重组人表皮生长因子软膏对烧伤患者血清表皮生长因子浓度的影响

目的:观察不同深度、不同面积烧伤创面对局部外用重组人表皮生长因子(rhEGF)软膏的吸收作用以及对血清EGF浓度的影响。方法:选择烧伤患者41例,局部外用rhEGF软膏治疗,每日换药一次。浅Ⅱ°创面患者于用药前和用药第4,7天;深Ⅱ°创面于用药前和用药后第7,14天,分别取患者静脉血清,采用放射免疫分析法测定患者各时间点血清中EGF浓度。结果:rhEGF软膏在试验浓度范围内,无论用药面积大小和用药时间长短其血清EGF水平均无明显变化,各时间点用药前后EGF血药浓度无显著差异(P>0.05);血清EGF浓度与创面深度和用药面积无明显的相关性。结论:rhEGF软膏局部外用,通过创面吸收的量甚微,体内无蓄积现象。     

HPLC法测定人血清中多索茶碱浓度

目的 :建立测定人血清中多索茶碱浓度的RP HPLC法。方法 :以Techsphere ODS色谱柱为分析柱 ,流动相 :甲醇 水( 312∶4 88,V/V) ,流速为 0 8mL·min-1,检测波长为 2 73nm ,柱温为室温 ;血清样品经甲醇沉淀蛋白离心后进行色谱分析。结果 :本法在 0 75～ 2 0 0 0mg·L-1间线性关系良好 (r=0 9999) ,平均回收率为 99 2 1% ,日内及日间RSD均 <5 % ,最低检测血清浓度为 0 2 5mg·L-1。结论 :该方法快速、准确 ,适合多索茶碱临床药动学研究和血药浓度检测     

重组人白细胞介素11生物学活性测定方法研究

目的建立重组人白细胞介素 11(rhIL 11)生物活性测定方法。方法运用单克隆方法筛选出rhIL 11敏感细胞株T 10 ,采用溴化四唑蓝比色法进行rhIL 11生物活性测定 ,采用四参数方程对测定结果进行计算。结果以世界卫生组织国际标准品作为参照品 ,与美国Genetics公司rhIL 11上市产品NeumegaTM进行测定比较 ,结果显示国内同类产品与其生物活性一致 ,RSD均小于 10 %。结论此方法可用于rhIL 11生物活性测定     

猪胰岛素与重组人胰岛素的高效液相色谱分析

目的鉴别猪胰岛素与重组人胰岛素。方法采用C8、C1 8及常规孔径 (6～ 1 0nm)与大孔径 (30nm)色谱柱用梯度洗脱和等度洗脱对猪胰岛素与重组人胰岛素的分离方法进行研究。结果用梯度洗脱代替英国药典中的洗脱体系能达到相同的分离效果。结论用常规C1 8柱通过梯度洗脱可分离猪胰岛素与重组人胰岛素     

注射用重组改构人肿瘤坏死因子治疗恶性肿瘤Ⅲ期临床观察

目的评价注射用重组改构人肿瘤坏死因子(rmhTNF)与化疗联合治疗恶性肿瘤的有效性及不良反应.方法共入选52例患者,随机分为试验组39例,对照组13例,试验组用rmhTNh 400万u·m-2,im,d1～7,d11～17,同时联合应用化疗药物,21d为1个周期,连用2个周期;对照组联合化疗方案同实验组,但不加用rmhTNh.结果45例患者可评价疗效.试验组33例中有效率为36.36%(12/33);对照组有效率为8.33%(1/12).试验组有效率高于对照组,但两组之间无统计学差异(P=0.070).不同病种疗效分析显示试验组肺癌的有效率44.44%(8/18)高于对照组10%(1/10),而试验组3例头颈部肿瘤患者均有效.与rmhTNh有关的不良反应发生率为72.73%(24/33),主要为轻度注射部位疼痛72.73%(24/33),红肿硬结45.45%(15/33),少数患者出现发热,感冒样症状.结论rmhTNh与化疗药物联合应用治疗恶性肿瘤,显示对肺癌、头颈部肿瘤有较好的疗效,且毒性反应较轻.     

重组人表皮生长因子促进鼻内镜术后术腔上皮化

目的观察重组人表皮生长因子(rhEGF)对鼻内镜手术后术腔愈合的影响.方法对131例(235侧)施行鼻内镜手术分析的Ⅱ型2期、3期患者,随机分为两组,A组应用rhEGF,B组不用,随访4个月以上比较同期两组的治愈率.结果同期治愈率A组显著优于B组(P＜0.05).结论 rhEGF能促进术腔早日上皮化.     

内耳转基因表达的实验研究

目的　了解内耳转基因表达的可行性。方法　将人复制缺陷重组腺病毒基因(Adenoviruses ,Ad ,含大肠杆菌 β 半乳糖苷酶基因LacZ基因 ,Ad5 LacZ)经豚鼠耳蜗蜗窗接种到鼓阶外淋巴后 ,观察在不同时间、不同内耳组织中LacZ基因的表达 (X Gal染色 )及Ad对豚鼠声反应 (听性脑干反应 )、听毛细胞 (扫描电镜 )的影响。结果　Ad介导的LacZ基因在内耳组织中的表达至少可持续 4周 ,其中在螺旋神经节细胞表达稳定 ,Corti器、前庭囊斑、壶腹嵴的毛细胞等也有较强的表达。Ad未对豚鼠声反应 (≤ 80 0 0Hz)造成明显的损伤 ,除耳蜗底回外 ,其余各回未见明显的毛细胞缺失。结论　腺病毒载体可成功地将LacZ基因转导致豚鼠内耳组织中 ,并且未对豚鼠声反应 (低、中频 )及听毛细胞造成明显损伤 ,这对未来的内耳基因治疗研究可能具有重要的参考价值。     

人输卵管蛋白全长cDNA克隆及真核细胞中的表达

目的:克隆人输卵管蛋白(hOviductin)全长cDNA序列,真核细胞中表达,并了解hOviductin是否与大鼠卵母细胞结合。方法:构建人输卵管黏膜上皮细胞cDNA文库,以~(32)P标记的兔输卵管蛋白全长cDNA序列为探针,自文库中筛选hOviductin全长cDNA序列。将获得的hOviductin编码区cDNA序列插入pEGFP-N1真核表达载体,转染HeLa细胞,表达分泌重组的绿色荧光蛋白(EGFP)-hOviductin,并估量其浓度。激光扫描共聚焦显微镜下观察EGFP-hOviductin与大鼠卵巢的卵丘细胞-卵母细胞复合物(COC)或去除透明带后的裸卵的结合情况。结果:所构建的cDNA文库重组率为98.5％,滴度为1.1×10~6pfu/mL。克隆所得hOviductin全长cDNA约为2500 bp,Gen-Bank的登录号为AY189737。EGFP-hOviductin在条件培液中的浓度为0.236 nmol/L,能结合在去透明带的大鼠裸卵质膜外表面,而未见其与COC结合。结论:hOviductin能在HeLa细胞中表达分泌,其分泌产物可结合于大鼠裸卵质膜外表面。     

外阴癌中HPV感染与p53、MDM2表达的关系

目的 :探讨HPV6/ 11、16/ 18在外阴癌组织中的感染情况及与p5 3、MDM2蛋白表达的关系。方法 :用原位杂交法 (ISH)检测HPV6/ 11、16/ 18在 30例外阴癌、2 1例外阴上皮内瘤变 (VIN)及 10例外阴正常皮肤组织中的表达。同时用免疫组化SP法检测p5 3、MDM2蛋白的表达。结果 :HPV6/ 11、16/ 18在外阴癌、VIN中的阳性表达率分别为 60 % (18/30 )、33.33% (10 / 30 ) ,4 2 .86% (9/ 2 1)、2 8.5 7% (6/ 2 1) ,正常对照组没有表达。p5 3、MDM2蛋白在外阴癌、VIN、正常对照组中的阳性表达率分别为 63.33% (19/ 30 )、4 0 .0 0 % (12 / 30 ) ,4 7.62 %(10 / 2 1)、5 2 .38% (11/ 2 1) ,0 % (0 / 10 )、0 % (0 / 10 )。HPV6/ 11的表达在外阴癌组、VIN组与正常组差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,外阴癌组HPV16/ 18表达与正常组差异有显著性 (P <0 .0 5 )。外阴病变各组p5 3、MDM2与正常组差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :HPV6/ 11、HPV16/ 18、p5 3、MDM2蛋白在外阴组织的不同病变中表达均差异有显著性 ,在外阴癌的发生发展中HPV感染、p5 3突变和MDM2表达可能起一定的作用     

克罗米酚与HCG促排卵作用的临床观察

目的　认识克罗米酚 (CC)促排卵的缺陷 ,评价人绒毛膜促性腺激素 (HCG)的辅助作用。方法　具有正常月经周期的妇女 95例 ,对照组 39例 ;单独使用CC组 30例 ;CC +HCG组 2 6例。观察三组受试者排卵率、子宫内膜厚度及回声类型、排卵日 (LH +0 )及种植窗期 (LH +7)激素水平。结果　CC使子宫内膜变薄 ,回声类型改变 ;CC使黄素化不破裂卵泡综合征 (LUFS)的发生率 (36 6 7% )增加 ,与对照组 (5 13% )比较P <0 0 5 ;CC使种植窗期E2 异常增高 (对照组 115 0 0pg ml,CC组 2 89 5 0pg ml,P <0 0 5 ) ;E2 、P水平与内膜厚度无明显相关性 ,且不能预测LUFS的发生 ;HCG有望降低LUFS的发生率。结论　CC可能使子宫内膜厚度、回声类型、血清激素环境偏离种植所需的理想状态 ;并增加LUFS的发生率 ,HCG的使用有望纠正CC在促排卵过程中的这一缺陷