祁门红茶抗氧化有效成分的研究

祁门红茶有较强的抗芥花子油氧化的活性.从祁门红茶乙酸乙酯部位,使用硅胶柱层析,结合Sephadex LH-20柱层析方法,分离得到了四个抗氧化有效成分,分别为茶黄素(Theaflavin,TF1)、茶黄素A(Theaflavin-3-galate,TF2A)、茶黄素B(Theaflavin-3'-gallate,TF2B)和茶黄素双没食子酸酯(Theaflavin digallate,TF3).     

人参皂甙Rg3对小鼠免疫功能的影响

目的:观察人参皂甙Rg3对正常小鼠免疫功能的影响.方法:体外实验测定小鼠脾淋巴细胞转化和NK细胞活性;整体实验给小鼠灌胃人参皂甙Rg3 7天后,测定小鼠炭粒廓清速率、免疫器官重量、血清溶血素含量和抗体生成细胞数.结果:人参皂甙Rg3体外对T淋巴细胞增殖无明显影响,但能增强NK细胞吞噬活性.人参皂甙Rg3能增加整体大鼠血清溶血素含量和抗体生成细胞数,但对小鼠免疫器官重量和炭粒廓清速率无明显影响.结论:人参皂甙Rg3能增强正常小鼠体液免疫功能,部分增强非特异性免疫功能,对细胞免疫无明显影响.     

川芎嗪注射液对血管内皮细胞DNA合成的影响

目的 :探讨川芎嗪注射液对血管内皮细胞DNA合成的影响。方法 :采用3H -TdR掺入法 ,测定经川芎嗪注射液作用后体外培养的人脐静脉血管内皮细胞的放射性强度 (CPM )值。结果 :川芎嗪注射液可显著降低血管内皮细胞的CPM值 ,且均呈剂量依赖性。结论 :川芎嗪注射液抑制肿瘤血管生成的作用可能与其抑制血管内皮细胞DNA合成有关。     

反义ClC-3寡核苷酸促进thapsigargin诱导的PC12细胞凋亡

目的　研究反义ClC 3寡核苷酸对thapsigargin诱导的细胞凋亡的影响。方法　蛋白免疫印迹法检测ClC 3蛋白的表达 ;MTT法检测反义ClC 3寡核苷酸对TG诱导的细胞生长的影响 ;形态学方法、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析PC12细胞在转染ClC 3反义寡核苷酸后 ,TG诱导的细胞形态、DNA含量的变化和DNA断裂的情况。结果　与对照组相比 ,反义ClC 3寡核苷酸呈浓度和时间依赖性地抑制ClC 3蛋白的表达 ;使TG诱导的PC12细胞存活率降低 ,凋亡程度加强 ,差异有显著性 ,而正义及随义ClC 3寡核苷酸对此没有影响。结论　反义ClC 3寡核苷酸对TG诱导的PC12细胞凋亡有促进作用。     

细胞色素P450 3A 选择性探针药物的评价

理想的细胞色素P4 5 0 3A(CYP3A)探针药物有助于检测CYP3A活性 ,辅助临床合理用药。本文对CYP3A选择性探针药物进行比较和综合分析 ,评价各种CYP3A选择性探针药物的特点 ,阐明对临床合理用药的指导意义。在已筛选的CYP3A选择性探针药物中 ,咪哒唑仑是一较理想的探药。     

Acute effect of milnacipran on the relationship between the locus coeruleus noradrenergic and dorsal raphe serotonergic neuronal transmitters

The present studies sought to investigate the effect of milnacipran called the serotonin (5-HT) and noradrenaline (NA) reuptake inhibitor (SNRI) on the interaction of central locus coeruleus noradrenergic and dorsal raphe nucleus serotonergic functional activity by utilizing in vivo microdialysis. A single administration of milnacipran (60 mg/kg, s.c.) markedly decreased the levels of NA and its metabolite, 4-hydroxy-3-methoxymandelic acid (HMMA), in the locus coeruleus and the levels of, a metabolite of 5-hydroxytryptamine (5-HT), 5-hydroxyindole-3-acetic acid (5-HIAA) in the dorsal raphe nucleus. Combined administration of yohimbine (2 mg/kg, s.c.),?alpha(2)-adrenoceptor?antagonist, at 2 h after milnacipran (60 mg/kg, s.c.) led to a significant increase in NA levels in the locus coeruleus, although yohimbine alone had no effect on these levels. Under similar experimental condition, 5-HIAA levels in the dorsal raphe nucleus remained unchanged. NAN-190 (1 mg/kg, s.c.), 5-HT(1A) receptor partial agonist, alone markedly decreased the levels of 5-HIAA in the dorsal raphe nucleus, although this level was not affected by WAY100635, the selective 5-HT(1A) receptor antagonist. WAY100635 recovered the milnacipran-induced decrease of 5-HIAA levels in the dorsal raphe nucleus to control levels. On the other hand, NAN-190 did not affect the milnacipran-induced decrease of 5-HIAA levels. Behavioral signs (locomotion and rearing) were markedly observed following milnacipran alone or combined administration of milnacipran and yohimbine. However, the behavioral signs after coadministration of milnacipran and WAY100635 or NAN-190 were relatively poor. These results may suggest that an increase of NA in the locus coeruleus with the treatment of yohimbine after milnacipran results from negative feedback following the blockade of alpha(2)-adrenoceptors achieved with yohimbine, and that WAY100635 but not NAN-190 recovered milnacipran-induced decrease of 5-HIAA in the dorsal raphe nucleus to control levels by preventing the activation for the presynaptic 5-HT(1A) autoreceptor.     

III期结直肠癌中NLRC3与预后和肿瘤免疫的关系

目的：探讨核苷酸寡聚化结构域样受体家族半胱天冬酶募集结构域蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain-like receptor family caspase recruitment domain containing 3,NLRC3)与III期结直肠癌的预后及肿瘤免疫相关指标 的关系。方法：回顾性收集中南大学湘雅医院2012年至2013年122例经手术根治切除的III期结直肠癌患者的相关资 料。利用免疫组织化学法分析NLRC3与CD8+ T细胞的表达情况,利用患者的术前临床资料计算中性粒细胞/淋巴细 胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR),并检测其微卫星稳定性。采用χ2检验分析NLRC3与临床病理因素之间的 关系,采用COX回归模型分析III期结直肠癌的独立预后因素。结果：在III期结直肠癌中,肿瘤组织CD8+ T细胞浸润 分期(χ2=27.79,P<0.01)、NLR值(χ2=6.35,P<0.05)、淋巴结转移分期(χ2=10.12,P<0.01)以及微卫星稳定性(χ2=6.05, P<0.05)与NLRC3的表达有关。NLRC3(OR=0.066,95% CI：0.020~0.218)、血管癌栓(OR=3.119,95% CI：1.547~6.286) 及NLR(OR=5.103,95% CI：2.465~10.563)对III期结直肠癌的5年总生存期(overall survival,OS)有影响(均P<0.05);另 外,NLRC3(OR=0.144,95% CI：0.055-0.377)、血管癌栓(OR=3.589,95% CI：1.859~6.932)及NLR(OR=2.939,95% CI： 1.509~5.723)对III期结直肠癌的无病生存期(disease free survival,DFS)同样有影响(均P<0.05)。结论：NLRC3,血管癌栓 和NLR是III期结直肠癌的独立预后因素。NLRC3通过抑制系统性炎症、促进局部抗肿瘤免疫而使III期结直肠癌患者 具有良好的预后。     

电针不同穴组对功能性便秘大鼠结肠黏膜超微结构及AQP3、AQP8表达的影响

目的 探讨电针不同穴组治疗功能性便秘（FC）大鼠的作用机理。方法 FC动物模型采用0 ℃ 0.9%氯化钠溶液对SD大鼠灌胃复制,随机分为模型组、电针1组（EAⅠ组）、电针2组（EAⅡ组）和电针3组（EAⅢ组）,正常组采用SD大鼠。EAⅠ组取天枢、大肠俞（双侧）、EAⅡ组取曲池、上巨虚（双侧）、EAⅢ组取天枢、大肠俞、曲池、上巨虚（单侧）进行电针治疗。观测粪便性状和肠道炭末推进率评定大鼠肠动力,透射电镜检测大鼠结肠黏膜超微结构,Western blot检测大鼠结肠AQP3、AQP8蛋白表达,qPCR检测大鼠结肠AQP3、AQP8 mRNA表达。结果 EAⅡ组大鼠24 h粪便粒数、24 h粪便含水量和肠道炭末推进率均显著增加,首次黑便时间显著减少（P<0.05）,结肠黏膜超微结构经EAⅡ干预后显著改善,模型组大鼠结肠黏膜AQP3、AQP8蛋白和AQP3、AQP8 mRNA表达显著高于正常组（P<0.05）,经EAⅡ干预后表达显著降低,具有统计学意义（P<0.05）。结论 电针刺激曲池、上巨虚可能通过降低FC大鼠结肠黏膜AQP3、AQP8蛋白和AQP3、AQP8 mRNA表达,减少结肠水分重吸收,增加结肠粪便含水量,调节水分转运,改善结肠黏膜超微结构,增强肠动力,起到改善便秘症状的作用。      

AML1/ETO阳性急性髓系白血病患者galectin-3的表达及临床意义

目的 探讨AML1/ETO阳性急性髓系白血病（AML1/ETO+ AML）患者半乳凝集素3（galectin-3,gal-3）表达及其临床意义。方法 采用实时定量RT-PCR（RQ-PCR）法检测53例AML1/ETO+ AML患者骨髓单个核细胞中gal-3 mRNA表达水平,ELISA法检测患者外周血gal-3蛋白水平,分析gal-3 mRNA表达与疾病预后的相关性。结果 ①gal-3 mRNA及蛋白在初诊AML1/ETO+ AML患者中呈高表达（ P<0.001）,初诊患者gal-3 mRNA与蛋白表达呈正相关（r=0.732, P<0.001）,疾病完全缓解期外周血gal-3蛋白表达量下降（ P<0.001）;②初诊时gal-3 mRNA表达水平越高,患者白细胞数量越低（ P=0.014）,CD34表达和附加染色体异常的比例越高（ P=0.001, P=0.026）;③gal-3 mRNA高表达组与低表达组在完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、诱导期死亡（即早期死亡）率上无明显差异（ P＞0.05）,但两组患者在复发率上差异有统计学意义（ P=0.029）;④gal-3 mRNA高表达组患者中位总生存率（OS）及无病生存率（DFS）均较低表达组缩短（ P=0.007, P=0.015）,累积复发率增高（ P=0.045）,但累积死亡率无明显差异（ P＞0.05）。Cox风险比例模型提示gal-3 mRNA是影响AML1/ETO+ AML患者OS及DFS的独立指标。结论 骨髓gal-3 mRNA有可能成为AML1/ETO+ AML患者评估预后及指导治疗的重要参考指标。     

成纤维细胞生长因子21对缺氧复氧心肌细胞的保护作用及机制研究

【摘要】 目的 探讨成纤维细胞生长因子21（FGF21）对缺氧复氧（H/R）心肌细胞的保护作用及对PI3K/AKT通路的影响。方法 重组腺病毒载体Ad FGF21诱导原代心肌细胞过表达FGF21。腺病毒转染心肌细胞后构建H/R损伤模型（3h缺氧联合3h复氧）。实验分为对照组（Con组）、H/R组、H/R+Ad GFP组、H/R+Ad FGF21组4组。心肌细胞存活率评估细胞损伤程度;SOD/MDA检测联合DHE荧光染色评估氧化应激反应（ROS）;流式细胞术评估细胞凋亡;Western blot检测相关蛋白水平。在机制探讨实验中给予PI3K/AKT抑制剂（LY294002）进行干预。结果 与Con组相比,H/R损伤后FGF21蛋白表达显著下调,并伴随心肌细胞活性降低、ROS与凋亡反应激活。腺病毒介导的心肌细胞过表达FGF21能够明显抑制H/R损伤,表现为细胞活力、ROS与凋亡反应均有不同程度改善。FGF21心肌细胞过表达能够增加PI3K/AKT磷酸化水平,而抑制PI3K/AKT通路后FGF21过表达介导的细胞保护功能被逆转。结论 FGF21主要通过PI3K/AKT依赖性途径改善心肌细胞H/R损伤。