滇重楼的化学成分研究

目的研究滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis根茎中的化学成分。方法利用正相硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、反相制备色谱等手段进行分离纯化,并通过1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS等波谱技术进行结构鉴定。结果从醋酸乙酯层中分离得到了7个化合物,分别鉴定为豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅰ)、1-O-(β-D-葡萄糖基)-(2S,3S,4E,8E)-2-[(2′R)-2′-羟基十六酰氨基]-4(E),8(E)-十八二烯-1,3-二醇(Ⅱ)、β-蜕皮激素(Ⅲ)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅵ)和偏诺皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅶ)。结论化合物Ⅱ为首次从该属植物中分离得到。     

Pharmacological evaluation of sedative–hypnotic activity and gastro-intestinal toxicity of Rhizoma Paridis saponins

Ethnopharmacological relevance

Rhizoma Paridis saponins (RPS) have been well studied for antimicrobial, anti-hemorrhagic, and anticancer effects. However, scientific information on RPS regarding the toxic and neuropharmacological effects is limited. In this study, the acute oral toxicity, sedative–hypnotic activity and gastro-intestinal toxicity of RPS were investigated.

Materials and methods

The acute toxicity was carried out by administering single doses (800–5000 mg/kg) of RPS to adult mice. Rotarod test and sodium pentobarbital-induced hypnosis activity were used to evaluate the neuropharmacological effects on mice. Gastric emptying and intestinal transit were used to investigate the gastric–intestinal system effects.

Results

A single oral administration of RPS dose-dependently caused adverse effects on the general behavior and mortality rate of mice. LD₅₀ value of oral acute toxicity was 2182.4 mg/kg, with 95% confidence limit of 1718.4–2807.8 mg/kg. In the test of sleeping mice, RPS acted in synergy with sodium pentobarbital at doses 250 and 500 mg/kg while motor coordination was not influenced within 120 min after treatment with RPS. Regarding the gastric–intestinal toxicity, RPS (100, 250, and 500 mg/kg) significantly inhibited gastric emptying but did not affect the intestinal transit.

Conclusions

RPS, which is a hypotoxic anticancer drug, possesses the sedative–hypnotic activity and gastric stimulus side effect.     

灰毡毛忍冬与忍冬的主要药效学比较研究

目的 研究灰毡毛忍冬的主要药效,并与忍冬相关药效进行比较.方法 通过测定灰毡毛忍冬的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),研究其对6种常见致病菌的抗菌作用;采用醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加、二甲苯致小鼠耳廓肿胀、角叉菜胶致大鼠足肿胀和大鼠棉球植入致肉芽肿等实验,研究其抗炎作用;采用酵母粉致热大鼠模型,研究其解热作用;通过测定大鼠白细胞数和免疫低下小鼠免疫器官质量及碳粒廓清实验,研究其免疫作用,并与忍冬进行比较.结果 灰毡毛忍冬对6种常见致病菌具有显著的抑菌和杀菌作用,MIC为7.8～62.8 mg/mL,MBC≥250 mg/mL;灰毡毛忍冬(10 g/kg)能显著降低小鼠腹腔毛细血管通透性、大鼠足肿胀度和减少肉芽组织的增生,有抑制小鼠耳肿胀和降低发热大鼠体温的趋势,显著提高小鼠脏器指数、廓清指数(K)、吞噬指数(α),有增加大鼠白细胞数的趋势.灰毡毛忍冬与忍冬的上述药效学指标无显著差异.结论 灰毡毛忍冬具有抗菌、抗炎作用和解热的趋势,能增强动物非特异性免疫功能,作用强度与忍冬相当.     

德钦乌头中的二萜生物碱

目的 研究乌头属植物德钦乌头Aconitum ouvrardianum根的二萜生物碱类化学成分.方法 采用反复硅胶柱色谱进行分离纯化,根据谱学数据和对照TLC分析鉴定化合物的结构.结果 从德钦乌头根的醋酸乙酯提取物中分离得到12个化合物,分别鉴定为塔拉乌头胺(1)、彭乌碱乙(2)、卡马考宁(3)、黄草乌碱亭(4)、粗茎乌头碱甲(5)、贡乌生(6)、14-乙酰黄草乌碱亭(7)、展花乌头碱(8)、黄乌宁(9)、膝乌亭丁(10)、异塔拉乌头定(11)、翠雀它灵(12).结论 12个化合物均为C-3位或C-6位无含氧取代的C19-二萜生物碱,且均为首次从该植物中分离得到.乌头碱型C19-二萜生物碱为德钦乌头药材的主要药用化学成分.     

大孔吸附树脂富集纯化白花刺参总皂苷的工艺研究

目的研究大孔树脂吸附法富集和纯化白花刺参总皂苷的工艺参数及条件。方法以总皂苷为考察指标,对HPD-100、HPD-300、HPD-722、D-101、SA-2、AB-8、ADS-7、X-5 8种大孔吸附树脂富集和纯化总皂苷的吸附和解吸性能进行评价。结果 HPD-100树脂纯化总皂苷的最佳条件分别为:吸附条件为药液的质量浓度为0.25 g/mL;pH值为5.32;洗脱液体积流量为1.5 BV/h;最佳吸附容量为3.4 mL/g;解吸条件为用2 BV的蒸馏水洗脱除去杂质后,换用60%乙醇4 BV洗脱。通过HPD-100树脂纯化后,白花刺参总皂苷的纯度由21.30%上升为58.19%,平均回收率为91.58%。结论建立HPD-100大孔吸附树脂富集和纯化白花刺参总皂苷的方法简便可行、专属性强,并且可以为中草药有效成分的大规模生产提供参考。     

差示分光光度法测定广西瑶族藤茶中黄酮类成分的含量

目的建立藤茶中黄酮类成分的含量测定方法,以控制其质量.方法采用差示分光光度法,以双氢杨梅素皮素为指标,采用差示分光光度法,测定波长为(318±1)nm.结果对照品浓度在4.576～22.88μg/mL范围内,吸光度与浓度呈良好的线性关系(r=0.999 8),回归方程为A=29.56C+0.005 5,平均回收率为100.8%,RSD为1.9%(n=5).结论本法操作简单、结果准确、重现性好,可作为该药材的质量控制方法.     

红芪多糖HPS4-1A的化学结构特征研究及分子构象初步分析

目的 研究红芪多糖HPS4-1A的化学结构特征,并初步分析其构象。方法 红芪经水提醇沉法提取、Sevage法脱蛋白、H₂O₂脱色素、Sephadex G-200色谱柱分离纯化得到均一的红芪多糖HPS4-1A。以GC法、高效液相凝胶色谱（HPGC）法、凝胶渗透色谱-多角度激光散射仪联用（GPC-MALLS）法、元素分析、苯酚硫酸法、Bradford法研究其理化性质;以GPC-MALLS法对其构象进行初步分析。采用甲基化、部分酸水解、以及NMR研究其连接方式、主链和支链结构及分支点状况。结果 HPS4-1A的绝对分子质量为7.386×10⁴,相对分子质量6.68×10⁵以上;由鼠李糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖组成,其摩尔比为1∶2∶1∶2,主链骨架由1, 5、1, 3, 5连接的α-L-呋喃阿拉伯糖和1, 6、1, 2, 6连接的α-D-吡喃半乳糖组成,侧链分支点位于阿拉伯糖的3位与半乳糖的2位。侧链分支由1, 4、1, 4, 6-α-D-吡喃葡萄糖,1, 2、1, 2, 4-α-L-呋喃鼠李糖组成。主链末端连接主要是阿拉伯糖,并且连接在1, 5连接的阿拉伯糖的5位。侧链末端连接主要是葡萄糖,还有少量的阿拉伯糖。结论 HPS4-1A为一种新的中性红芪杂多糖,其构象为无规线团状,并且相对分子质量分布呈单分散性。     

Inhibition of matrix metalloproteinases related to metastasis by diosgenyl and pennogenyl saponins

Ethnopharmacological relevance

Diosgenyl and pennogenyl saponins isolated from Rhizoma Paridis, showed pro-apoptosis and immunoregulation with antitumor activity in cultured cells and animal systems.

Aim of the study

To evaluate their anti-metastatic mechanism on cancer cells and discuss their structure-activity relationship on anti-tumor effect.

Materials and methods

This research used the wound healing and migration assay to detect their anti-invasive effect on B16 melanoma cells. Through the gelatin zymography assay, immunofluorescence analysis and western blot, saponins exhibited different levels of protein expression inhibition of MMP-1, -2, -3, -9 and -14.

Results

Through the analysis, diosgenyl and pennogenyl saponins inhibited the metastasis of B16 melanoma cells. Diosgenyl saponins also showed strong suppression of enzyme activity of MMP-2 and -9. Different saponins exhibited different levels of inhibition on MMP expression.

Conclusions

17-α OH increases the sensitivity of diosgenyl saponins to the membrane-bound protease which can stimulate proMMP-2 activation, but it also decreases the anti-metastatic activity of diosgenyl saponin. Furthermore, their combination might provide a potential therapeutic modality for metastasis.     

短葶飞蓬总黄酮含量变化研究

目的 研究短葶飞蓬总黄酮含量与生长发育和月份变化的关系，环境与遗传因素对总黄酮含量的决定作用。方法 测定同一月份不同生长发育期、同一生长发育期不同月份短葶飞蓬的总黄酮含量的器官分布，阳生和阴生生境下短葶飞蓬的总黄酮含量，不同花色短葶飞蓬的总黄酮含量。结果 短葶飞蓬的总黄酮主要分布于地上部分，而地上部分的总黄酮含量以盛花期员高，谢花期最低。4～6月盛花期短葶飞蓬各器官的总黄酮含量月份变化不显著。光照强度对短葶飞蓬总黄酮含量影响不大。短葶飞蓬的花色不能作为总黄酮含量的选择标记，遗传因素对个体间总黄酮含量差异起重要作用。结论 通过遗传育种提高短葶飞蓬总黄酮含量的前景是广阔的。     

基于指纹图谱结合化学计量法对乌头属藏药材榜那的多指标成分分析

目的建立常用乌头属藏药材榜那的指纹图谱及多指标成分含量测定方法,为多基原药材的质量标准制定和临床安全用药提供参考。方法采用HPLC建立榜那药材的指纹图谱并进行相似度评价;测定30批榜那药材中7种生物碱成分含量,并结合主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)评价榜那药材的2种不同基原植物的生物碱成分的差异。结果建立的指纹图谱确认17个共有峰,指认出12-表-欧乌头碱、雪上一枝蒿庚素、苯甲酰新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、新乌头碱、乌头碱、3-乙酰乌头碱7个色谱峰。基于相似度分析,铁棒锤和伏毛铁棒锤种内化学指纹图谱均一,种间指纹图谱存在一定差异。PCA和OPLS-DA结果表明铁棒锤和伏毛铁棒锤2种基原物种在这7种化学成分含量上存在一定差异;且依据OPLS-DA和t检验分析结果可确定伏毛铁棒锤中主要差异成分12-表-欧乌头碱和乌头碱含量显著高于铁棒锤(P0.01)。结论本实验所建立的指纹图谱和多组分定量分析方法简便、易操作、信息量大,可用于榜那药材的质量和临床用药安全性控制;有必要建立和完善榜那的双酯型生物碱限度测定。