Chinese 1基因型弓形虫棒状体蛋白 ROP16的基因克隆表达及生物信息学分析

目的：构建弓形虫Chinese 1基因型TgCtWh3（以后均简称Wh3）株棒状体蛋白（ rhoptry protein ,ROPs）16的原核和真核重组表达质粒及其3D结构。方法参照ROP16序列分别设计引物,采用PCR从弓形虫Chinese 1基因型Wh3株基因组DNA中扩增出编码ROP16的基因片段,克隆至pMD18-T载体;经PCR及测序分析鉴定;阳性克隆的质粒分别亚克隆至原核表达载体pET-28a和真核表达载体pEGFP-C2,分别转化大肠杆菌BL21和DH5α,PCR和酶切鉴定转化菌落插入的序列;将构建的原核表达菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE和免疫印迹分析融合蛋白的表达;将构建的真核重组质粒经脂质体转染293T细胞,观察其在细胞中表达;采用生物信息学方法分析构建了蛋白的3 D结构。结果各组均PCR扩增出约2．1 kb ROP16基因的特异片段,序列检测结果均正确;分别亚克隆到原核表达载体pET-28a和真核表达载体pEGFP-C2中,成功构建了Chinese 1基因型弓形虫棒状体蛋白ROP16的原核表达质粒和真核表达质粒;原核表达质粒在大肠杆菌中表达了ROP16的融合蛋白;真核表达质粒在293T细胞中成功表达,成功构建出ROP16基因的3D结构图。结论以pET-28a和pEGFP-C2为载体,分别成功构建并表达了ROP16的原核和真核重组质粒,并构建出其3D结构图。     

85例香丹注射液不良反应报告分析

目的:了解香丹注射液临床应用的安全性,探讨其不良反应发生规律,为临床安全合理用药提供参考. 方法:采用回顾性分析方法,对2004年1月31日～2006年10月30日江苏省呈报的香丹注射液不良反应报告进行统计分析. 结果:香丹注射液不良反应主要发生情况为皮肤及其附件损害、胃肠系统损害、心血管及多器官多系统损害. 结论:医生、患者应严格按照药品说明书的规定合理用药,以减少药品不良反应的发生.     

多沙唑嗪对映体对豚鼠离体气管环的作用

目的:研究R-多沙唑嗪(R-doxazosin,R-DOX)、S-多沙唑嗪(S-doxazosin,S-DOX)和rac-多沙唑嗪(rac-doxazosin,rac-DOX)对豚鼠离体气管环的作用.方法:采用豚鼠离体气管环,观察DOX对映体对离体气管环静息张力、卡巴胆碱诱发收缩反应以及异丙肾上腺素诱发舒张反应的影响.结果:10和30ìmol·L-1 DOX对映体对豚鼠离体气管环静患张力无显著性影响(P>0.05).S-DOX 10 ìmol·L-1使卡巴胆碱诱发豚鼠离体气管环收缩反应的Emax明显增大(P<0.05),但卡巴胆碱的EC50未发生明显改变.相反,同浓度R-DOX明显降低卡巴胆碱诱发的豚鼠离体气管环收缩反应的Emax(P<0.05),但使卡巴胆碱的EC50明显减小.S-DOX 10ìmol·L-1明显抑制异丙肾上腺素诱发的豚鼠离体气管环舒张反应量效曲线,并使异丙肾上腺素的EC50明显增大(P<0.05).R-DOX,rac-DOX和s-DOX 30 ìmol·L-1均不影响异丙肾上腺素的舒张反应量效曲线.结论:在豚鼠离体气管环标本S-DOX使卡巴胆碱诱发收缩反应的Emax明显增大,且明显抑制异丙肾上腺素的舒张反应.     

预防性持续低剂量咖啡因治疗超低出生体质量儿呼吸暂停疗效观察

目的：观察预防性持续低剂量咖啡因在超低出生体质量儿呼吸暂停治疗中的临床疗效。方法将超低出生体质量儿208例随机分为试验组和对照组各104例。试验组患儿在出生后尚未发生呼吸暂停时给予持续低剂量咖啡因治疗,对照组患儿在发生呼吸暂停后才开始接受咖啡因治疗。比较并评价2组患儿治疗效果。结果试验组在患儿出生1周内呼吸暂停发生率和体质量增至2.0kg前呼吸暂停发生率均低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）。试验组反复发生呼吸暂停而使用呼吸机的百分率低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论持续低剂量咖啡因用于预防超低出生体质量儿呼吸暂停,能够有效缓解患儿的病症。     

抗老年痴呆症药物研究进展

目前研究认为,痴呆与大脑皮质和皮质下神经细胞的退化有关,准确的病因学尚无结论。已开发与开发中药物主要是胆碱酯酶抑制剂（CHEI）、M1受体激动药、防止β-淀粉蛋白（BAd）沉积药、抑制γ-分泌酶药、自由基清除药、钙拮抗剂、激素类药物等,中药研究亦取得明显进展。一些天然药物活性成分如石杉碱甲、银杏叶提取物、蛇床子素、丹酚酸等具有扩张脑血管、增加脑血流量、清除自由基、免疫调节等作用,并可通过抑制脑内胆碱酯酶活性,提高脑内兴奋性递质-乙酰胆碱含量,改善老年痴呆症患者的症状。随着自由基理论与小脑血管密切相关的深入研究,细胞因子基因工程的进一步发展及类胆碱能新药的涌现,将使AD的研究药物进一步拓宽。     

儿童腺样体肥大合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征的手术治疗

目的探讨儿童腺样体肥大合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)的治疗方法及临床疗效。方法对2011年4月～2012年9月我院耳鼻喉科收治的36例阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患儿资料进行回顾分析,术后回访6～12个月。结果 36例患儿均治愈,其中12例术后睡眠鼾声基本消失,无张口呼吸,憋醒及呼吸暂停等表现,24例憋醒,张口呼吸,呼吸暂停及睡眠打鼾等症状完全消失。术后回访6～12个月,无一例并发症且无一例复发。结论对于儿童腺样体肥大合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合征患儿,鼻内镜下腺样体切除术治疗,临床疗效确切,值得进一步推广。     

人参皂甙及其组分对心肌细胞缺氧、再给氧和心肌缺血再灌注损伤的保护作用

人参总皂甙(83μg/ml)及其组分Rb+Ro(简称Rb+Ro)能保护大鼠乳鼠心肌细胞培养缺糖缺氧性损伤,减少再给氧损伤时乳酸脱氢酶(LDH)释放,降低离体大鼠心脏缺血再灌注损伤时肌酸磷酸激酶(CPK)释放。250μg/ml人参总皂甙和人参皂甙Rg以上组分(简称Rg)则促进心肌细胞LDH释放。说明较低剂量人参总皂甙和人参皂甙Rb+Ro组分对心肌缺氧和再给氧与再灌注有保护作用;人参总皂甙抗心肌缺血和再灌注损伤的有效组分为Rb+Ro。     

盐酸特比萘芬醇类脂泡囊凝胶离体和在体透皮特点研究

目的:研究盐酸特比萘芬醇类脂泡囊凝胶在体和离体透皮特点。方法:采用Franz扩散池进行体外透皮实验,考察盐酸特比萘芬醇类脂泡囊凝胶、脂质体凝胶和普通凝胶经皮渗透性和皮肤滞留量;以小鼠为实验动物,3种凝胶腹部经皮给药,考察盐酸特比萘芬的血药浓度和皮肤滞留量,对比不同类型凝胶剂的透皮效果。结果:离体透皮扩散实验中,透皮速率排序为:脂质体凝胶>醇类脂泡囊凝胶>普通凝胶;皮肤内24 h累积滞留量排序为:醇类脂泡囊凝胶>脂质体凝胶>普通凝胶。在体透皮吸收实验中,皮肤内6 h累积滞留量排序为:醇类脂泡囊凝胶>脂质体凝胶>普通凝胶。3种凝胶中的盐酸特比萘芬在皮肤深层中的滞留量均远远大于角质层,醇类脂泡囊凝胶中药物在皮肤深层的滞留量远大于另外两种凝胶,而脂质体凝胶和普通凝胶在皮肤深层的滞留量无明显差异。结论:醇类脂泡囊对盐酸特比萘芬透皮吸收具有一定的促进作用,同时也能显著提高盐酸特比萘芬在皮肤内特别是皮肤深层中的滞留量,为治疗深部皮肤真菌感染提供了一种新方法。     

舒利迭治疗支气管哮喘的临床观察

目的观察舒利迭（沙美特罗/氟替卡松）治疗支气管哮喘的疗效。方法对120例确诊支气管哮喘的患者,分为吸入糖皮质激素和长效β2受体激动剂的复方制剂舒利迭（沙美特罗/氟替卡松）治疗组60例,吸入糖皮质激素（丙酸氟替卡松）对照组60例。治疗后对临床疗效、肺功能指标进行比较及统计学分析。结果舒利迭治疗组用药后临床疗效和肺功能改善方面明显优于对照组。结论舒利迭在治疗支气管哮喘改善临床症状和肺功能明显,较单纯吸入糖皮质激素能更好控制及改善的哮喘症状。     

LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中布洛芬对映体的浓度

目的建立简便、快速、灵敏的LC-MS/MS法测定Beagle犬血浆中手性药物布洛芬浓度的分析方法,进行系统的方法学验证,并用于布洛芬在Beagle犬体内的药代动力学研究。方法以酮洛芬为内标,血浆样品经正己烷(含5%异丙醇)液萃取后,以甲醇:1 mmol·L-1甲酸铵(含0.2%甲酸,10%甲醇)(82∶18,V/V)为流动相,采用Lux 5u Cellulose-3(250 mm·4.6 mm,5μm)柱分离,流速为0.8 m L·min-1。通过电喷雾电离源以多反应监测(MRM)方式进行负离子检测,用于定量分析的离子对分别为m/z 205.2/161.2(布洛芬)和m/z 253.1/209.2(内标,酮洛芬)。方法验证包括基质效应、提取回收率、线性、定量下限、批内与批间精密度、稳定性、稀释效应等。结果犬血浆中左/右旋布洛芬的线性范围为0.2~50 mg·L-1,最低定量限为0.2 mg·L-1,批内、批间精密度(RSD)介于1.01%~13.1%之间。Beagle犬单次口服给予右旋布洛芬后的主要药动学参数Cmax、T1/2、AUC(0-t)分别为:(82.98±14.83)mg·L-1、(3.217±0.7298)h、(362.0±58.67)h·mg·L-1。单次口服给予消旋布洛芬后,其左/右旋布洛芬的主要药动学参数Cmax、T1/2、AUC(0-t)分别为:(70.62±14.81)/(74.48±20.08)mg·L-1、(1.520±0.9286)/(5.432±1.234)h、(177.8±34.18)/(649.6±200.2)h·mg·L-1。结论该方法简便、快速、灵敏度高、重复性好,能够同时测量血浆中左/右旋布洛芬的药物浓度,可用于布洛芬在Beagle犬体内的药代动力学研究。