脉络膜黑色素瘤脱色素处理后Caspase-3的免疫组化研究

目的 观察凋亡基因Caspase-3在脉络膜黑色素瘤(choroidal melanoma)中的表达及分型与细胞凋亡的关系。方法 收集20例脉络膜黑色素瘤标本，对其进行Caspase-3免疫组织化学染色，观察表达情况及染色强度。结果 Caspase-3在脉络膜黑色素瘤有较好的表达，在梭形细胞型中5例／6例呈阳性表达，在混合型中6例／8例呈阳性表达，在上皮样瘤细胞型中3例／4例呈阳性表达，在坏死型中1例／2例呈阳性表达，且在各型之间没有显著性差异(P＞0．05)。结论 凋亡在脉络膜黑色素瘤中存在；Caspase-3在脉络膜黑色素瘤的发生发展中起重要作用。     

缺氧诱导因子-1α与肿瘤凋亡和增殖关系

肿瘤的发生与发展不仅是由于细胞的过度增殖，也与凋亡的干扰有关。肿瘤无法调控的增殖是其最主要的特征，增殖需要大量耗氧，缺氧是实质性肿瘤微环境的基本特征之一，近年来越来越多的资料显示，肿瘤的缺氧是肿瘤发生恶性转化甚至转移的始动因素。最近的研究已表明，许多人类肿瘤内部都有显著的缺氧区域，而缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)受缺氧或低糖的调节。     

EphB4反义寡核苷酸对人脑胶质瘤细胞增殖、凋亡及迁移的作用

目的观察EphB4反义寡核苷酸(ASODN)对人脑胶质瘤细胞增殖、凋亡及迁移的影响,探讨EphB4的生物学功能。方法人工合成EphB4 ASODN,脂质体转染U87细胞。分别应用RT-PCR以及免疫组织化学染色方法检测EphB4 mRNA和蛋白质,评估阻抑效应;并应用MTT法和流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡;采用Boyden侵袭小室法检测细胞迁移和侵袭力。结果(1)由脂质体转染的EphB4 ASODN对U87细胞EphB4 mRNA和蛋白质表达具有不同程度的抑制作用,且呈现一定的时间-剂量依赖性,600nmol/LASODN作用于U87细胞72h,EphB4 mRNA相对表达量为0.30±0.05,EphB4蛋白表达水平亦明显减弱。(2)各实验组EphB4 ASODN对U87细胞增殖均具有抑制作用,呈明显时间-剂量依赖性;以600nmol/LASODN作用72h,U87细胞生长抑制率达到68.70%,而对照组则无明显抑制作用。(3)EphB4 ASODN诱导U87细胞凋亡呈剂量依赖性。(4)EphB4 ASODN组U87细胞的跨膜数为17.82±2.35,与空白对照组及NSODN组比较差异具有统计学意义(P<0.01)。结论EphB4在人脑胶质瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭过程中发挥重要作用,可能成为脑胶质瘤基因治疗的一个新靶点。     

异丙酚对MPTP损伤的小鼠黑质多巴胺神经元的保护作用

目的　观察异丙酚对 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3 ,6 四氢吡啶 (1 methyl 4 phenyl 1,2 ,3 ,6 tetrahydropyridineMPTP)损伤的小鼠纹状体多巴胺神经元的影响以及可能的作用机制。方法　给予Propofol 10 0mg/ (kg·d)后注射MPTP 2 0mg/ (kg·d) ,用药 6d。 12d后分离纹状体应用高效液相 -电化学方法检测纹状体多巴胺、二羟基苯乙酸及高香草酸的含量水平 ,应用12 5I- β-CIT放射性配基和免疫组化的方法检测多巴胺转运蛋白的活性和黑质神经元的损伤情况。结果　异丙酚可增加MPTP模型鼠多巴胺及其代谢产物的含量 ,异丙酚处理组DA ,DOPAC ,HVA的含量分别为 (8.2 417± 1.692 ) μg/ g、(1.3 81± 0 .486) μg/g和 (1.63 3 9± 0 .5 73 ) μg/ g ,与MPTP损伤组比较 ,明显增加。异丙酚亦可抑制黑质酪氨酸羟化酶 (TH)阳性神经元的减少。MPTP组注射MPTP 6d后 ,纹状体DAT为 (5 .3 13± 0 .64 2 )与正常组 (6.992± 0 .5 48) μg/ g比较显著下降 (P <0 .0 1) ,P +M组纹状体DAT为 (6.5 65± 0 .40 5 ) ,明显高于MPTP组 (P <0 .0 1) ,即减轻纹状体内多巴胺转运蛋白密度下降。结论　异丙酚对MPTP损伤的DA神经元具有一定的保护作用 ,其保护作用可能与抑制多巴胺转运蛋白活性有关     

多孔β-TCP/rhBMP-2人工骨在小鼠体内的诱导成骨和早期降解行为的研究

目的 将多孔β—磷酸三钙和重组人的骨形成蛋白—2复合物，植入小鼠肌肉内，观察复合物的骨诱导能力和早期降解行为。方法 将多孔β—磷酸三钙／人骨形成蛋白—2复合物植入25只小鼠右侧大腿后侧肌肉内，单纯多孔β—磷酸三钙植入左侧为对照，分别于72h、1、2、3、4周取材，进行组织学和扫描电镜观察。结果 72h可见幼稚软骨，1周见成熟软骨，2周见编织骨和少量板层骨，3周和4周成熟的板层骨生成，对照组则无骨或软骨生成。2周开始间充质细胞和纤维组织长入材料，3～4周将材料包裹分割，同时可见多核巨细胞反应及吞噬现象，这些是降解早期组织学改变。结论 多孔β—TCP／rhBMP—2复合人工骨显示了良好的生物相容性，有强大的骨诱导能力，有希望作为新型骨移植替代材料用于临床。     

转录信号传导子和激活子3信号传导通路调控选择性环氧化酶2抑制剂抗结肠癌的机制

目的探究转录信号传导子和激活子3(Stat3)信号传导通路与选择性环氧化酶2(COX-2)抑制剂抗结肠癌细胞株HT-29机制的关系,明确COX-2抑制剂抗结肠癌细胞内信号传导机制。方法将选择性COX-2抑制剂NS-398,作用于结肠癌细胞系HT-29,运用MTT法检测细胞增殖状态;流式细胞仪观察NS-398对细胞凋亡的影响,进一步用RT-PCR检测药物作用前后HT-29中COX-2mRNA的表达;ELISA法测定体系前列腺素E2(PGE2)水平;Westernblot检测药物作用前后Stat3通路相关蛋白JAK2、Stat3的磷酸化活性和cyclinD1、Bcl-2的表达。结果结肠癌细胞系HT-29中COX-2mRNA呈高表达,NS-398呈时间、剂量依赖性方式抑制HT-29细胞增殖,促进其凋亡。NS-398使HT-29细胞COX-2mRNA和PGE2表达水平显著下降。同时p-JAK2、p-Stat3、cyclinD1、Bcl-2表达水平随作用时间延长而下降。结论癌基因Stat3信号传导通路调控了NS-398抗结肠癌的细胞内信号传导机制,最终通过其下游靶基因cyclinD1、Bcl-2影响结肠癌细胞系HT-29的增殖与凋亡。     

慢性脑灌注不足对tau蛋白磷酸化及其相关酶表达的影响

神经原纤维缠结(neurofibrillartangles,NFTs)是阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease ,AD)的标志性病理特征之一,tau蛋白的过度磷酸化被认为是NFTs形成的关键[1] 。近年来,脑血管因素在AD中的作用备受关注,但是,它们与AD神经病理之间的关系还不清楚[2 ,3 ] 。我们通过永久性双侧颈总动脉结扎(2VO)制作慢性脑灌注不足(chroniccerebrovascularinsufficiency ,CVI)大鼠模型,观察海马神经元中Ser2 0 2位点磷酸化的tau蛋白(PS2 0 2 tau)、糖原合成酶激酶3β(glycogensynthasekinase 3β,GSK 3β)和蛋白磷酸酯酶2A (proteinphosphatase 2…     

淋巴管内皮特异性标记物的研究进展

肿瘤的侵袭和转移是癌症患者死亡的重要原因之一，血道和淋巴道转移是癌细胞形成远处转移的主要途径。淋巴道转移是恶性肿瘤难以根治和高死亡率的重要原因。肿瘤细胞转移至局部淋巴结可被视为肿瘤转移的早期信号，常用来预测肿瘤患者的预后或作为确定治疗方案的依据。自从Folkman最早提出肿瘤新生血管的观点以来，肿瘤相关血管生成一直是研究的热点，而转移的另一通道一淋巴系统的研究却相对较少。缺乏特异的淋巴管内皮标记物，已经成为研究肿瘤淋巴管的主要障碍。近年来，国内外学者通过逐步摸索，已经发现了几种较为理想的淋巴管内皮特异性标记物，硼公绍加下．     

视前区注入6-羟基多巴胺对针刺镇痛和荧光组织化学的影响

视前区是脑内与针刺镇痛有关的结构之一。视前区含有丰富的儿茶酚胺(CA)神经末梢。本实验用6-羟基多巴胺(6-OH-DA)的化学性损毁术和甲醛诱发荧光组化法观察家兔视前区注入6-OH-DA(8μg／双侧)选择性损毁该区CA神经末梢后，对针剌镇痛的影响。