猪苓多糖对膀胱癌细胞钙离子浓度的影响

目的　观察猪苓多糖对人T2 4膀胱癌细胞内钙离子 (Ca2 )浓度的影响 ,探讨猪苓多糖抗癌机理。方法　体外培养人T2 4细胞经钙荧光指示剂 (calciumcrimson AM )负载后 ,用激光扫描共聚焦显微镜测定猪苓多糖作用前后细胞内Ca2 随时间的变化。结果　猪苓多糖低剂量 (0 .2mg·L- 1)使T2 4细胞内Ca2 降低 ,高剂量 (>1mg·L- 1)使T2 4细胞内Ca2 升高 ,最后维持在高钙水平上。猪苓多糖主要促进细胞核内Ca2 升高 ,细胞浆Ca2 无明显改变。结论　猪苓多糖可引起T2 4细胞内Ca2 水平的显著变化 ,而且这种变化主要表现在细胞核内 ,提示猪苓多糖可能有诱导细胞凋亡的作用     

Vitamin D and Diseases of Mineral Homeostasis: A Cyp24a1 R396W Humanized Preclinical Model of Infantile Hypercalcemia Type 1

Infantile hypercalcemia type 1 (HCINF1), previously known as idiopathic infantile hypercalcemia, is caused by mutations in the 25-hydroxyvitamin D 24-hydroxylase gene, CYP24A1. The R396W loss-of-function mutation in CYP24A1 is the second most frequent mutated allele observed in affected HCINF1 patients. We have introduced the site-specific R396W mutation within the murine Cyp24a1 gene in knock-in mice to generate a humanized model of HCINF1. On the C57Bl6 inbred background, homozygous mutant mice exhibited high perinatal lethality with 17% survival past weaning. This was corrected by crossbreeding to the CD1 outbred background. Mutant animals had hypercalcemia in the first week of life, developed nephrolithiasis, and had a very high 25(OH)D₃ to 24,25(OH)₂D₃ ratio which is a diagnostic hallmark of the HCINF1 condition. Expression of the mutant Cyp24a1 allele was highly elevated while Cyp27b1 expression was abrogated. Impaired bone fracture healing was detected in CD1-R396^w/w mutant animals. The augmented lethality of the C57Bl6-R396W strain suggests an influence of distinct genetic backgrounds. Our data point to the utility of unique knock-in mice to probe the physiological ramifications of CYP24A1 variants in isolation from other biological and environmental factors.     

非酒精性脂肪肝与2型糖尿病肾损伤关系的研究

目的探讨非酒精性脂肪肝（NAFLD）与2糖尿病肾损伤发生风险之间的关系。方法T2DM患者466例,分为T2DM伴NAFLD组（N组,n=266）及T2DM不伴NAFLD组（NN组,n=200）,测定24h尿微量白蛋白排泄率（UAER）,比较两组间肾脏损伤发生率。结果N组BMI、DBP、FPG、FCP、FINS、HbAlC、HOMA—IR、TC、TG、ALT、UAER高于NN组（P〈0．05）;N组的肾损伤发生率高于NN组（P〈0．05）;Logistic回归分析显示,NAFLD是2糖尿病肾损伤的独立危险因素（P〈0．05）。结论N组2糖尿病肾损伤的发生率高于NN组,NAFLD是2糖尿病肾损伤的独立危险因素。     

KTDA抑制肿瘤细胞增殖和诱导凋亡的研究

目的探讨3-Keto-tirucall-8,24-dien-21-oic acid(KTDA)体外抑制肿瘤细胞增殖及诱导凋亡的作用。方法使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察KTDA对肿瘤细胞的增殖抑制作用;通过吖啶橙染色,观察肿瘤细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳法检测它们对细胞DNA降解的影响。结果KTDA浓度为100、10、1μg.mL-1,作用72 h时,能抑制人乳腺癌细胞系MCF-7、人肝癌细胞株SMMC-7721、人慢性髓性白血病细胞系K562、人宫颈癌细胞系Hela、人舌癌细胞系Tca 8113的生长,并呈浓度依赖性。当KTDA浓度为10μg.mL-1时,处理72 h后,于荧光显微镜下观察到凋亡小体,电泳结果显示典型的DNA梯状条带。结论KTDA能抑制5种肿瘤细胞的增殖,并呈浓度依赖性,KTDA对MCF-7、SMMC-7721、K562、Hela比较敏感,Tca 8113次之,其机制可能为通过诱导5种肿瘤细胞凋亡而发挥抗肿瘤的作用。     

1型糖尿病伴糖尿病酮症酸中毒患儿发生急性肾损伤的临床研究

目的评估1型糖尿病伴糖尿病酮症酸中毒（diabetic ketoacidosis，DKA）患儿发生急性肾损O24;（acute kidney injury，AKI）的情况，探讨导致DKA患儿发生AKI的可能潜在因素。方法回顾性将2018年1月1日至2020年12月31日在南京医科大学附属儿童医院就诊的45例1型糖尿病伴DKA患儿，按照入院时是否合并AKI分为无AKI组（n=37）和合并AKI组（n=8）。收集N24;组患儿社会人口学资料，入院时的体检数据，包括身高、体重、血压和心率等，采用化学发光微粒免疫分析法测定患儿入院及出院时血肌酐和尿素氮等指标水平。采用多因素logistic回归模型分析1型糖尿病伴DKA患儿发生AKI的影响因素。结果45例患儿确诊中位年龄为9.2岁，8例（18%）入院时合并AKI的患儿中，6例为1期AKI，2例为3期AKI。血校正钠水平升高与1型糖尿病伴DKA患儿发生AKI密切相关（P<0.05），而入院时较高的胰岛素水平则不易发生AKI（P<0.05）。结论1型糖尿病伴DKA患儿AKI的发生率较高，临床上应积极纠正DKA，尽快控制血糖，并定期对这部分儿童病例进行肾功能复查和随访。     

Effectiveness,nephrotoxicity, and therapeutic drug monitoring of polymyxin B in nosocomial pneumonia among critically ill patients

ObjectivesWe aimed to assess the effectiveness and nephrotoxicity of polymyxin B in critically ill patients with nosocomial pneumonia and to evaluate the utility of its therapeutic drug monitoring (TDM).MethodsWe retrospectively analyzed patients who received polymyxin B treatment for ≥48 h since the establishment of polymyxin B TDM in a 26‐bed tertiary referral intensive care unit. Univariate and multivariate analyses were conducted to assess the variables associated with polymyxin B effectiveness and nephrotoxicity.ResultsA total of 62 patients were enrolled. Most (56.5%) of the patients performed TDM, 54.3% of them reached the therapeutic target of area under curve across 24 h at steady state (AUC_ss,24h) of 50–100 mg h L⁻¹, and 10 patients had an AUC_ss,24h value of <50 mg h L⁻¹. Thirty‐six (58.1) and 31 (50.0%) patients had favorable clinical and microbiological responses, respectively. Reaching the therapeutic target of AUC_ss,24h (odds ratio [OR] = 13.15, p = 0.015), a favorable microbiological response (OR = 40.80, p = 0.00), and complicated with septic shock (OR = 0.12, p = 0.021) were independently associated with favorable clinical outcomes of polymyxin B treatment. The incidence of acute kidney injury (AKI) was 45.2%. A lower creatinine clearance (OR = 0.96, p = 0.008) and concomitant treatment with loop diuretics (OR = 5.93, p = 0.046) were predictive of nephrotoxicity.ConclusionOur findings show that TDM of polymyxin B is a valuable intervention, and the achievement of its optimal pharmacodynamic target can improve treatment outcome. Renal insufficiency and concomitant treatment with loop diuretics were found to be associated with the risk of nephrotoxicity.     

后交叉韧带单束重建术股骨隧道角度与内侧副韧带损伤的相关性分析

目的探讨后交叉韧带重建术（posterior cruciate ligament reconstruction，PCLR）中，股骨隧道在股骨内侧髁的开口是否会造成内侧副韧带（medial collateral ligament，MCL）医源性损O24;，并估计股骨隧道放置的安全角度。 方法使用13具甲醛浸泡人体膝关节标本，捐赠者男8例，女5例；年龄49～71岁，平均61岁。仔细解剖每个膝关节标本股骨内侧区，明确MCL在股骨内侧走行与附着的区域，并沿此区域24d;缘作1条标记线，通过这条标记线将股骨内侧髁分割为MCL覆盖区和无MCL分布的相对安全区域。然后将膝关节标本的后交叉韧带（posterior cruciate ligament，PCL）切断以暴露PCL股骨附着区，在120° 屈曲角度固定的膝关节标本上，模拟PCL单束重建术中股骨隧道制备，采用由内向外技术从膝关节内部的PCL股骨足迹处向股骨内侧方向进行股骨隧道钻孔，并通过轴面和冠状面N24;平面角度组合的方式实现不同方向股骨隧道的创建。选取15种角度组合［0°/30°、0°/45°、0°/60°、15°/30°、15°/45°、15°/60°、30°/30°、30°/45°、30°/60°、45°/30°、45°/45°、45°/60°、60°/30°、60°/45°和60°/60°（轴面/冠状面）］，验证股骨隧道放置角度是否为损O24;MCL的危险因素，并通过检验各角度组合产生的股骨隧道开口点与MCL24d;缘标记线的最短距离是否存在差异来估计股骨隧道放置的安全角度。 结果在PCLR中创建股骨隧道时，存在MCL被股骨隧道出口损O24;的风险，发生率为0～100%，当轴平面钻孔角度为0° 和15° 时，MCL损O24;发生率高达69.23%～100%。并且股骨隧道放置角度不同，其MCL损O24;发生率差异有统计学意义（χ²=148.195，P<0.001）。通过组间比较发现，以45°/45°、45°/60°、60°/30°、60°/45° 和60°/60°（轴面/冠状面）这5个角度组合创建的股骨隧道，其隧道出口点与标记线最短距离与0°/45°、0°/60°、15°/45°、15°/60° 和30°/30°（轴面/冠状面）比较差异有统计学意义（P<0.05）；进一步比较最短距离的中位数发现，这5个角度组合的股骨隧道出口点更远离标记线及其后方的MCL。 结论在PCLR中股骨隧道的创建会造成MCL医源性损O24;，且损O24;风险受隧道角度影响，推荐以45°/45°、45°/60°、60°/30°、60°/45° 和60°/60°（轴面/冠状面）角度组合创建股骨隧道，以降低MCL的医源性损O24;风险。     

膝关节内侧副韧带股骨止点损伤的诊治进展

目的对膝关节内侧副韧带（medial collateral ligament，MCL）股骨止点损O24;的诊治进展进行总结，为临床诊治提供参考。 方法查阅国内外近年有关膝关节MCL股骨止点损O24;诊治的文献，从解剖学损O24;机制、诊断和分型、治疗现状等方面进行总结。 结果基于MCL股骨止点的解剖学特点，膝异常外翻、胫骨平台过分外旋和24d;移会导致MCL股骨止点应力集中，从而出现损O24;。临床应根据损O24;特点进行分型，以指导精细化和个性化治疗。 结论由于对膝关节MCL止点损O24;的认识不同，导致治疗方式各异，愈合效果也存在差异。如何促进MCL止点损O24;的愈合，仍需要进一步研究。     

灯盏花素对宫内炎症致早产大鼠脑损伤的保护作用及其机制探讨

目的探讨灯盏花素对宫内炎症致早产大鼠脑损O24;的保护作用及其机制。方法向孕鼠腹腔内注射脂多糖制备宫内炎症致早产大鼠脑损O24;模型，孕鼠和仔鼠分别随机分为对照组、模型组、灯盏花素低242;量（45 mg/kg）组、灯盏花素高242;量（90 mg/kg）组、灯盏花素高242;量（90 mg/kg）+ML385［核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid 2-related factor 2，Nrf2）抑制242;，30 mg/kg］组（n=10）。测定各组孕鼠产出的仔鼠存活数和体重；苏木精-伊红染色法观察各组孕鼠子宫、胎盘病理形态及仔鼠脑组织病理形态；免疫荧光染色法检测各组仔鼠脑皮质离子钙接头蛋白分子-1（ionized calcium-binding adaptor molecule-1，IBA-1）与核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3，NLRP3）共表达情况；酶联免疫吸附法检测各组仔鼠脑组织中白细胞介素（interleukin，IL）-6、IL-8、IL-1β水平；免疫印迹法检测各组仔鼠脑组织中Nrf2通路相关蛋白表达。结果与对照组相比，模型组孕鼠子宫、胎盘组织及仔鼠脑组织产生病理损O24;，仔鼠脑皮质产生严重小胶质细胞焦亡，仔鼠存活数和体重、脑组织中Nrf2及血红素加氧酶-1（heme oxygenase-1，HO-1）蛋白表达水平降低（P<0.05），仔鼠脑组织中IBA-1和NLRP3共表达相对荧光强度、炎性因子IL-6、IL-8及IL-1β水平、NLPR3及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（caspase-1）蛋白表达均升高（P<0.05）；与模型组相比，灯盏花素低、高242;量组孕鼠子宫、胎盘组织及仔鼠脑组织病理损O24;均减轻，仔鼠存活数和体重、Nrf2及HO-1蛋白表达水平均升高（P<0.05），仔鼠脑组织中IBA-1和NLRP3共表达相对荧光强度、炎性因子IL-6、IL-8及IL-1β水平、脑组织中NLPR3及caspase-1蛋白表达均降低（P<0.05）；且灯盏花素高242;量组效果优于灯盏花素低242;量组，差异有统计学意义（P<0.05）；ML385可显著抑制灯盏花素高242;量组的干预效果（P<0.05）。结论灯盏花素可通过激活Nrf2通路而抑制宫内炎症致早产大鼠脑组织炎症反应，抑制小胶质细胞焦亡，减轻早产大鼠脑损O24;。     

家庭结构对青少年抑郁和焦虑症状的影响：情感忽视的中介作用

目的探索家庭结构对青少年抑郁、焦虑症状的影响及其作用机制。方法采用整群抽样法于2021年4—5月对上海市7240;中学的学生进行线上问卷调查。问卷包括自编一般情况调查表、儿童期创O24;问卷、儿童抑郁量表和儿童焦虑性情绪障碍筛查表。采用单因素方差分析、卡方检验、二元logistic回归、中介效应分析等方法探讨不同家庭结构青少年的抑郁和焦虑症状发生情况、儿童期创O24;的差异及其中介作用。结果与核心家庭青少年相比，三代直系家庭的青少年出现抑郁症状的风险较低（OR=0.794，95%CI：0.649~0.972，P<0.05），寄宿家庭的青少年出现抑郁症状的风险较高（OR=4.548，95%CI：1.113~18.580，P<0.05）；隔代家庭和寄宿家庭的青少年在儿童期创O24;问卷中情感忽视维度的得分更高（P<0.05）。情感忽视在隔代家庭和寄宿家庭对青少年抑郁症状的影响中起中介作用。结论父母和祖辈在家庭结构中具有一定的积极影响。与父母分离会使青少年感知到更多的情感忽视，进而增加抑郁症状的发生。