N-甲基-N-亚硝脲诱导的大鼠视网膜感光细胞损伤模型中Müller细胞增殖和细胞因子分泌的变化

目的：建立N-甲基-N亚硝脲（N-methyl-N-nitrosourea,MNU）损伤视网膜的模型,研究视网膜神经元凋亡对Müller细胞生物学特性的影响及神经营养因子的表达变化.方法：腹腔注射MNU建立视网膜损伤模型,免疫荧光染色方法研究感光细胞缺失对Müller细胞的生物学特性的影响,并检测主要神经营养因子表达的变化.结果：TUNEL法显示,腹腔注射MNU后2 d,视网膜外核层细胞凋亡现象明显.核增殖抗原（PCNA）及细胞周期素CyclinD1的表达明显增高.与此同时,Müller细胞也开始表达神经干细胞抗原巢蛋白（nestin） RT-PCR显示胰岛素样生长因子（IGF）,碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）和肝细胞生长因子（HGF）mRNA的表达均升高.结论：在视网膜受到损伤时,Müller细胞增殖、去分化呈现出干细胞的特性.而视网膜中IGF、bFGF和HGF等细胞因子的表达明显增高,提示视网膜损伤后可能通过大量分泌细胞生长因子,促进Müller细胞的增殖.     

经椎弓根入路椎体内置入cage治疗Ⅲ期Kümmell病的疗效观察

【摘要】 目的：研究经椎弓根入路椎体内置入cage治疗Ⅲ期Kümmell病的可行性及效果。方法：本研究共纳入2018年1月～2022年1月于山东大学齐鲁医院脊柱科诊断为Ⅲ期Kümmell病且采用经椎弓根入路椎体内置入cage加后路脊柱稳定技术治疗的8例患者,男性3例,女性5例,年龄59～78岁,平均68.9±6.2岁。统计患者术前、术后3d及随访半年时的Oswestry功能障碍指数（Oswestry disability index,ODI）和腰背部疼痛视觉模拟评分（visual analogue scale,VAS）,同时测量术前、术后及随访半年的Cobb角和矢状面骨折椎体椎高比（前缘/后缘）以评价临床疗效。结果：患者术后3d（6.00±1.31分）及术后半年随访（1.25±1.04分）的VAS评分较术前（7.75±1.04分）明显降低（P＜0.05）。患者术后3d[（47.00±6.68）%]及术后半年随访[（10.25±5.70）%]时的ODI较术前[（64.63±6.35）%]明显恢复（P＜0.001）。术后3d时的Cobb角（13.93°±3.69°）较术前（36.89°±11.09°）明显减低（P＜0.001）,并且术后半年随访时（13.15°±3.88°）较术后3d时无统计学差异（P=0.689）。术后3d矢状面骨折椎体椎高比（前缘/后缘）（0.94±0.03）较术前（0.57±0.17）明显恢复（P＜0.001）,且术后半年随访时（0.93±0.03）较术后3d时无统计学差异（P=0.463）。8例患者均术后疼痛得到缓解、椎体前柱高度恢复满意和后凸畸形有显著改善,且随访期间椎体高度丢失较小[（3.18±2.66）%]。结论：经椎弓根入路椎体内cage置入具有脊柱后凸矫正和促进骨性融合等优点。因此,经椎弓根入路椎体内置入cage治疗Ⅲ期Kümmell病是一个很好的选择。     

脑源性神经营养因子在着床前小鼠胚胎中的表达及其对胚胎发育的影响

目的检测脑源性神经营养因子(BDNF)及其受体TrkB在植入前胚胎中的表达情况,探讨BDNF对小鼠早期胚胎发育和着床过程中的作用。方法收集小鼠受精后1~4d的胚胎,利用免疫组化和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测BDNF及其受体TrkB在各阶段胚胎中的表达情况。将2细胞阶段的胚胎放入添加不同浓度的BDNF的培养基中,添加或不添加TrkB受体阻断剂k252a/k252b,观察胚胎发育情况,并对形成的囊胚进行细胞计数。在注射人绒毛膜促性腺激素(HCG)后72h、76h、84h和88h分别腹腔注射10μg K252a/k252b,收集胚胎,计算扩张期囊胚数和囊胚细胞数。结果 BDNF及TrkB均表达于小鼠植入前各阶段的胚胎中,在培养基中添加BDNF后能够促进小鼠胚胎的体外发育,能够提高囊胚形成率和囊胚孵化率,并能够提高滋养层细胞数,此作用能够通过TrkB受体阻断剂k252a而阻断。体内研究进一步证实,k252a处理后能够抑制囊胚细胞数而明显抑制早期胚胎发育。结论 BDNF/TrkB信号系统可能通过某种自分泌或旁分泌的作用方式促进植入前胚胎的发育,同时也可能参与胚胎的着床过程。     

短节段椎弓根螺钉固定联合椎体成形术治疗伴有后凸畸形Kümmell病

目的 :探讨后路短节段椎弓根螺钉内固定联合椎体成形术治疗伴有后凸畸形Kümmell病的临床疗效。方法:回顾性分析2016年1月至2018年12月采用后路短节段椎弓根螺钉内固定联合椎体成形术治疗的24例伴有后凸畸形Kümmell病患者,其中男6例,女18例,年龄63～85(73.1±6.5)岁。比较患者术前、术后3 d及末次随访时的疼痛视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS),Oswestry功能障碍指数(Oswestry Disability Index,ODI),伤椎椎体前缘高度,受累节段矢状面Cobb角等指标以评价临床疗效,并观察手术并发症。结果:所有24例患者获得随访,时间12～24(15.5±3.2)个月。VAS评分由术前的5.21±1.06下降至术后3 d的2.38±0.58以及末次随访时的1.71±0.75;ODI由术前的(50.4±13.5)%下降至术后3 d的(20.9±8.0)%以及末次随访时的(16.7±9.6)%;椎体前缘高度由术前的(8.0±4.2) mm恢复至术后3 d的(18.1±5.0) mm以及末次随访时的(16.8±5.1) mm;Cobb角由术前的(19.5±6.3)°下降至术后3 d的(7.6±2.1)°以及末次随访时的(8.4±1.7)°。术后3 d和末次随访VAS、ODI、椎体前缘高度、Cobb角较术前明显改善(P0.05)。术后出现1例无症状骨水泥渗漏,1例浅表切口感染。结论:后路短节段椎弓根螺钉内固定联合椎体成形术治疗伴有后凸畸形Kümmell病具有手术创伤相对小、临床效果优良、椎体高度恢复良好、后凸角度纠正满意、并发症少等优势,是治疗伴有明显后凸畸形Kümmell病的一种较为安全有效的手术方式。     

五例中子源意外事故受照者的临床观察

五例中子源意外事故受照者的临床观察张惠生王守正武在炎１事故的一般情况１．１事故经过１９９６年４月３０日早８时，某研究所测井仪器刻度中心在仪器测试后，无意将７．４×１０１１Ｂｑ（２０Ｃｉ）２４１Ａｍ－Ｂｅ中子源遗留在仪器中，使得秦、贾、王、刘、高５人受...     

252Cf腔内照射治疗食管癌疗效与病变外侵程度的相关性

目的 观察252Cf中子射线内照射治疗食管癌的疗效与食管肿瘤外侵程度及病变长度的关系及对患者预后的影响.方法 对32例食管癌患者进行外照射加252 Cf腔内照射治疗,常规外照射38 Gy/19次(2 Gy/次,1次/日,5次/周)后,开始内外照射同期进行,内照射4 Gy/次,1次/周,共12 Gy/3次,外照射总量为50 Gy.结果 病变长度≤5 cm患者1、3、5年局部控制率及生存率明显高于＞5 cm患者,分别为93.75％、76.70％、65.75％和93.75％、56.25％、43.75％(x2 =7.01,P＜0.05);60.94％、27.08％、27.08％和75.00％、18.75％、12.50％(x2=5.96,P＜0.05).最大浸润深度≤1.5 cm患者1、3、5年局部控制率及生存率明显高于最大浸润深度＞1.5 cm患者,分别为92.31％、73.85％、61.54％和92.31％、61.54％、46.15％(x2=3.87,P＜ 0.05);67.67％、35.45％、35.45％和73.68％、21.05％、15.79％(x2=6.24,P＜0.05).病变长度≤5 cm且浸润深度≤2.0 cm患者与病变长度＞5 cm且浸润深度＞2.0 cm患者比较,局部控制率和生存率差异有统计学意义(x2=10.09、7.97,P＜0.05).结论 食管癌病变长度≤5 cm,CT最大外侵≤1.5 cm,可能是252 Cf中子射线腔内照射的最好适应证.而当病变长度≤5 cm且肿瘤最大浸润深度≤2 cm时也可作为252 Cf中子射线腔内照射的较佳选择.     

豚鼠近视眼视网膜Müller细胞的原代培养

目的研究豚鼠近视眼视网膜Müller细胞原代培养的方法。方法用半透明眼罩遮盖法建立豚鼠的近视眼模型。采用酶消化法培养豚鼠近视眼视网膜Müller细胞,用倒置相差显微镜观察Müller细胞的生长状况,以GFAP、Vimentin免疫组化染色进行细胞鉴定。结果半透明眼罩遮盖豚鼠右眼2周后,遮盖眼眼轴延长,近视形成。原代培养的视网膜Müller细胞贴壁生长,胞体较大、扁平,GFAP、Vimentin免疫组化染色呈阳性。结论酶消化法是培养豚鼠近视眼视网膜Müller细胞的一种有效方法。     

兔视网膜挫伤后Müller细胞Vimentin表达的变化

目的：探讨兔视网膜挫伤后Müller细胞波形蛋白（Vimentin）表达的变化 方法：通过3J能量自由落体方式制作兔眼挫伤性视网膜病变模型,于伤后1/8,1,3,7,14d时处死动物取材,免疫组化染色和计算机图像分析仪检测视网膜挫伤后Müller细胞Vimentin的表达和分布。 结果：视网膜挫伤后1d Vimentin开始阳性表达增强,7d达到高峰,14d略有下降。随着视网膜挫伤时间的延长,Vimentin的免疫染色范围也逐渐向外扩展,3d时免疫染色达外界膜,7d时视网膜全层都有表达,二组比较,各时段差别均P〈0.01,存在统计学差异。 结论：视网膜挫伤后Müller细胞Vimentin反应动态增强。     

视网膜脱离时神经生长因子对Müller细胞中间丝蛋白表达的影响

目的研究实验性视网膜脱离(RD)时外源性神经生长因子(NGF)对Müller细胞功能的影响作用.方法29只SD大鼠建立RD模型,并分为NGF实验组、空白、单纯RD、正常对照共4组.在建立RD模型后观察1.5、3、6h,1/2、1、2、4、8、16、32d.NGF实验组在建立模型后每4d在玻璃体腔内注射NGF 5μg/5μL/次,空白对照组注射空白载体作为对照.采用免疫组织化学方法对Müller细胞的GFAP和vimentin进行标记.非参数统计方法分析.结果单纯RD组显示随脱离时间延长,二者在Müller细胞的表达强度逐渐增强,分布范围变广.NGF实验组显示Müller细胞内的二者表达强度低于对照组,差异有显著性(P<0.05).结论外源性NGF能抑制RD后Müller细胞过度表达GFAP和vimentin,防止Müller细胞过度反应.     

Primary culture of retinal Müller cells in adult rats assisted by the peritoneal exudative cells

Objective To investigate the effect of peritoneal exudative cells as feeder cells on growth from adult rats, which were identified with specifically biological marker of maerophage (CD68). The by enzyme digestion method, and identified by GFAP and vimentin immunocytochemicaUy. As the feeder cells. Results Over ninety-five percent of rat peritoneal exudative cells were macrophage, which have a flask and grew fast, with large applanate cell bodies. The third-generation cells grew slowly. After cocuhured with feeder cells, the Moiler cells showed more rapid growth rate with more cells in S and G2/M phase(S phase, t=4. 172, P<0.001; G2/M phase, t=3. 562, P<0.01)and less apoptotic rate (t =3. 804, P<0. 01). The growing cycle was cut down from 25-30 days to 18-22 days for the first-generation cells, from 10-15 days to 7-10 days for the second-generation cells. Conclusion It is an effective method to use the peritoneal exudative cells as feeder cells cocuhured with primary culture of retinal Müller cells,which can shorten the culture period of Müller cells in adult rats.