rAAV-Slug-siRNA载体的构建及其抗胰腺 癌的实验

 目的构建并制备携带目的基因的rAAV-EGFP-Slug-siRNA（Slug-siRNA）病毒载体,探讨Slug干扰抗 胰腺癌作用。方法首先构建pDC316-EGFP-Slug-siRNA质粒,以PCR鉴定正确的pDC316-EGFP-Slug-siRNA克隆 为模板扩增EGFP-Slug-siRNA片段,EcoRⅠ和SalⅠ双酶切回收PCR产物; 酶切pSNAV2.0-lacz-α载体质粒, 并与上述产物进行连接;转化感受态大肠杆菌DH5α,得到重组质粒pSNAV2.0-EGFP-Slug-siRNA,酶切和测 序对其进行鉴定。建立载体细胞株BHK/Slug-siRNA, 大规模制备rAAV2-EGFP-Slug-siRAN并对其纯化、鉴 定和滴度测定。将体外培养的胰腺癌细胞株AsPC-1转染Slug-siRNA和pSNAV2.0-EGFP空载体。Western blot及RT-PCR方法鉴定转染前后AsPC-1细胞内PUMA及Slug蛋白及mRNA表达,MTT比色法检测细胞存活率, TUNEL检查细胞凋亡。结果携带编码靶向Slug的小发夹状干扰RNA序列的腺相关病毒载体质粒pSNAV2.0- EGFP-Slug-siRNA,经PCR、酶切和测序鉴定,质粒构建正确。将构建成功的载体质粒与重组Ⅰ型单纯疱疹 病毒HSV1-rc/ΔUL2共转染包装细胞BHK-2,成功复制和包装出重组腺相关病毒Slug-siRNA,经检测目的片 段插入成功,滴度为9.23×1010(puf)。Slug-siRNA有效抑制AsPC-1细胞内Slug表达,抑制体外细胞增殖 ,促进细胞凋亡,同时,伴随着Slug表达的下降,细胞内PUMA表达明显增加。结论成功制备出高滴度携带 目的基因的Slug-siRNA病毒载体。干扰Slug表达抑制胰腺癌细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能通过解 除Slug对PUMA基因的抑制有关。     

免疫相关基因Tap2、HLA-DR9与新疆哈萨 克族食管癌的交互作用

 目的探讨Tap2379、Tap2665基因多态性、HLA-DR9等位基因频率与新疆哈萨克族(简称哈族)食管癌 的相关性。 方法采用1∶2配比的病例对照研究,收集哈族食管癌194例,健康对照388例,运用序列特异 性引物聚合酶链反应 限制片段长度多态技术(PCR-RFLP)检测Tap2379、Tap2665基因多态性,序列特异 性引物聚合酶链反应（PCR）检测HLA-DR9等位基因频率,采用χ²检验、多因素条件Logistic回归进行统 计分析。结果病例组与对照组间比较,Tap2379基因型差异有统计学意义(χ²=18.247,P<0.05,OR=2.347 ,95%CI：1.587~3.471);Tap2665基因型差异无统计学意义(χ²=2.175,P>0.05,OR=1.317,95%CI： 0.919~1.899);HLA-DR9等位基因频率差异有统计学意义(χ²=13.443,P<0.05,OR=2.343,95%CI： 1.486~3.693)。多因素条件Logistic回归示：Tap2379位多态性分布、HLA-DR9等位基因阳性率、食管或 胃疾病史在哈萨克族食管癌和健康对照间存在差异。交互作用示：Tap2379位多态性与HLA-DR9等位基因 协同作用时可使食管癌的发生危险性增加到5.302倍(95%CI：2.363~11.900)。结论Tap2379位Val(G)→ lla(A)转变、HLA-DR9等位基因阳性为哈族食管癌的危险因素,两者对食管癌的发生存在效应修饰作用。     

缬沙坦和乌司他丁联合用药对肝缺血再灌注 损伤的保护效应

 目的观察缬沙坦和乌司他丁联合用药对原发性肝癌合并肝硬化门静脉高压患者肝脏缺血再灌注损伤的保护作用。方法30例肝癌行肝叶切除术患者,随机分为对照组、乌司他丁组、缬沙坦和乌司他丁联合用药组,每组10例。乌司他丁组按10 000 u／kg于麻醉诱导后切皮前加入5%葡萄糖盐水100 ml中静脉滴注;联合用药组术前给予缬沙坦80 mg每天一次,口服一周至术前,术中用量及用法同乌司他丁组。对照组5%葡萄糖盐水100 ml静脉滴注。三组患者分别在肝门阻断前、肝门阻断末及肝门再开放60 min时抽取静脉血测TXB2和6-keto-PGF1α浓度,术前、术后1天、术后3天、术后5天抽取静脉血,行血浆谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素的测定。结果30例肝癌患者均顺利完成切除术,患者血浆TXB2、6-keto-PGF1α、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、总胆红素均增加（P<0.05）,乌司他丁组和联合用药组增加的幅度低于对照组（P<0.05）,但联合用药组保护效应与单用乌司他丁组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论乌司他丁对邻近肝门的原发性肝癌合并肝硬化门静脉高压患者肝脏缺血再灌注损伤具有明显的保护作用,联合使用缬沙坦的预期效果尚需进一步研究。     

应用千伏锥形束CT个体化确定肺癌放疗内 在靶体积的研究

 目的分析个体化确定肺癌放疗ITV的必要性和应用千伏锥形束CT（kVCBCT）个体化确定肺癌放疗ITV 的可行性。方法选择14例周围型肺癌患者进入研究。每位患者行1次常规定位CT扫描和3次kVCBCT扫描。根 据常规定位CT勾画的可见肿瘤病灶为GTV,以GTV为基础,根据肿瘤所在肺叶的位置,外扩固定边界形成 IGTV,称之为IGTV-p;根据kVCBCT勾画的可见肿瘤形成IGTV-c。GTV、IGTV-p和IGTV-c分别外扩5 mm,形 成CTV、ITV-p和ITV-c。比较ITV-p和ITV-c的体积;ITV-p叠ITV-c体积;比较CTV和ITV-c的体积;以 COM/SUM比值为参数,评价kVCBCT确定ITV的重复性。结果患者ITV-p和ITV-c的体积分别为（150.1±87.3 ） cc与（88.0±54.3） cc,二者比较,差异有明显统计学意义（P<0.0001）。ITV-p叠ITV-c体积为 （67.1±32.4） cc。CTV与ITV-c比较,二者差异具有统计学意义（P=0.005）;COM/SUM比值为（63.0± 8.2）%。结论根据常规定位CT,“群体化”确定肺癌放疗ITV存在不足,锥形束CT可以用于个体化确定肺 癌放疗的ITV。     

关于关键词的有关要求

关键词是为了便于编制文献索引、检索和阅读而选取的能反映文章主题概念的词或词组。一般每篇论文选取2～5个关键词。中英文关键词应一致。     

永久埋藏起搏治疗的经验体会

我院自1975年以来,对149例患者行246例次永久起搏埋藏术,介绍如下。     

《白血病·淋巴瘤》2011年第20卷关键词索引

说明：（1）本索引关键词按汉语拼音字母顺序排列;（2）冠有阿拉伯数字、西文字母、西文姓氏的关键词,按其后汉字的拼音排序;（3）文题、作者后括号内数字为期号,最后为起止页。     

《中国口腔颌面外科杂志》投稿须知

为确保稿件质量和杂志编辑工作的规范化,请作者在撰稿及投稿前,仔细阅读本稿约,并严格执行。凡不符合要求者,一律退回     

《中国实用口腔科杂志》关于文章题名的要求

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《中国实用口腔科杂志》关于中英文关键词标引的要求

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