丹参提取物对糖基化终末产物/缺氧条件下视网膜Müller细胞低氧诱导因子-1α作用的谱效关系研究

目的探讨丹参提取物对糖基化终末产物(AGEs)/缺氧条件下视网膜Müller细胞低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的药理作用与化学成分之间的关系,并以丹参酮IIA为对照,初步探索丹参治疗糖尿病性视网膜病变(DR)的药效物质基础。方法采用HPLC法建立10批丹参提取物的指纹图谱,获得各特征峰的峰面积。在AGEs/缺氧条件下培养视网膜Müller细胞,并测定丹参提取物给药组及丹参酮IIA对照组HIF-1α的表达量。结合灰色关联分析法与偏最小二乘法回归分析成分与药效之间的谱效相关性。结果根据10批样品指纹图谱共标示出17个特征峰。与模型组相比,10批样品及丹参酮IIA对照组均能降低视网膜Müller细胞HIF-1α的表达量。谱效相关性研究显示峰1、5、6、9、10、11、12、14、15、16代表的化学成分对抑制HIF-1α表达具有较大的贡献。结论初步确定15,16-二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮IIA及6个尚未确定结构的成分(峰1、5、6、9、14、15)为丹参治疗DR的可能药效物质。     

KLF5 在脱氧胆酸诱导胃黏膜 肠上皮化生中的作用

目的 探究Krüppel 样因子5（KLF5）是否参与脱氧胆酸（DCA）诱导的胃黏膜肠上皮化生及 其可能的作用机制。方法 收集正常胃黏膜和肠上皮化生组织,用不同浓度DCA（100、200 和500μmol/L） 处理胃黏膜上皮GES-1 细胞,Western blot 和实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测KLF5 和Wnt3a 的表达。将GES-1 细胞分为空白对照组、DCA 组、阴性对照组及KLF5 沉默组,分别用MTT 法检测细胞增 殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot 和qRT-PCR 检测TFF2、VIL1 和CDX2 的表达。用氯 化锂LiCl（Wnt 通路激活剂）处理si-KLF5 转染的细胞,检测各组细胞中Wnt3a、β-catenin 和CDX2 的表达。 结果 与正常胃黏膜相比,肠上皮化生组织中KLF5 和Wnt3a 的表达上升。随着DCA 浓度增加,GES-1 细 胞中KLF5 和Wnt3a 的表达逐渐升高。500μmol/L DCA 处理GES-1 细胞后,细胞的增殖能力提高,凋亡率 降低,TFF2、VIL1 和CDX2 的表达升高,而si-KLF5 转染使细胞增殖能力降低,凋亡率升高,TFF2、VIL1 和 CDX2 的表达降低,抑制DCA 对GES-1 细胞的作用。另外,LiCl 能减弱DCA 处理后si-KLF5 转染对细胞中 Wnt3a、β-catenin 和CDX2 表达的影响。结论 KLF5 可能通过激活Wnt 通路,促进DCA 诱导的胃黏膜肠 上皮化生。     

锎-252中子腔内后装治疗新疆地区巨块型宫颈癌临床观察

目的 观察锎-252(252 Cf)中子腔内后装治疗巨块型宫颈癌的近期疗效评价及并发症发生.方法 体外照射选用6-MV X线加速器机,先给予全盆前后对穿照射,照射野面积为16 cm-17 cm×14 cm-15 cm,每周5次,1野/次,每次每照射野用1.8 Gy-2.0 Gy,盆腔中心的总剂量为25 Gy-30 Gy.然后于全盆大野中央档铅,4野对穿照射,面积3cm-4cm×14cm-15cm,每次每照射野1.8 Gy-2.0 Gy,每周4次同时给予腔内后装治疗,宫旁总剂量为25 Gy-30Gy.腔内治疗选用灵顿ZH-1000型252 Cf中子后装机,放射源为252Cf,每周一次,每次A点剂量7Gy-10 Gy,总剂量30 Gy-40 Gy.阴道消瘤1-2次,每次7 Gy,阴道消瘤量不包括在A点之内.结果 宫颈肿瘤CR占90.9%,PR占9.1%,NC占0.0%.放射性膀胱炎占18.2%,放射性直肠炎占27.3%.结论 252Cf中子射线是一种高LET射线,252Cf中子腔内治疗与高能X线外照射相结合,对晚期巨块型宫颈癌近期局部控制率高无严重并发症出现,但远期疗效有待观察.     

锎-252中子术前腔内照射治疗宫颈癌一例报告

宫颈癌术前放疗目前多采用铱-192腔内照射。2002年11月,我们使用锎-252中子术前腔内照射治疗宫颈癌1例,取得较好的疗效,现报道如下。     

Primary culture of retinal Müller cells in adult rats assisted by the peritoneal exudative cells

Objective To investigate the effect of peritoneal exudative cells as feeder cells on growth from adult rats, which were identified with specifically biological marker of maerophage (CD68). The by enzyme digestion method, and identified by GFAP and vimentin immunocytochemicaUy. As the feeder cells. Results Over ninety-five percent of rat peritoneal exudative cells were macrophage, which have a flask and grew fast, with large applanate cell bodies. The third-generation cells grew slowly. After cocuhured with feeder cells, the Moiler cells showed more rapid growth rate with more cells in S and G2/M phase(S phase, t=4. 172, P<0.001; G2/M phase, t=3. 562, P<0.01)and less apoptotic rate (t =3. 804, P<0. 01). The growing cycle was cut down from 25-30 days to 18-22 days for the first-generation cells, from 10-15 days to 7-10 days for the second-generation cells. Conclusion It is an effective method to use the peritoneal exudative cells as feeder cells cocuhured with primary culture of retinal Müller cells,which can shorten the culture period of Müller cells in adult rats.     

M&#252;ller细胞对大鼠光感受器变性及视功能的保护作用

目的以RCS视网膜色素变性大鼠为模型,研究经诱导产生神经干细胞特性的M&#252;ller细胞视网膜下腔移植对光感受器变性的保护作用。方法向6周龄VC大鼠玻璃体腔内注射神经毒素混合液（包含NMDA、kainate、FGF2和胰岛素）刺激视网膜M&#252;ller细胞。1周后取材分离M&#252;ller细胞体外原代培养。将细胞标记后,以每眼1&#215;10^5个细胞密度移植到6周龄RCS大鼠右眼视网膜下腔,左眼分组注射正常M&#252;ller细胞和PBS作为同型对照及阴性对照。术后分别于第1、3、5、7周,行视网膜铺片、组织病理学及视觉电生理检查。结果培养的M&#252;ller细胞纯度可达96％以上,其中表达神经干细胞标志物的细胞占总细胞量的53％以上。组织病理学观察显示,在相同时间点移植眼保留的光感受器细胞数量明显较同型对照眼多,同型对照移植眼保留的光感受器细胞数量明显较阴性对照眼多。视网膜电图（ERG）检查结果与病理学结果相符。结论视网膜下腔移植经诱导产生神经干细胞特性的M&#252;ller细胞可以有效延缓RCS大鼠视网膜光感受器变性,为治疗视网膜变性疾病提供了新的途径。     

Primary culture of retinal Müller cells in adult rats assisted by the peritoneal exudative cells

Objective To investigate the effect of peritoneal exudative cells as feeder cells on growth from adult rats, which were identified with specifically biological marker of maerophage (CD68). The by enzyme digestion method, and identified by GFAP and vimentin immunocytochemicaUy. As the feeder cells. Results Over ninety-five percent of rat peritoneal exudative cells were macrophage, which have a flask and grew fast, with large applanate cell bodies. The third-generation cells grew slowly. After cocuhured with feeder cells, the Moiler cells showed more rapid growth rate with more cells in S and G2/M phase(S phase, t=4. 172, P<0.001; G2/M phase, t=3. 562, P<0.01)and less apoptotic rate (t =3. 804, P<0. 01). The growing cycle was cut down from 25-30 days to 18-22 days for the first-generation cells, from 10-15 days to 7-10 days for the second-generation cells. Conclusion It is an effective method to use the peritoneal exudative cells as feeder cells cocuhured with primary culture of retinal Müller cells,which can shorten the culture period of Müller cells in adult rats.     

APE1在宫颈癌的表达及其与锎-252中子放疗预后的关系

目的探讨脱嘌呤／脱嘧啶核酸内切酶（APE1）基因在宫颈癌中的表达情况及其与临床病理和锎-252中子放射治疗预后的关系。方法应用免疫组织化学法检测10例正常宫颈组织、15例子宫颈上皮内肿瘤（CIN）组织、89例宫颈癌组织（接受锎-252中子刀放疗）中APE1的表达,并分析其与宫颈癌临床病理及患者预后的关系。结果宫颈癌组织APE1表达水平明显高于正常宫颈组织和CIN病例（P〈0．01）。APE1在正常宫颈组织和CIN病例均呈胞核表达,宫颈癌组织中APE1呈胞核表达（59例）、单纯胞浆表达（8例）或核浆共同表达（22例）。APE1表达强度与宫颈癌FIGO分期、病理分级和淋巴结转移情况有关（P〈0．05）,与年龄和病理分型无关。APE1亚细胞定位情况与FIGO分期、病理分级有关（P〈0．01）,与淋巴结转移情况无关。生存分析显示在APE1核表达组（中位生存时间70．9月）和APE1低表达组（中位生存时间75．8月）的生存时间明显长于APE1浆表达组（中位生存时间57．8月）和APE1高表达组（中位生存时间56．5月）（P=0．025,0．001）。结论APE1胞质异位表达可能与宫颈癌的发生、发展相关,APE1亚细胞定位和表达水平对锎-252中子放射治疗宫颈癌的疗效有提示作用。