滇重楼的化学成分研究

目的研究滇重楼Paris polyphylla var.yunnanensis根茎中的化学成分。方法利用正相硅胶柱色谱、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、反相制备色谱等手段进行分离纯化,并通过1H-NMR、13C-NMR、ESI-MS等波谱技术进行结构鉴定。结果从醋酸乙酯层中分离得到了7个化合物,分别鉴定为豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅰ)、1-O-(β-D-葡萄糖基)-(2S,3S,4E,8E)-2-[(2′R)-2′-羟基十六酰氨基]-4(E),8(E)-十八二烯-1,3-二醇(Ⅱ)、β-蜕皮激素(Ⅲ)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅳ)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-α-L-吡喃鼠李糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅵ)和偏诺皂苷元-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖基(1→4)-[α-L-吡喃鼠李糖基(1→2)]-β-D-葡萄糖苷(Ⅶ)。结论化合物Ⅱ为首次从该属植物中分离得到。     

多序岩黄芪化学成分研究

 目的对豆科岩黄芪属植物多序岩黄芪(Hedysarum polybotrys Hand.-Mazz.)的根进行化学成分研究。方法通过反复硅胶柱色谱分离和Sephadex LH-20色谱柱纯化,波谱法鉴定结构。结果分离得到7个已知化合物,分别为4'-甲氧基-7-羟基黄酮(Ⅰ),二十六碳酸(Ⅱ),阿魏酸十六烷醇酯(Ⅲ),羽扇豆醇(Ⅳ),3-羟基-9-甲氧基紫檀烷(Ⅴ),β-谷甾醇(Ⅵ),胡萝卜苷(Ⅶ)。结论化合物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ首次从多序岩黄芪中分离得到。     

云南重楼中血管内皮生长因子结合因子的活性研究

目的筛选并分离云南重楼水提物中能与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白结合的物质,并探究其对VEGF的刺激作用。方法采用固相化VEGF亲和柱色谱的方法筛选云南重楼水提物中的VEGF结合因子,HPLC法进一步分离纯化该因子成分,并采用MTT法以VEGF敏感型细胞株HepG2为模型验证该因子活性,采用UV、RRLC-QTOF检测,推测该因子可能的成分组成。结果从云南重楼水提物中筛选到能与VEGF蛋白结合的因子(命名为因子B3),HPLC分离纯化后因子B3可以促进VEGF敏感型细胞HepG2的增殖,而对VEGF不敏感型细胞HEK293的增殖没有影响。因子B3和VEGF蛋白对HepG2细胞的增殖促进作用存在叠加效应;而这种效应可以被VEGF抗体阻断;因子B3本身对HepG2细胞的增殖作用也可以被VEGF抗体阻断。通过UV和RRLC-QTOF检测,推测因子B3可能为皂苷类成分。结论云南重楼中得到的因子B3具有促进VEGF功能的活性。     

藤茶双氢杨梅树皮素对SGC-7901细胞端粒酶活性的影响

目的研究双氢杨梅树皮素（DHM）对人胃癌SGC-7901细胞端粒酶活性的影响。方法应用酶联免疫分析法检测端粒酶活性。结果双氢杨梅树皮素（6．7～10μg·mL^-1,48h）能抑制人胃癌SGC-7901细胞端粒酶活性。结论双氢杨梅树皮素抑制SGC-7901细胞增殖的作用机制可能与对端粒酶活性的抑制作用有关。     

四川盆周山地重楼属植物药用资源的筛选及评价

目的挖掘具有药用价值的优异重楼属植物资源,缓解药用重楼资源压力,为促进重楼的可持续利用提供材料基础。方法在四川盆周山地采集21份重楼资源,根据表型筛选出大块茎资源GQ与MH,多芽资源GK。初步形态鉴定后,利用DNA条形码ITS、psbA-trnH序列,采用Kimura双参数模型构建ML系统聚类树,进行系统发育分析。采用HPLC法检测其主要活性成分皂苷的含量,以预测其潜在药用价值。结果形态学结合分子鉴定结果表明,GQ、GK和MH分别依次为华重楼、滇重楼和长柱重楼。GQ、GK、MH和对照滇重楼(CK)的重楼皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅵ、Ⅶ的含量及其比例表现各异,其中总含量表现为GQMHCKGK,重楼皂苷Ⅰ在GQ和MH中占比较高,分别较CK高出67.61%和73.25%,而重楼皂苷Ⅶ在GK中占比最高,表现为56.38%。结论 GQ、GK和MH分别为产于四川盆周山地特定居群的华重楼、滇重楼和长柱重楼,引种至成都平原后性状表现优良,为后续的重楼的育种研究提供了材料基础;同时3个资源均具药用潜力,其中长柱重楼MH居群资源的重楼皂苷Ⅰ及重楼皂苷总含量较高,为滇重楼、华重楼替代药材的筛选提供了新选择。     

不同产地显齿蛇葡萄以及近缘种指纹图谱的建立及有效成分分析

目的 建立显齿蛇葡萄Ampelopsis grossedentata以及近缘种的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱,并对有效成分进行定量分析。方法 使用Ultimate XB-C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱;流动相为乙腈-0.01%磷酸,检测波长为280、360 nm,体积流量为1 mL/min,进样量20 μL,柱温30 ℃下梯度洗脱,建立显齿蛇葡萄以及近缘种HPLC指纹图谱,结合相似度评价、层次聚类分析（clustering analysis,CA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）与正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares method-discriminant analysis,OPLS-DA）等化学模式识别方法,评价不同产地显齿蛇葡萄及近缘种的质量。结果 建立的HPLC指纹图谱方法符合方法学要求,18批显齿蛇葡萄属样品指纹图谱有31个共有峰,经对照品定性指认4、9、11、14、15和24号峰对应的化合物分别为没食子酸、儿茶素、二氢杨梅素、芦丁、杨梅苷和杨梅素,且相似度＞0.8;所有样品按产地经CA分为2类,PCA结果与其一致;OPLS-DA筛选出不同产地显齿蛇葡萄及近缘种的13～14个差异标志物,以二氢杨梅素和杨梅素为主要差异标志物。结论 建立的指纹图谱方法稳定、可靠、重复性好,结合化学模式识别可用于作为藤茶原料的蛇葡萄属植物的质量评价。     

Pharmacological evaluation of sedative–hypnotic activity and gastro-intestinal toxicity of Rhizoma Paridis saponins

Ethnopharmacological relevance

Rhizoma Paridis saponins (RPS) have been well studied for antimicrobial, anti-hemorrhagic, and anticancer effects. However, scientific information on RPS regarding the toxic and neuropharmacological effects is limited. In this study, the acute oral toxicity, sedative–hypnotic activity and gastro-intestinal toxicity of RPS were investigated.

Materials and methods

The acute toxicity was carried out by administering single doses (800–5000 mg/kg) of RPS to adult mice. Rotarod test and sodium pentobarbital-induced hypnosis activity were used to evaluate the neuropharmacological effects on mice. Gastric emptying and intestinal transit were used to investigate the gastric–intestinal system effects.

Results

A single oral administration of RPS dose-dependently caused adverse effects on the general behavior and mortality rate of mice. LD₅₀ value of oral acute toxicity was 2182.4 mg/kg, with 95% confidence limit of 1718.4–2807.8 mg/kg. In the test of sleeping mice, RPS acted in synergy with sodium pentobarbital at doses 250 and 500 mg/kg while motor coordination was not influenced within 120 min after treatment with RPS. Regarding the gastric–intestinal toxicity, RPS (100, 250, and 500 mg/kg) significantly inhibited gastric emptying but did not affect the intestinal transit.

Conclusions

RPS, which is a hypotoxic anticancer drug, possesses the sedative–hypnotic activity and gastric stimulus side effect.     

滇重楼和南重楼的显微结构研究

目的:对重楼属植物滇重楼和南重楼两个种进行显微结构鉴别研究.方法:采用石蜡切片方法.结果:滇重楼和南重楼这两个种的根、根茎、茎、叶显微结构相似.结论:重楼属内相近种间显微特征相似不易用于种间鉴别,重楼属内相近种间植物需要借助于植物性状和其他手段相结合鉴别.     

天胡荽与破铜钱中总黄酮的含量测定

目的：建立植物天胡荽与破铜钱中总黄酮含量的测定方法,同时测定并比较两种植物中总黄酮含量的差异。方法：用70％乙醇85～90℃加热回流提取药材中的总黄酮,并以芦丁为对照品,用分光光度法在510nm处测定其含量。结果：植物天胡荽样品中总黄酮含量为4．1077mg／g,破铜钱样品中总黄酮含量为14．0273mg／g。结论：两种植物中总黄酮含量有较大差异,天胡荽样品中的总黄酮含量为破酮钱的29．28％     

滇重楼高效液相色谱指纹图谱研究

目的 建立滇重楼根茎的HPLC指纹图谱,控制其质量。方法 采用HPLC法,Eclipse XDB C₁₈（150 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,以乙腈-水为流动相梯度洗脱,检测波长203 nm,柱温25 ℃,体积流量1.0 mL/min。通过外标法对各批次样品中的重楼皂苷I、H、甾体皂苷II、V、VI、VII、薯蓣皂苷、纤细薯蓣皂苷进行测定。结果 18批滇重楼相似度小于0.9,说明不同批次样品差异较大。同时确定了6个共有峰,并通过对照品对其进行了归属。甾体皂苷II在S₈、S₉批次中的量最高,重楼皂苷I在S₇批次中的量最高,甾体皂苷VI只在4个批次中检测出。结论 该方法简便、准确,具有良好的精密度、重复性、稳定性,可用于滇重楼的质量控制及综合评价。