脑钠肽在心血管疾病中的应用

脑钠肽(B-type natriuretic peptide,BNP)是在20世纪80年代由Sudoh等[1]首先提出,由于其最先从猪脑中分离,所以又称为脑钠素。它是由心室分泌的一种多肽,随室壁应力的增加而分泌增多。本文就脑钠肽在心血管疾病的诊断、治疗和预后中的意义做一综述。1BNP的来源、结构及生物学特性BNP与心房利钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)均属于心脏利钠肽类,广泛分布于脑、心脏、肺、骨髓等组织器官,其中以心脏含量最高。人类BNP的基因位于人类第1号染色体短臂远端,由3个外显子和2个内含子组成,反向转录成1900个核苷酸组成的cDNA,再合成220…     

高浓度葡萄糖诱导脂肪细胞产生胰岛素抵抗

目的 观察不同浓度的葡萄糖对脂肪细胞葡萄糖转运的影响,探讨建立胰岛素抵抗细胞模型的方法。方法 首先诱导3T3-L1和SW872两株前脂肪细胞分化,然后分别用25.50mmol/L的葡萄糖刺激分化成熟的脂肪细胞．采用2-Deoxy[3^H]-D-glucose掺入法测定脂肪细胞葡萄糖转运,同时测定相应的细胞总蛋白,以每毫克蛋白的衰变数来反映葡萄糖转运的情况。结果 ①胰岛素明显刺激3T3-L1和SW872脂肪细胞的葡萄糖转运．与基础葡萄糖转运相比．差异有显著性意义（P＜0.01）.25、50mmol/L葡萄糖均可影响3TS-L1和SW872脂肪细胞的葡萄糖转运，与基础葡萄糖转运相比，差异有显著性意义（（P＜0.01））②25、50mmol/L。葡萄糖均可影响3T3-L1脂肪细胞的基础葡萄糖转运（P〈0．05）．并减弱胰岛素诱导的葡萄糖转运（P〈0．01）．但高糖组之间差异无显著性意义，③25、50mmol/L葡葡糖对SW872脂肪细胞的基础葡萄糖转运无明显影响（P〉0．05）．但能减弱胰岛素诱导的葡萄糖转运（P＜ 0．01）。结论 高糖可以诱导3T3-L1和SW872两株脂肪细胞产生胰岛素抵抗．为深入研究胰岛素抵抗的发生、发展提供了新的细胞模型。     

离子转运蛋白抑制-听觉实验研究NKCC1和Na,K-ATPase在耳蜗K+循环中的作用

目的通过离子转运蛋白抑制-听觉功能实验,探讨NKCC1和Na,K-ATPase在内耳K 循环及听觉中的作用,并验证耳蜗K 循环模式与听觉的关系。方法应用NKCC1抑制剂呋塞米(Furosemide)和Na,K-ATPase抑制剂乌巴因(Ouabain),对CBA/CaJ和Castel两种鼠系进行离子转运蛋白抑制-听觉实验,检测小鼠的听觉脑干反应(ABR)阈值。结果Furosemide 0.2 mg/g注射30 min后,小鼠的ABR阈值明显升高,与正常对照组比较差异有极显著性意义(P<0.01)。Ouabain 0.003μg/(g.d)连续注射5 d后,小鼠的ABR阈值也明显升高,与对照组相比较差异有极显著性意义(P<0.01)。而先后注射Ouabain和Furosemide,ABR阈值虽较正常对照组升高(P<0.05),但低于单独注射Ouabain组(P<0.05)和明显低于单独注射Furosemide组(P<0.01)。停药3 d后,小鼠的ABR阈值均恢复到接近正常对照组的阈值(均P>0.05)。结论在小鼠实体中验证了NKCC1和Na,K-ATPase是耳蜗K 循环的关键离子转运蛋白,其中任一功能失衡均可影响听觉功能。     

人β防御素-2基因在SPC细胞中的转染表达

目的合成人β防御素-2(hum anβ-defensin-2,hBD-2)基因并构建其真核表达载体,转染SPC细胞,检测其表达,明确hBD-2重组载体的表达活性,为hBD-2基因转染和表达的研究奠定基础。方法根据Genebank中的hBD-2结构基因序列设计合成三条引物,用PCR延伸扩增的方法合成hBD-2基因,克隆入真核表达载体pLXSN;通过脂质体转染法将pLXSN-hBD-2导入SPC细胞,采用W estern-b lot法检测hBD-2的表达。结果经凝胶电泳及测序分析,证实合成的基因与原序列一致,并成功克隆到真核表达载体pLXSN上,所构建的真核表达重组载体pLX-SN-hBD-2转染SPC细胞后呈现有效表达。结论成功构建了PCR合成的hBD-2基因真核表达重组载体pLXSN-hBD-2,通过基因转染的方法导入SPC细胞并获得表达hBD-2,为进一步的动物转基因抗感染实验研究提供了依据。     

氨基端前脑钠肽和老年人左心室功能不全

目的评价氨基端前脑钠肽（NT-proBNP）在诊断老年人左心室功能不全（LVD）的价值.方法用电化学发光免疫学方法（Elecsys,罗氏诊断）检测102例LVD老人和98名健康老人（对照组）血NT-proBNP,分析各种临床因素与NT-proBNP之间的关系.结果正常对照组NT-proBNP（中位数）为53.25 pg/mL,与左心室射血分数（LVEF）、血肌酐的关系密切,和年龄、性别无关.LVD老人NT-proBNP随着心功能分级（纽约心脏学会NYHA）的增加而升高.NT-proBNP还同LVEF呈良好的负相关（r=-0.735,P＜0.001）,不同LVEF的各组LVD患者间NT-proBNP水平有显著差异（P＜0.001）.多因素线性回归分析发现,NYHA心功能分级和LVEF的存在对NT-proBNP有影响.NT-proBNP探测老年人LVD的受试者工作特性曲线下面积（AUC）为0.97,界值117.6 pg/mL的灵敏度91.1%,特异度95.9%.结论NT-proBNP水平是确定老年人LVD的良好指标,与心力衰竭的严重程度以及左心室功能密切相关.     

奥曲肽注射液治疗食管-胃底静脉曲张破裂出血的有效性和安全性

目的比较国产与进口醋酸奥曲肽注射液治疗肝硬化食管胃底静脉曲张破裂出血的有效性和安全性。方法采用多中心、随机、单盲、平行对照实验。入选131例患者,实验组68例,用国产醋酸奥曲肽;对照组63例,用进口奥曲肽(善宁)。2组用药方法和药量相同,给予首剂0.1 mg静脉推注,随后以0.6 mg溶于5%葡萄糖500 mL中,通过静脉输液泵以42 mL/h(50μg/h)的速度持续静脉滴注,1次/12 h。24 h内有效者,再连续使用4 d。用药过程中详细观察记录血压、脉搏、输血量;定期抽吸胃液,记录胃液量及颜色;进行实验室及心电图检查;严密观察记录不良反应。结果2组治疗前基线资料差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。6、122、4 h止血率、再出血率、平均输血量、不良事件发生率2组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论国产醋酸奥曲肽注射液治疗食管胃底静脉曲张出血的疗效与安全性和进口奥曲肽相当,是治疗食管胃底静脉曲张出血有效、安全的药物。     

腹膜后CO_2充气对脑血流及血管活性肽的影响

目的探讨以CO2充气为背景的手术中脑血流及血浆血管活性肽的变化及意义。方法选择19例接受后腹腔镜手术患者,ASAⅠ-Ⅱ级。分别于充气前、充气后30 min6、0 min1、20 min及停止充气30 min记录二氧化碳分压(PaCO2)、大脑中动脉血流速度(Vm)、血流速度变化百分比(Delt)、脉动指数(PI),并采集静脉血观察内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)、神经肽Y(NPY)、神经降压素(NT)在各时间点的变化。结果与充气前相比,各时间点PaCO2、Vm、Delt均有明显上升,PI下降,并有统计学意义,充气结束后,各值趋于正常。ET、CGRP、NPY、NT充气后均有上升,并在不同的时间点分别有显著或非常显著差异。结论以CO2充气为背景的后腹腔镜手术,升高的PaCO2及血浆血管活性物质共同作用,使脑血量处于增加状态。     

绿色荧光蛋白和酪氨酸羟化酶在骨髓基质细胞中的表达

目的研究反转录病毒介导的绿色荧光蛋白(EGFP)基因和酪氨酸羟化酶(TH)基因在原代培养的骨髓基质细胞(bMSCs)中的表达情况。方法体外分离培养大鼠四肢骨的bMSCs,原代培养8~10 d后,同时利用含EGFP和TH基因的反转录病毒上清依次转染bMSCs并进行抗性筛选,7~10 d可得到稳定表达EGFP的bMSCs,在稳定转染EGFP后10 d进行TH病毒上清的转染,7~10 d可得到稳定表达TH和EGFP的bMSCs。结果原代培养bMSCs 3~4 d后生长至70%~80%汇合,病毒转染EGFP后第2天,细胞呈现弱荧光,经G418筛选2~3 d后出现阳性细胞,约8~10 d生长融合,阳性率60%~70%,第2~5代阳性细胞比率无明显变化。TH阳性率也达60%以上。结论利用反转录病毒载体可有效地将EGFP和TH基因转至bMSCs中,并能在体外稳定表达传代。这种表达EGFP和TH的bMSCs对于研究bMSCs的体内迁移分化及帕金森病(PD)的基因治疗具有重要意义。     

三七皂甙对急性脑梗塞患者血浆和脑脊液MCP-1、ET含量的影响

研究三七皂甙对急性脑梗塞患者血浆和脑脊液单核细胞趋化因子（MCP 1）和内皮素（ET）水平在不同时段变化的影响。方法：用酶联免疫法和放射免疫法测定MCP 1和ET在不同时间血浆和脑脊液含量的变化情况，及应用三七皂甙治疗后的影响。结果：脑梗塞患者血浆MCP 1和ET的水平明显增加，三七皂甙组各时间段MCP 1和ET的含量与对照组比较有显著性差异（P<0.05）,MCP 1在第3天达到峰值，第5天开始下降。ET在第3～5天达峰值，之后逐渐下降，第10天的含量仍高于第1天。脑梗塞48?h后患者脑脊液MCP 1和ET的含量亦明显升高。应用三七皂甙后血浆MCP 1和ET的水平均显著低于对照组（P<0.01）。结论： 脑梗塞后血浆和脑脊液MCP 1和ET水平明显增高（P<0.05）；MCP 1和ET的变化有一定相关性（r=0.852）。三七皂甙对脑梗塞后血浆和脑脊液MCP 1和ET的表达有部分抑制作用，这可能是三七皂甙减轻脑梗塞后缺血缺氧的分子机制之一。     

C肽、血脂水平与2型糖尿病下肢血管病变的关系

目的探讨2型糖尿病患者下肢血管病变的危险因素。方法应用美国GE公司LOG-IQ700型超声诊断仪,对2型糖尿病患者131例下肢动脉进行检测,将下肢血管病变组74例与非下肢血管病变组54例进行对照,记录患者年龄、病程、空腹及餐后血糖、糖化血红蛋白、血脂、空腹及餐后C肽。结果糖尿病下肢血管病变组患者年龄大、病程长、LDL-C明显升高、空腹及餐后C肽明显降低。结论年龄、病程、高血糖、高血脂、低C肽水平是糖尿病下肢血管病变的危险因素,糖尿病神经病变与大血管病变正相关。