太子参均一多糖的分离与表征

目的:对太子参抗二型糖尿病多糖活性部位(PF40),进行分离纯化得到均一多糖并对其进行结构表征。方法:太子参粉碎后,通过水提醇沉法(40%乙醇)得到太子参粗多糖,采用DEAE-纤维素、葡聚糖凝胶柱对其分离纯化,得到一种均一多糖,采用高效凝胶渗透色谱法测定分子量,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)-柱前衍生高效液相色谱法分析单糖组成。结果:分离得到一种均一多糖,由葡萄糖组成,分子量为18400Da,命名为HPh-1-1。结论:太子参均一多糖HPh-1-1是一种葡聚糖。     

浅论针刺申脉、照海治疗失眠

中医学认为失眠主要是由"阴阳失交"引起的,而西医学认为睡眠与多种中枢神经递质相关。针刺申脉、照海既可调和阴阳,又可调节神经递质的含量,从而达到治疗失眠的目的,此二穴相伍,治疗失眠优势显著。     

葛根芩连汤合乌梅丸治疗慢性荨麻疹验案1则

慢性荨麻疹属于临床多见的变态反应性疾病,西医治疗运用抗组胺药,病情控制差且较易反复,而中医辨证施治结合患者体质特点,治疗效果确切。笔者运用葛根芩连汤合乌梅丸治疗慢性荨麻疹1例,效果确切,现报道如下。     

基于网络药理学及Akt1/mTOR自噬通路探讨黄芪减少糖尿病肾病蛋白尿的作用机制＊

目的 通过网络药理分析及相关的动物实验探讨黄芪减少糖尿病肾病蛋白尿（Diabetic nephropathy proteinuria，DNP）的作用机制。方法 利用TCMSP数据平台筛选出黄芪中的有效成分和相关靶标，使用GeneCards、OMIM网站数据库在线搜索出DNP的疾病相关靶标，取疾病和药物相同靶标交集，再利用Cytoscape 3.8.2构建药物-效应成分-疾病-靶标相互作用网络，进行拓扑学分析；从Uniprot数据库中获取靶点蛋白的基因名称，利用STRING在线数据库进行靶点蛋白与蛋白互作（Protein-protein interaction，PPI）网络分析；再进行GO功能分析和KEGG通路功能富集分析，推断黄芪减少DNP的机制是否和Akt1/mTOR自噬通路相关，再利用黄芪干预糖尿病肾病动物模型探讨其作用机制是否和预测的一致。结果 黄芪中20种核心化合物有作用靶点174个，DNP相关靶标有1862个，交集靶标有98个，关键效应分子有10个。PPI图显示黄芪发挥效应的目标蛋白主要是AKT1、VEGFA、IL6、CASP3、MAPK1、JUN等。GO分析黄芪药效主要与细胞因子受体结合及其活性、核受体活性、转录因子活性等有关，KEGG分析表明黄芪药效基础主要作用与糖尿病并发症中AGE-RAGE、MAPK、PI3K-Akt等信号通路有关。动物实验显示黄芪能明显改善糖尿病肾病的大鼠的肾功能，尤其改善蛋白尿指标，通过上调足细胞Nephrin蛋白保护了肾小球滤过屏障，减少了蛋白尿的产生（P < 0.05），同时下调了Akt1、总mTOR及其mRNA表达（P < 0.05），从而增强了肾足细胞的自噬活性，也起到减少DNP的作用。结论 网络药理分析显示黄芪可能通过多靶点效应发挥减少DNP作用，潜在的分子机制和Akt1/mTOR自噬通路有关，再经过实验研究说明Akt1/mTOR自噬通路是黄芪减少糖尿病肾病蛋白尿作用机制之一。     

mTOR/Akt/FoxO3信号通路在人参皂苷Rg1抗PC-12细胞OGD损伤的作用

目的:研究人参皂苷Rg1对PC-12细胞缺氧缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)损伤的保护作用,并初步探讨与mTOR/Akt调控FoxO3核浆穿梭相关的可能的分子机制.方法:建立OGD损伤PC-12细胞模型,MTT 法检测OGD对PC-12细胞存活率.人参皂苷Rg110,20,40 μmol·L-1预处理PC-12细胞24h,加OGD损伤,MTT 检测细胞存活率,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放、超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量.Western blot法检测mTOR,p-Aktser473,p-Aktthr308,Akt,p-FoxO3,细胞核、细胞质FoxO3和总FoxO3蛋白表达.结果:OGD作用4～24h显著抑制PC-12细胞增殖,呈时间依赖性.Rg1(20,40 μmol·L-1)预处理24h可显著增加细胞存活率,减少LDH释放,增加SOD活力和降低MDA含量.Rg1可抑制由OGD引起的rmTOR,p-Aktser473表达降低.OGD 6 h可减少FoxO3磷酸化,并促进细胞质FoxO3进入细胞核;预处理Rg1增加FoxO3磷酸化,促进FoxO3进入细胞质.提示Rg1可经由调控mTOR/Akt/FoxO3信号通路抑制PC-12细胞损伤.结论:人参皂苷Rg1可抑制OGD引起PC-12细胞损伤,作用机制可能与激活mTOR/Akt信号通路调控FoxO3核质穿梭密切相关.     

大孔树脂富集新疆啤酒花中总黄酮工艺研究

目的:筛选适合富集新疆啤酒花中总黄酮的大孔吸附树脂并确定纯化工艺参数。方法:以静态吸附下大孔树脂的吸附率和解析率为指标,确定富集总黄酮的最佳大孔树脂,并明确新疆啤酒花中总黄酮的最佳富集工艺。结果:D-101型树脂对新疆啤酒花中总黄酮有良好的富集效果,其具体的工艺参数条件为:上样浓度为0.5g/m L,最大上样量为1.5BV,上样流速为1.0m L/min,洗脱剂为50%乙醇,洗脱剂用量为5BV,洗脱流速为1.0m L/min。结论:采用D-101型大孔吸附树脂可有效富集新疆啤酒花中总黄酮类成分。     

百合知母汤对抑郁模型伴高脂喂养大鼠的影响

目的 观察百合知母汤提取物(Lily-Zhimu extracted substances,L-ZES)对高脂饲料喂养的抑郁模型大鼠的疗效及作用机制。方法 50只雄性SD大鼠随机分为5个组,即K组,正常组;A组,抑郁模型组;B组,抑郁模型百合知母汤给药组;C组,高脂饲养抑郁模型组;D组,高脂饲养抑郁模型百合知母汤给药组。抑郁模型采用慢性不可预见性温和刺激（CUMS）配合孤养诱发。连续造模20周,观察大鼠体重变化,运用旷场实验（the Open Field Test）、强迫游泳实验（the forced swim test）评定大鼠的行为学特征。以酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆谷氨酸（GLU）、五羟色胺（5-HT）的含量。结果 与正常组相比,模型组大鼠的体重增加缓慢、抑郁样行为学特征明显,血清GLU含量升高、5-HT含量降低,差异有统计学意义(P<0.01),实验证明,CUMS配合孤养可致大鼠出现抑郁行为。与单独抑郁模型组相比,配合高脂饲料喂养抑郁模型组大鼠抑郁行为学特征更明显,差异有统计学意义(P<0.01)。两个给药组与相应的模型组相比,给药组能显著对抗抑郁刺激,大鼠的体重增加、行为学特征改善,GLU的含量降低,5-HT升高。结论 高脂饲料对抑郁大鼠的神经递质无明显影响,但是能明显加重老鼠的抑郁行为,百合知母汤提取物有很好的抗抑郁作用,其机制可能与调节抑郁症大鼠的神经递质,降低GLU、升高5-HT有关。     

基于SNP芯片研究PI3K/Akt/mTOR通路上自噬相关基因SNPs与胃癌的关联

目的： 探讨与胃癌发生相关的PI3K/Akt/mTOR通路上新的与自噬相关基因单核苷酸多态性位点（SNPs）,为寻找有价值的胃癌发生相关的分子标志物提供新的依据。方法： 采用1：1配对病例-对照研究的方法。通过KEGG pathway网站和Gene Ontology、Ensemble数据库及HaploView、STRING、Cytoscape软件联合SNP芯片筛选目标SNPs,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）对筛检出来的SNPs位点在来自福建省仙游县的622例胃癌患者和622例健康人群基因组中进行验证。结果： SNP芯片及生物信息学分析筛选出IRS1 rs10205233、PIK3CD rs3934934、PIK3R1 rs706711、PIK3R1 rs706714和AKT1 rs35285446为候选位点。扩大样本验证发现IRS1 rs10205233的多态性变异（C > T）显著降低了胃癌的发病风险[共显性模型、显性模型的OR（95% CI）分别为0.761（0.595,0.975）、0.764（0.601,0.973）]。进一步分层分析,该位点显性模型、隐形模型、共显性模型以及等位基因在贲门癌和非贲门癌人群中均未见统计学差异（P > 0.05）。并未见其他位点与患胃癌风险的关联有统计学意义。对PIK3R1基因2个位点（rs706711、rs706714）的单体型分析也未见统计学差异。结论： IRS1 rs10205233位点与福建省胃癌高发区仙游县的胃癌发生存在关联,T等位基因可能是胃癌发生的一个遗传保护因素。     

TWIST2通过调控FGF21介导的AMPK/mTOR通路诱导卵巢癌细胞氧化应激和凋亡

目的 探究TWIST2对卵巢癌细胞氧化应激和凋亡的作用及相关机制.方法 收集2018年6月至2019年10月在山东省妇幼保健院进行治疗的30例卵巢癌患者的癌组织和癌旁组织,将pcDNA3.1-TWIST2质粒(TWIST2组)和pcDNA3.1阴性对照质粒(阴性对照组)分别转染卵巢癌细胞(SK-OV-3和HO-8910...