葛根提取物对肝癌细胞增殖及细胞周期的作用

目的 :探讨中药葛根提取物的抗癌活性并试图建立一种筛选药物的方法。方法 :用MTT快速测定法及流式细胞仪分析法分析葛根提取物 (PR)对靶细胞人肝癌SMMC 772 1细胞的抗癌药效及细胞分裂周期各时象DNA变化。结果 :葛根提取物有比较强的抗癌活性 ,与阴性对照组相比差异非常显著 (P <0 .0 1) ,与丝裂霉素MMC联合用药抗癌活性显著增强 ,与单独用药组比差异非常显著 (P <0 .0 1)。流式细胞仪分析细胞分裂周期各时象DNA变化显示药物作用后S期细胞明显减少 ,增殖指数 (PI)降低 ,并可诱导凋亡峰 (AP峰 )。结论 :提示葛根提取物具有一定抗癌活性 ,并为建立筛选抗癌中药的方法提供一条新途径。     

氟化物转化细胞的超微结构观察

研究氟化物的致突变性和潜在致癌性,探讨其诱变机理。方法应用NaF诱导转化金黄地鼠胚胎细胞(SHE),以扫描和透射电镜观察其超微结构。结果该细胞群中少数细胞凋亡,大部分细胞则已逃脱凋亡转化成恶性细胞。结论氟化物对哺乳动物细胞可能具有诱变致癌性。     

视黄酸对培养的HepG2细胞分泌载脂蛋白AⅠ、AⅡ、B100、CⅢ及E的影响

目的　探讨视黄酸在脂蛋白代谢中的作用。方法　采用冻干浓缩培养液载脂蛋白 RID测定法 ,分别观察 4种不同浓度的视黄酸对培养的人肝癌细胞系 Hep G2细胞载脂蛋白 ( apo) A 、A 、C 、B10 0及 E分泌的影响。结果　视黄酸对 Hep G2细胞 apo A 、A 、B10 0及 C 的分泌均有促进作用 ,对 apo E的分泌则有抑制作用。在本研究条件下 ,当视黄酸的浓度为 2× 10 - 4 m ol/ L时 ,其对 Hep G2细胞 apo分泌的影响作用最大 ,此时apo A 、A 、B10 0和 C 的分泌分别增加 14.3% ( P<0 .0 1)、2 3.8% ( P<0 .0 5 )、16 .1% ( P<0 .0 1)、47.6 % ( P<0 .0 1) ,而 apo E的分泌减少 37.2 % ( P<0 .0 1)。结论　视黄酸对 Hep G2细胞 apo A 、A 、C 、B10 0及 E的分泌有不同的影响     

小鼠树突状细胞肉瘤细胞系的建立及形态学鉴定

本研究目的是建立鉴定树突状细胞肉传代细胞系，即荷ＬＩＩ瘤６１５鼠脾脏进行原代细胞培养，经传统代培养后新建立一株体外传代细胞系，经鉴定为树突状细胞肉瘤细胞系，命名为ＤＣＳ。该细胞体外呈分支状。酶组织化学检查发现碱性磷酶酶、酸性磷酶酶、１非特异性脂酶、过氧化酶及胞膜ＡＴＰａｓｅ均阴性。     

昆明种系小鼠胚胎干细胞的分离培养及特性鉴定

目的 提高昆明小鼠胚胎干细胞（ES细胞）建株的成功率。方法 收集小鼠3．5d的囊胚培养,用小鼠胚胎成纤维细胞作为饲养层,形成的ES细胞样集落,经两次亚克隆分离培养ES细胞;进行相差显微镜观察、碱性磷酸酶染色和体内外分化能力鉴定。结果 获得两个稳定ES细胞集落,传至第11代。ES细胞呈集落样生长,碱性磷酸酶染色强阳性,体外分化的细胞沿拟胚体外向性生长,形态多样,在体分化可形成来源于3个胚层的组织。结论 两次亚克地获得的细胞具有ES细胞主要的生物学性状,有助于提高昆明小鼠ES细胞建株的能力。     

人肝癌细胞系7721与原代人胎肝细胞用于体外培养HCV的对比研究

目的 研究丙型肝炎病毒（HCV）在体外培养原代人胎肝细胞和人肝癌细胞系7721中复制和表达的异同,探讨HCV体外培养条件。方法 原代人胎肝细胞系7721分别与HCV感染血清共孵育后,用逆转录-聚合酶链反应、原位杂交、免疫组化检测细胞和培养上清中的HCV RNA和抗原表达。结果 从孵育的2～3天,即可在细胞内和/或培养上清中间断地检出HCV RNA（其中HCV在7721细胞株中的复制至少可达66d,HCV在 人胎肝细胞中的复制持续25d）;HCV抗原可在感染细胞内得到稳定表达,感染细胞内存在HCV负链RNA杂交信号,且多位于细胞浆。结论 两种肝细胞对HCV易感,尤其是7721细胞可以稳定地支持HCV体外复制,可用于HCV体外长期培养的靶细胞。     

Bufalin对GMC—803细胞生长,分化的影响

目的：以低分化胃腺癌细胞系ＭＧＣ－８０３为实验对象,观察了蟾酥提取物ｂｕｆａｌｉｎ对其生长、分化的影响。方法：应用台盼蓝染色法、７６９０－ＸＵ荧光染色法和电子显微镜等观察细胞生长、分化。结果：０．０１μｍｏｌ／Ｌ ｂｕｆａｌｉｎ可显著抑制细胞生长,细胞粘附力下降,由梭形趋于圆形,核质比下降,细胞内核糖体和线粒体数目减少,内质网不如对照组细胞发达;７６９０－ＸＵ荧光染色显示,用药７２ｈ,药７１％的细     

鲨鱼软骨制剂对三种细胞系的抑制效应

目的：研究鲨鱼软骨制剂（ＳＣＰ）对人胃癌细胞（ＭＧＣ８０－３）、红白血病细胞Ｋ５６２）、人脐静脉血管内皮细胞（ＶＥＣ３４０）的生长抑制作用,探讨其抗癌作用机制。方法：采用盐酸胍抽提、丙酮分级沉淀、烘干、微孔滤膜过滤等步骤从鲨鱼软骨粉中提取鲨鱼软骨制剂;采用ＭＴＴ法检测不同浓度ＳＣＰ对体外培养的ＭＧＣ８０－３细胞系、Ｋ５６２细胞系和ＶＥＣ３４０细胞系的生长抑制作用。结果：ＳＣＰ明显抑制ＭＧＣ８０－３     

HSP70高表达对K_(562)细胞热耐力的影响

用硫酸镉诱导细胞ＨＳＰ７０ 高表达,ＲＴ—ＰＣＲ 检测ＨＳＰ７０ｍ ＲＮＡ 水平并观察ＨＳＰ７０ 水平对细胞热耐力的影响。发现硫酸镉作用于细胞１ｈ 后,细胞的ＨＳＰ７０ 水平显著增高, ＨＳＰ７０ 水平高的细胞其热耐力明显强于ＨＳＰ７０ 水平低的细胞组;ＨＳＰ７０ 水平与细胞热耐力间正相关。提示化学因素诱导的ＨＳＰ７０ 表达增高可以保护热暴露细胞,提高细胞热耐力     

氟哌啶醇对人红白血病耐多柔比星细胞株多药耐药性的逆转及其机制

目的　从临床常用药物中探寻逆转肿瘤耐药性的活性物质。方法　应用MTT法测定不同浓度Hal处理的瘤细胞对 0～ 2 0 μmol·L- 1多柔比星 (Dox)的敏感性的影响。RT PCR法分析 12 .5 μmol·L- 1氟哌啶醇 (Hal)处理后多药耐药基因 (MDR1) ,多药耐药相关蛋白 (MRP)和谷胱甘肽S转移酶Pi(GSTπ)mRNA表达的变化。通过流式细胞术观察 0 ,6 .2 5 ,12 .5 ,2 5 μmol·L- 1Hal对细胞内药物蓄积和细胞周期进程的影响。结果　Hal对K5 6 2 /Dox的耐药性具有明显的逆转作用。在 12 .5 ,6 .2 5及 3.12 5 μmol·L- 1时的逆转倍数分别为 8.35 ,4 .2 1及 2 .16。用 12 .5μmol·L- 1Hal处理后 ,MDR1及MRP的mRNA表达水平均呈现时间依赖性明显降低 ,分别较原水平下降76 .3%及 6 4.6 %。药后d 2GSTπmRNA表达下降6 6 .1% ,于d 3回升。Hal处理细胞lh后 ,Dox在细胞内蓄积量明显增加 ,并呈浓度依赖性 ;此外 ,Hal可明显增强Dox对K5 6 2 /Dox细胞的G2 /M阻滞作用 ,12 .5 μmol·L- 1浓度可以使 5 μmol·L- 1Dox的G2 /M阻断由单独应用时的 9.9%± 4 .3%增加到2 3.4 %± 3.0 %。结论　Hal具有较强的逆转K5 6 2 /Dox细胞MDR的作用 ,其逆转机制为多种途径 ,包括相关基因mRNA的表达下调 ,增加细胞内药物蓄积 ,增强Dox对K5 6 2 /Dox在G2