维A酸在细胞和基因水平调控黑素表达的研究

目的探讨维A酸治疗皮肤色斑的作用机制。方法应用不同浓度的维A酸作用于B16F10黑素瘤细胞及正常人黑素细胞,观察对酪氨酸酶mRNA的表达、酪氨酸酶活性、黑素含量及黑素细胞增殖率的影响。结果维A酸的作用浓度为100μmol／L时,黑素细胞酪氨酸酶mRNA表达下调均值为30．13％;当浓度为500μmol／L以上时,可使酪氨酸酶活性降低82．79％,并随着浓度的增加作用越明显;而对黑素含量的降低则需要更高的浓度（1000μmol／L）;同时,还有促进黑素细胞增殖的作用。对照组氢醌对酪氨酸酶mRNA的表达无明显影响,对色素细胞有抑制和毒性作用。结论维A酸能够抑制黑素产生,是通过下调酪氨酸酶的表达和活性来完成。     

Jejuno-jejunal invagination due to intestinal melanoma

Cutaneous melanoma is one of the most studied neoplastic lesions in biology and clinical oncology. It has been well documented that this type of neoplasm presents a high metastatic rate, and is able to involve nearly every tissue. Non-cutaneous melanoma represents an unusual pattern of melanoma, and the small intestine is an uncommon anatomic localization. Herein we report an extremely rare clinical case of a young woman affected by a bleeding jejunal melanoma, whose early clinical presentation was an intestinal invagination.     

人参皂苷Rg3对小鼠B16黑素瘤细胞侵袭、转移及MMP-9表达的影响

目的:观察人参皂苷Rg3(简称Rg3)对小鼠黑素瘤细胞B16的肺转移、侵袭能力及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响,探讨其抗肿瘤转移的作用机制。方法:体内建立小鼠自发肺转移和实体瘤模型,观察腹腔注射不同剂量的Rg3(对照组给予0.9%氯化钠溶液)后,肺部肿瘤转移灶的数目,并检测实体瘤中MMP-9蛋白的表达情况。采用Boyden小室侵袭实验及免疫细胞化学染色法检测Rg3对肿瘤细胞体处侵袭能力及MMP-9表达的影响。结果:采用不同剂量的Rg3(0.3、1.0和3.0mg/kg)治疗后,小鼠肺部转移灶的数目均较少,肿瘤组织中MMP-9的表达水平降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。在体外,2.5和5.0μg/mLRg3治疗组中侵袭穿过人工基膜的B16细胞数目明显少于对照组(P<0.01),且5.0μg/mLRg3可抑制肿瘤细胞中MMP-9的表达。结论:Rg3能够抑制小鼠黑素瘤细胞的肺转移,其抗肿瘤转移作用可能是通过降低肿瘤细胞中MMP-9的表达水平及细胞侵袭能力来实现的。     

mda-7/IL-24和IL-24 delE5诱导急性髓系白血病细胞向单核细胞分化

目的:研究人黑素瘤分化相关基因-7(melanoma differentiation associated gene-7,mda-7;又称IL-24)及其剪接体IL-24 delE5与急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞分化的关系。方法:十四烷酰佛波醇-乙酯(12-O-tetrade-canoylphorbol-13-acetate,TPA)处理人急性髓系白血病细胞系U937、HL-60,real-time PCR及Western blotting检测细胞中mda-7/IL-24和IL-24 delE5的表达,FACS检测细胞表面CD11b、CD14和CD115的表达。siRNA干扰U937、HL-60细胞中mda-7/IL-24和IL-24 delE5的表达后,再以TPA诱导细胞分化,FACS检测CD11b、CD14和CD115的表达。用前期构建的mda-7/IL-24和IL-24 delE5载体转染U937、HL-60及AML-M5患者的原代白血病细胞,观察异位过表达mda-7/IL-24和IL-24 delE5能否诱导白血病细胞向单核细胞分化。结果:TPA在诱导U937、HL-60细胞向单核细胞分化过程中显著促进mda-7/IL-24及其剪接体IL-24 delE5的表达,用siRNA干扰mda-7/IL-24及IL-24 delE5的表达后,TPA诱导U937、HL-60细胞向单核细胞分化的作用也被阻断。异位过表达mda-7/IL-24和IL-24 delE5可诱导U937、HL-60以及原代AML细胞向单核细胞分化:U937、HL-60细胞表面CD11b和CD14表达均显著升高,CD115表达仅在U937细胞有显著升高;3例AML-M5患者的原代AML细胞中CD11b、CD14及CD115表达均有不同程度升高,细胞呈现单核细胞的形态特征。结论:TPA可通过上调mda-7/IL-24及其剪接体IL-24 delE5的表达诱导白血病细胞向单核细胞分化。     

c-kit蛋白在恶性黑素瘤中的表达

目的　探讨c kit蛋白在人恶性黑素瘤中的表达及临床意义 ,分析它和临床病理参数的关系。方法　采用免疫组化S P法检测 44例原发性皮肤恶性黑素瘤、9例转移性恶性黑素瘤及 2 0例良性痣中c kit蛋白的表达。结果　3 4例原发性皮肤恶性黑素瘤、4例转移性恶性黑素瘤、5例良性痣表达c kit蛋白 ,阳性率分别为 77.3 %、44 .4%、2 5 .0 % ,前者的阳性表达率显著高于后两者 (P均 <0 .0 5 ) ;原发性皮肤恶性黑素瘤中浅表扩散性恶性黑素瘤 (SSM )的c kit蛋白阳性表达率显著高于其它类型 (P均 <0 .0 1) ;c kit蛋白的表达与年龄 性别 发病部位 是否淋巴结转移等临床病理因素均无关 (P均 >0 .0 5 )。结论　c kit蛋白的表达可能与人恶性黑素瘤的发生发展有关 ,其有望成为治疗黑素瘤的有效靶向分子之一     

结缔组织增生性Spitz痣和色素性梭形细胞痣临床及组织病理学特征

目的:分析结缔组织增生性Spitz痣和色索性梭形细胞痣的临床及组织病理学特点.方法:回顾性分析确诊的8例结缔组织增生性Spitz痣和9例色素性梭形细胞痣患者的临床和组织病理学特征.结果:结缔组织增生性Spitz痣表现为梭形或上皮样痣细胞增生并伴有显著的胶原硬化和均质化,色素性梭形细胞痣表现为真、表皮交界处梭形细胞增生并伴有纤细的色素颗粒沉积.结论:结缔组织增生性Spitz痣和色素性梭形细胞痣是Spitz痣中较少见的特殊类型.其中色素性梭形细胞痣需要与黑素瘤相鉴别.     

甲氧沙林脂质体对小鼠黑素瘤细胞黑素生成影响的研究

目的:探讨甲氧沙林脂质体(8-MOPL)对小鼠B16F黑素瘤细胞增殖、黑素含量、酪氨酸酶活性的影响。方法:采用体外培养的小鼠B16F黑素瘤细胞株,以等浓度的甲氧沙林(8-MOP)为对照,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况;NaOH裂解法测定黑素合成;多巴氧化法测定酪氨酸酶活性。结果:与等浓度8-MOP相比,低浓度8-MOPL(10-25μmol/L)能显著提高酪氨酸酶活性和黑素含量(P<0.05)。高浓度8-MOPL(100-200μmol/L)对细胞的抑制作用更显著(P<0.05)。结论:用脂质体作为8-MOP的载体可以显著提高8-MOP对靶细胞的作用,为8-MOPL制剂治疗白癜风的临床应用提供了实验依据。     

恶性黑素瘤中端粒酶表达的意义

端粒存在于染色体的末端,端粒酶是一种由RNA和蛋白质组成的核糖核蛋白,能以自身RNA为模板不断合成端粒,与细胞的永生化、癌变有关.端粒酶在恶性黑素瘤的发生发展过程中具有重要作用,为恶性黑素瘤的早期诊断、治疗及预后提供了新的途径.     

MIA基因-RNAi对人黑素瘤A375细胞增殖的影响

目的探讨RNA干扰技术抑制恶性黑素瘤细胞株A375MIA基因表达后,对A375细胞增殖的影响。方法构建针对人黑素瘤A375细胞(MIA)基因3个不同靶序列的RNAi真核表达载体pLTE-hMIA-RNAi,用磷酸钙细胞转染法把构建的载体分别转染HEK293细胞,采用Western技术和RT-PCR技术分别检测MIA基因蛋白的表达和mRNA水平。选择对MIA基因表达抑制作用最强的RNAi载体转染A375细胞后,用细胞计数检测细胞增殖的变化。结果构建的3个RNAi质粒和对照组相比,pLTE-hMIA-RNAi352质粒对MIA的表达减少量>80%,hMIA的mRNA水平下降约83%,与对照组比较差异有显著性意义。而pLTE-hMIA-RNAi203、pLTE-hMIA-RNAi343质粒对MIA的表达及mRNA水平的影响,与对照组比较差异无显著性意义。转染pLTE-hMIA-RNAi352质粒的A375细胞增殖能力较对照组显著下降。结论构建的针对人MIA基因352位靶序列的RNAi质粒pLTE-hMIA-RNAi352可显著抑制MIA的表达及A375细胞增殖。     

三氧化二砷诱导Cloundman S91恶性黑素瘤细胞凋亡的研究

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）对小鼠黑素瘤CloundmanS91细胞系的作用。方法：四氮唑（MTT）还原法检测As2O3对S91黑素瘤细胞存活率的影响，通过形态观察、流式细胞仪分析、DNA凝胶电泳研究As2O3诱导S91细胞凋亡的情况。结果：S91细胞经As2O3处理后，存活率降低，并与药物浓度呈正相关；荧光显微镜下可见明显的凋亡细胞；细胞周期G1期前出现凋亡峰；DNA凝胶电泳显示有规律的梯状条带。结论：3－5μmol/L的As2O3诱导S91黑素瘤细胞凋亡。