桂枝汤对胃肠运动双向调节作用的实验研究 V．对血管活性肠肽含量的影响

桂枝汤可拮抗新斯的明性胃肠功能亢进大鼠的血液、下丘脑、十二指肠和空肠血管活性肠肽（VIP）含量的降低，对胃窦VIP含量无影响；也可使阿托品性胃肠运动机能受抑大鼠的VIP含量降低，并使之趋向正常；对正常大鼠上述组织和血液中VIP含量无明显的影响。提示本方对胃肠运动机能的双向调节机理之一可能是通过调节中枢下丘脑、血液、胃肠局部组织VIP含量有关。     

Rb基因导入对膀胱癌细胞生长的抑制作用

由于免疫原性,鼠源性单克隆抗体在人体疾病治疗方面受到限制,运用基因重组技术,将抗体轻链、重链可变区基因连接,构建单链Fv(ScFv)基因.表达制备ScFv片段,由于其分子小,免疫原性弱,有潜在应用前景.本实验将获得的抗人肺癌单克隆抗体轻重链可变区基因,通过Linker基因序列连接并克隆至pIg20表达载体,表达制备抗人肺癌scFv融合蛋白.现报道如下.l 材料与方法1.1 抗人肺癌单克隆抗体3D_3(McAb3D_3)重链可变区基因(VH)克隆至表达载体pIg20,以SmaⅠ,XbaⅠ分别双酶切VH及pIg20质粒,以粘末端方式,将SmaⅠ-VH-Xba片段连接到pIg20载体,连接产物电穿孔法转染BL21菌,筛选鉴定.阳性子命名为pIgVH.1.2 将McAb3D_3轻链可变区基因(VL)克隆至pIgVH,以BgLⅡ、NcoⅠ分别消化中pIgVH及VL,以粘     

ET、CGRP对天麻钩藤饮治疗阴虚阳亢型原发性高血压疗效的评估

用天麻钩藤饮治疗阴虚阳亢型原发性高血压，观察治疗前后的血浆内皮素（ＥＴ）、降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）水平。结果：ＥＴ、ＣＧＲＰ、ＥＴ／ＣＧＲＰ与血压呈相关性；与血压的改善同步。ＥＴ、ＣＧＲＰ对治疗效果具有评估价值     

先天性HCMV感染胎鼠大脑皮层ET-1 mRNA的研究

目的　对先天性人巨细胞病毒 (HCMV)感染的胎鼠大脑皮层内皮素 1(ET 1)mRNA进行定性及定量分析 ,探讨先天性HCMV感染致脑损害的机制 ,为临床防治提供一种有价值的手段。方法　在建立HCMV先天性中枢神经系统 (CNS)感染胎鼠模型的基础上 ,用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)测定受不同病毒剂量感染的胎鼠大脑皮质ET 1mR NA ,并用地高辛标记的ET 1寡核苷酸探针对大脑皮层细胞印片进行原位杂交以检测相应mRNA及胞内定位 ,并同步进行病毒分离和病理学检查。结果　病毒分离结果显示 ,在脑组织的上清液中HCMV分离阳性 ;病理学研究证实受染胎鼠大脑皮层表现为侵袭性脑膜炎性改变 ,并在神经细胞内发现特征性核内嗜碱性包涵体 ;受染胎鼠大脑皮层内ET mRNA增加 ,以 1 0ml和 0 5ml组为显著 (P<0 0 0 1) ,而 0 2 5ml组与正常对照组比较差别无显著性。原位杂交结果证实 ,ET 1mRNA主要存在于大脑皮层的胶质细胞中。结论　HCMV可经小鼠胎盘垂直传播至胎鼠脑组织。受染胎鼠大脑皮层ET 1mRNA明显增加 ,且这种结果与所接种的病毒量存在量效关系。ET 1mRNA主要存在于大脑皮层的胶质细胞中可能表明ET 1可作为一种神经调节肽以旁分泌和自分泌方式影响神经组织的功能 ,参与HCMV先天性感染脑损害的过程     

奥曲肽治疗急性胰腺炎30例临床观察

目的探讨奥曲肽治疗急性胰腺炎的疗效。方法将60例急性胰腺炎患者随机分成2组,对照组给予常规治疗,治疗组在对照组治疗的基础上加用奥曲肽治疗。结果治疗组在治疗72h后腹痛缓解、腹痛消失及血淀粉酶降至正常的例数比对照组显著增多(P<0.05);症状、体征及血淀粉酶恢复正常所需时间比对照组缩短(P均<0.01)。结论奥曲肽治疗急性胰腺炎疗效确切,值得推广应用。     

大肠杆菌T蛋白PDH结构域的高效表达纯化与活性测定

 目的构建高效表达菌株,以大量表达大肠杆菌T蛋白的预苯酸脱氢酶(PDH),为研究T蛋白双功能结构域CM和PDH的相互协同作用以及T蛋白抑制剂对其影响提供活性蛋白材料。方法利用pGEX高效融合表达系统将PDH与谷光甘肽疏基转移酶(GST)编码序列在表达宿主BL21实现高效表达,并利用对GST具有亲和作用的GlutathioneSepharose4B琼脂糖珠进行亲和层析以对其分离纯化。结果表达产物达菌体总蛋白的40%,可溶性目的产物得量为240mg·L^-1,利用亲和层析法纯化后纯度达92.5%,GSTPDH融合蛋白的PDH的比活为38U·mg^-1。结论本法成功构建高效表达PDH菌株,表达量高,纯化度高,GST-PDH酶活性正常,为进一步研究奠定基础。     

通脉胶囊治疗非ST段抬高急性冠脉综合征临床研究

急性冠脉综合征（acute coronary syndrome,ACS）是目前心血管疾病的研究热点之一.现已证实,血管内皮损伤及血栓形成是急性冠脉综合征的主要病理基础.血浆内皮素-1（endothelinl,ET-1）、血浆降钙素基因相关肽（calcitonin gene related peptide,CGRP）为血管内皮细胞释放的一组调节血管舒张与收缩作用的生物活性因子,它们在循环血中异常,提示血管内皮功能失调,其在ACS发病过程中起重要作用.笔者自2001年3月～2003年12月应用通脉胶囊加常规西药治疗非ST段抬高ACS（血瘀证型）患者30例,临床取得了良好疗效.并同时设立了对照组,应用常规西药治疗作对比观察,检测治疗前后血浆ET-1、CGRP浓度,旨在探讨通脉胶囊对非ST段抬高ACS（血瘀证型）患者血浆ET-1、CGRP的影响及治疗意义.     

肿瘤特异性凋亡基因对人黑素瘤细胞凋亡诱导作用的机制研究

为研究肿瘤特异性凋亡基因(apoptin gene)在诱导人黑素瘤细胞A375发生凋亡时，c-Jun氨基末端激酶(JNK)信号通路在细胞发生凋亡中的作用，用含有apoptin基因的真核表达载体瞬间转染体外培养的人黑素瘤细胞A375；采用流式细胞仪、蛋白印迹法(Western blot)、锥虫蓝染色法及RT-PCR等方法研究其在不同时间对人黑素瘤细胞A375诱导凋亡的作用。结果表明，apoptin基因瞬间转染的人黑素瘤细胞A375可出现明显的细胞凋亡；而且凋亡细胞的数量与apoptin的转染时间有关；凋亡细胞内磷酸化型JNK蛋白随凋亡细胞数量的增加而增多，而非磷酸化型JNK蛋白表达无明显变化。结论：JNK信号通路的活化可能在apoptin诱导肿瘤细胞凋亡过程中发挥作用。     

姜黄素对Aβ25-35诱导去血清培养PC12细胞周期变化与凋亡的影响

目的：探讨姜黄素（Curcumin，Cur）对β-淀粉样肽（25—35）[βamyloid peptide-（25-35），Aβ25-35]诱导体外去血清培养的PC12细胞周期变化与细胞凋亡的影响。方法：种人培养瓶或板的PC12细胞贴壁后用常用的去血清培养法使细胞同步于G0期，用MTT比色法分析细胞存活率；流式细胞仪检测分析细胞周期的改变与凋亡的时间关系，Hoechst33258-PI荧光染色观察细胞核凋亡的形态学改变；DNA电泳观察细胞凋亡时特异性梯状条带（DNA—Ladder）；结果（1）用终浓度分别为0～20μmol／L的姜黄素（Cur）处理去血清培养PC12细胞24h，     

鲨肝活性肽S-8300免疫调节作用的研究

研究鲨肝活性肽S-8300对免疫抑制小鼠的免疫调节作用。方法：观察鲨肝活性肽S-8300对环磷酰胺致免疫抑制小鼠血清溶血素、溶血空斑形成及血清IL-2含量的影响。结果：鲨肝活性肽S-8300可显著促进免疫抑制小鼠溶血素、溶血空斑形成及血清IL-2水平增高．结论：鲨肝活性肽S-8300对环磷酰胺致免疫抑制小鼠有较好的免疫调节作用。