental Health, Dalian Medical University, China between March 2007 and July 2008. MATERIALS： As203, taurine, and vitamin C （Sigma, USA）, rabbit polyclonal anti-8-NO2-G antibody and goat anti-rabbit IgG （Dojindo, Japan） were used in this study. METHODS： A total of 40 healthy, Kunming mice were equally and randomly assigned to four groups Mice in the As203 group received drinking water containing 4 mg/L As2O3. Mice in the taurine and vitamin C groups received 150 mg/kg taurine and 45 mg/kg vitamin C, respectively, by gavage, twice per week, and simultaneously received As2O3. Mice in the control group were administered normal drinking water. MAIN OUTCOME MEASURES： Histopathological changes in brain tissues of mice were observed by hematoxylin-eosin staining. 8-NO2-G expression in brain tissues was determined by immunohistochemistry. RESULTS： Abnormal, histopathological changes were observed in brain tissue of mice from the As2O3 group, which included axonal loss, cell shrinkage, and karyolysis. The above-described changes were minimal in the taurine and vitamin C groups. 8-NO2-G expression was significantly greater in brain tissue from the As2O3 group compared with the control group （P 〈 0.05）, however, weak 8-NO2-G expression was observed in the taurine and vitamin C groups. CONCLUSION： Taurine or vitamin C protected against pathological changes and nucleic acid damage due to reactive nitrogen species in brain tissue of mice exposed to arsenic.     

三氧化二砷对人肝癌多药耐药细胞Bel-7402作用相关机制的研究

目的研究As2O3诱导多药耐药人肝癌细胞Bel-7402/VCR凋亡及相关基因表达的情况。方法MTT法观察细胞生长和对VCR敏感性,应用形态学手段和流式细胞术检测细胞凋亡,应用免疫组织化学研究多药耐药相关基因表达的影响。结果As2O3对Bel-7402/VCR及Bel-7402细胞的生长抑制均呈明显的量效关系;Bel-7402/VCR及Bel-7402凋亡细胞百分比随着As2O3作用时间延长和作用浓度的增加明显增加;As2O3对Bel-7402/VCR及Bel-7402MDR1阳性表达率为81.6%和80.2%。结论As2O3在体外表现出较强的逆转肝癌多药耐药性作用。     

微波消解-原子荧光光谱法测定骨折挫伤胶囊中砷的含量

目的建立聚四氟乙烯消化罐程序升温消解样品的体系,研究并确定原子荧光光谱法测定骨折挫伤胶囊中砷的含量的方法。方法采用聚四氟乙烯消化罐程序升温消解样品,氢化物发生-原子荧光光谱法测定骨折挫伤胶囊中砷的限量。结果线性范围为0～16μg·L^-1;相关系数r为0．9994;方法的检出限为0．2879μg·L^-1;平均回收率为95．32％,RSD为3．61％。结论采用本法检测骨折挫伤胶囊中砷的含量,方法灵敏、准确、可靠。     

抗氧化剂和Ca2+清除剂调控As2O3诱导白血病细胞凋亡中Bcl-2和p53的表达

目的: 研究抗氧化剂NAC, NDMS, CAT和Ca2+清除剂Quin 2调控As2O3诱导白血病细胞株NB4, K562, HL-60凋亡时Bcl-2和p53表达的作用. 方法: 不同浓度As2O3处理细胞内Bcl-2和p53用相应抗体标记, 并用流式细胞仪检测. 结果: 0.6,2.7和8.1 μmol*L-1 As2O3作用72 h能诱导NB4, K562和HL-60发生0.45±0.04, 0.58±0.06和0.62±0.08凋亡, 上述浓度药物能使NB4, K562, HL-60 3种细胞中Bcl-2蛋白的平均荧光强度分别由109±31, 101±32, 87±23下降到68±22, 54±33, 66±18.相反, 可使3种细胞中p53蛋白的平均荧光强度分别由18±5, 2±1, 3±1上升到30±9, 15±6, 28±8. 而抗氧化剂NAC, NDMS, CAT和Ca2+清除剂Quin 2对3种细胞内Bcl-2和p53表达没有显著影响, 但能抑制As2O3引起的p53表达上调. 对As2O3引起的Bcl-2下降则显示了不同的调控作用. 结论: As2O3诱导的Bcl-2下降、p53上升和细胞凋亡可被抗氧化剂和Ca2+清除剂抑制.     

三氧化二砷诱导血管内皮细胞凋亡和抑制血管生成的研究

目的：研究三氧化二砷(As2O3)抑制血管内皮细胞(HUVECs)生长、诱导凋亡和抑制血管生成的作用。方法：As2O3与HUVECs共同孵育一定时间后，观察细胞形态学变化，并用MTT方法测定细胞生长曲线图、TUNEL方法检测细胞凋亡；观测As2O3对鸡胚血管生成的影响。结果：在0．75μmol／L～6μmol／L浓度范围内随药物浓度增加或作用时间延长，细胞生长抑制和细胞凋亡效果越显著；As2O3作用鸡胚绒毛尿囊膜后血管生成减少。结论：As2O3抑制HUVECs生长、诱导细胞凋亡，对血管生成有抑制作用。     

三氧化二砷对不同p53表型胶质瘤细胞程序性死亡相关基因表达的影响

目的 探讨三氧化二砷（As2O3）对两种不同p53表型胶质瘤细胞U87MG、T98G作用后细胞程序性死亡相关基因表达的影响。方法应用基因芯片技术筛选出As2O3作用于两种胶质瘤细胞U87MG、T98G前、后与细胞程序性死亡有关的表达差异有统计学意义的基因；用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞生长抑制率；用电镜和原位凋亡检测（TUNEL）法及及吖啶噔／溴乙啶双荧光染色进行细胞形态观察、流式细胞仪等方法检测细胞程序性死亡改变。结果两种胶质瘤细胞应用As2O3后，透射电镜下T98G中频繁地观察到细胞自噬现象；筛选出U87MG细胞在As2O3作用前后差异表达且与程序性死亡相关基因共4J6条（上调33条，下调13条）。T98G细胞在As2O3作用前后差异表达且与程序性死亡相关基因共54条（上调34条，下调20条）。结论 As2O3以剂量依赖的方式通过细胞程序性死亡来抑制U87MG和198G细胞的增殖；As2O3诱导下的两种不同P53表型的细胞系中还存在非凋亡调控的细胞程序性死亡（自噬）；P53／ATM通路的基因、Bcl-2家族、TNF配体家族、TNF受体家族基因参与As2O3诱导胶质瘤细胞程序性死亡的发生机制。