共培养诱导小鼠ES细胞向软骨细胞分化的初步研究

目的 探讨软骨共培养体系诱导小鼠ES细胞向软骨细胞分化的可行性.方法 GFP标记的小鼠ES细胞初步分化为EB后,将EB消化为单个细胞,同猪关节软骨细胞按一定比例(1∶3)昆合后接种于PGA材料,体外培养1周后植入裸鼠皮下3周取材.对照组为EB细胞接种组及软骨细胞接种组.取材后行连续冰冻切片,切片分别做荧光拍照,HE染色及甲苯胺蓝染色.结果 组织学结果显示,EB细胞接种组形成畸胎瘤;软骨细胞对照组形成软骨组织;实验组形成软骨组织和畸胎瘤的混合体.甲苯胺蓝染色结果和荧光照片对照结果显示,部分软骨组织GFP阳性,由小鼠ES细胞分化而来.结论 软骨共培养体系可以诱导小鼠ES细胞向软骨细胞分化,但得到的软骨组织不纯,混有畸胎瘤组织.     

成体干细胞移植与肾脏疾病

近年来，随着再生医学的兴起，干细胞移植成为医学领域的研究热点之一。骨髓细胞与肾脏祖细胞的共同起源，提示它们可能具有相似的分化能力：研究发现，骨髓细胞及其外周血干细胞可以分化成各型肾脏细胞，包括系膜细胞、内皮细胞、上皮细胞等。因此，干细胞移植为对各种肾脏疾病的预防及治疗提供了新的思路、本文就骨髓移植及外周血干细胞移植在肾脏疾病中的预防及治疗性研究作一综述。     

壳聚糖神经干细胞复合物修复大鼠完全性脊髓损伤的组织学观察

目的：探讨壳聚糖与神经干细胞复合物修复成年SD大鼠完全性脊髓损伤的可行性。方法：制作大鼠脊髓完全缺损模型，在形成的缺损中植入壳聚糖与神经干细胞复合物(实验组)，或只植入壳聚糖(对照组)，或不加任何材料(空白组)，术后2、4、8周灌注取材，观察结果。结果：壳聚糖与神经干细胞复合物在植入SD大鼠脊髓完全缺损模型后，能桥接缺损两端脊髓；其内的神经干细胞能存活、迁移并分化成多种形态的神经组织细胞，并诱导神经轴突向复合材料内生长。结论：壳聚糖与神经干细胞复合物有可能桥接并修复大鼠脊髓完全缺损性损伤。     

干细胞经脑脊液移植后在损伤脊髓的早期变化观察

目的观察神经干细胞经脑室注射后在损伤脊髓的早期动态变化。方法取转录有绿色荧光蛋白（GFP）基因的孕16天SD鼠胚脑海马组织，培养成神经干细胞球，注射到损伤脊髓鼠第四脑室（实验组），观察其在脊髓的存活、分化状况。结果移植细胞在脊髓表面形成细胞团。分布于损伤区头侧。细胞团的面积背侧小于腹侧；数目背侧多于腹侧。这种分布和增殖形式见于损伤脊髓正常部分和无损伤脊髓（对照组）。1周时细胞侵入损伤区，GFAP表达呈阳性。2～3周时与宿主细胞良好整合。结论移植细胞通过脑脊液能广泛分布于脊髓表面。保持黏附、增殖和分化能力。并可迁移、整合到损伤脊髓组织中。     

干细胞与蛋白质组学

蛋白质组学具有规模大和高通量的特点，其核心技术双相电泳、质谱分析和蛋白质组信息学的迅速发展，可完成极其复杂的蛋白质功能和细胞因子变化的研究。干细胞可定向分化为各种细胞和组织器官，其定向分化过程中有众多的蛋白质、细胞因子的参与和消失，应用蛋白质组学研究干细胞分化过程中极其复杂的蛋白质变化，对探索干细胞的分化机制和应用有重大意义。     

羊水中葡萄糖含量及其临床意义

1　羊水的生成　　羊水的形成比较复杂 ,不同的妊娠时期 ,羊水的量和成分都不同。在妊娠早期 ,羊水是母体血清经胎膜进入羊膜腔的透析液。进入中期妊娠后 ,胎儿尿液经膀胱排入羊膜腔 ,使羊水渗透压逐渐降低 ,尿酸和肌酐却逐渐升高 ;但另一方面 ,胎儿又通过吞咽羊水以取得羊水量的平衡。步入晚期妊娠以后 ,羊水的主要来源为尿液和肺液 ,后者为前者的一半。羊水的交换、运转主要通过胎尿的排出和胎儿吞咽羊水达动态平衡。胎盘胎儿面的羊膜及其他羊膜面和脐带虽经实验证明也有水和小分子物质的交换 ,但量甚微[1] 。2　羊水量2 .1　羊水量随妊娠…     

不同浓度5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记山羊骨髓基质干细胞的体外研究

Objective To explore the feasibility of labeling and tracing in vitro goat bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs) by bromodeoxyuridine (BrdU) on the basis of investigation of its optimal concentration, incubating time and cytotoxicity. Methods A healthy goat, aged 10 months old, male, weighing 32 kg, was used in this study. Bone marrow was aspirated. BMSCs were isolated and cultured using the adherence method in vitro. The fourth passage of BMSCs (P4) were incubated with BrdU at 5, 10, 15, 20 μmol/L as 5, 10, 15, 20 μmol/L BMSC groups. Cells were not labeled by BrdU as negative control. The following parameters were measured: induction, differentiation and determination of goat BMSCs; the optimal mass concentration and incubation time of 5-BrdU labeling; cell positive rate at 12, 24, 48 and 72 hours in each group using immunofluoreseenee; the cell survival rate after various concentrations of BrdU ladling by trypan-blue exclusion. Results The morphology of the primary and passage goat BMSCs was fusiform in shape. Goat BMSCs could differentiate into osteoblasts and chondrocytes following induction. BMSC nucleus showed green fluorescence under fluorescence microscope after being labeled by BrdU. The mean labeling rate increased with the increase in the concentration and incubation time of BrdU, and reached to (93.32± 3.25)% after incubation in 15 μmol/L, BrdU for 48 hours. There were no significant differences between 15 μmol/L BrdU for 72 hours, 20 μmol/L BrdU for 48 hours and 72 hours (P > 0.05), or between the other groups or time points (P < 0.05). The labeling rate of the blank control group was 0. The cell survival rate was all above 90% (P > 0.05). Conclusions BrdU can be used as a labeling marker for goat BMSCs. When the concentration is 15 μmol/L and the incubation time is 48 hours, the optimal labeling effect can be achieved. Goat BMSCs labeled with BrdU is of high efficiency and safety.     

干细胞移植与黏膜屏障损伤的机制及诊断

造血干细胞移植预处理必然会引起黏膜病变,由于此类疾病本质上是毒性作用的结果,而且病理生理机制极其复杂,不仅口腔乃至整个消化道均有临床症状,故称之为黏膜屏障损伤.口腔黏膜屏障损伤的病理模式包括四个阶段(即炎症、黏膜损伤、溃疡、治愈阶段).黏膜屏障损伤的产生和病程受多种因素的影响,口腔黏膜屏障损伤模型大体上也适用于肠道黏膜屏障损伤.我们现将黏膜屏障损伤的病理生理、临床表现以及其评价方法进行讨论.     

有关瘢痕形成机制研究：不同皮肤成纤维细胞对羊水的反应

目的：研究正常皮肤和胎儿皮肤成纤维细胞体外培养时对羊水的不同反应，探讨瘢痕形成的机制。方法：采用成纤维细胞体外培养技术，比较正常皮肤成纤维细胞与胎儿皮肤成纤维细胞对羊水的不同反应。结果：羊水对胎儿皮肤成纤维细胞无明显影响，刺激正常皮肤的成纤维细胞。结论：体外培养的正常皮肤成纤维细与胎儿皮肤成纤维细胞生长率相同，对羊水的反应不同。     

人胰腺癌干细胞差异性基因的表达

目的 分选、鉴定人胰腺癌干细胞,运用基因芯片技术分析其差异性基因的表达.方法 运用流式分选技术分选胰腺癌干细胞(CD24+CD44+ESA+),NOD/SCID鼠移植瘤试验进行肿瘤干细胞特性鉴定.采用Affymetrix U133 plus2.0人类全基因组表达谱芯片对胰腺癌干细胞和非干细胞进行差异基因筛选.结果 分选得到人胰腺癌CD24+CD44+ESA+亚群细胞,占所有细胞的0.8%;5×103个CD24+CD44+ESA+细胞就能成瘤(2/4),而阴性细胞1×105才能成瘤(1/4);CD24+CD44+ESA+具有一定的自我更新和分化能力.基因芯片杂交获得6553(11.99%)条差异基因,胰腺癌干细胞中5255(9.61%)条上调表达,1298(2.37%)条下调表达.其中差异基因涉及细胞凋亡、细胞周期、代谢、细胞线粒体结构和耐药等多个方面.结论 胰腺癌于细胞具有自身特征性基因表达谱,为进一步从干细胞层面研究胰腺癌发病机制及靶向治疗奠定基础.