上海应物所铼依替膦酸盐注射液临床试验获进展

中科院上海应用物理研究所放药中心的科研人员在国家、中国科学院、上海市等多项基金的资助下，经过多年的不懈努力，研制成功了具有自主知识产权的I类创新药物-铼[188Re]依替膦酸盐注射液（188Re—HEDP）。目前已完成I期临床试验，     

^188Re标记单克隆抗体BAC5及对鼻咽癌细胞的抑制实验研究

目的 探讨放射性核素^188Re标记抗鼻咽癌（NPC）单抗BAC5的方法及^188Re-BAC5对鼻咽癌进行免疫导向治疗的可行性。方法 ^188Re-BAC5的制备采用直接标记法，采用MTT法观察^188Re-BAC5对体外单层培养的鼻咽癌细胞（CNE－2）的抑制作用，对照组为^188Re-BSA、^188ReO4^-。结果 ^188Re-BAC5的标记率在80％以上，MTT法结果表明^188Re-BAC5组的抑瘤率比对照组明显提高（P＜0．05）。结论 提示^188Re-BAC5有可能在对人鼻咽癌的放免导向治疗中起到良好的作用。     

188Re-CEA人/鼠嵌合抗体在裸鼠人结肠癌模型中的定位研究

目的 :评价1 88Re标记抗CEA人 鼠嵌合抗体在人结肠癌裸鼠模型中的肿瘤靶向性。方法 :于裸鼠尾静脉注入1 88Re CEA人 鼠嵌合抗体后 2 4、4 8、72、96h分别测定荷瘤小鼠体内组织放射性分布 ,于不同时相分别对尾静脉注射1 88Re CEA嵌合抗体及1 88Re C5 0鼠单抗的裸鼠行放免显像。结果 :1 88Re CEA嵌合抗体注射后 9 5h ,肿瘤部位开始有放射性浓聚。以后随时间的增加 ,肿瘤部位放射性持续存在并维持较高水平 ,而周围组织放射性逐渐清除。1 88Re CEA人 鼠嵌合抗体与1 88Re C5 0抗体一样在肿瘤中有很高的摄取。肿瘤组织在注射1 88Re CEA人 鼠嵌合抗体 2 4h后 ,摄取放射性占总注入量的百分比为11 0 5 % ,随时间的延长稍有增加。 96h时所有脏器T NT比均大于 2 0。结论 :1 88Re CEA人 鼠嵌合抗体可特异地浓聚于结肠癌组织 ,有望用于临床诊断和治疗。     

^188Re—HAb18（F（ab′）2在荷瘤鼠体内的药代动力学

目的　研究     

β射线诱导人肝癌细胞凋亡

0　引言　凋亡或细胞程序性死亡是一种不同于细胞坏死的死亡方式 ,是在基因控制下的有序死亡 ,是一个主动性自杀过程 ,常伴有特征性形态学和生化变化 .临床上放射线治疗肿瘤主要应用射线诱导细胞凋亡这一机制 .1 88Re发射 2 110Ke V的 β射线 ,15 5 Ke Vγ射线 ,半衰期 17h,具有良好的核物理性质 .国外 1 88Re的研究主要在 1 88Re标记单克隆抗体对肿瘤的放射免疫治疗 ,并显示具有一定的疗效 ,而国内关于 1 88Re的研究较少 ,经文献检索未见有关于 1 88Re诱导细胞凋亡的报道 .本实验旨在研究 1 88Re-β射线诱导人肝癌细胞系 h HCC(human…     

^188Re—HAb18F（ab‘）2肝癌放射免疫显像的研究

目的 探讨＾１８８Ｒｅ标记的肝癌单抗片段ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ’）２在荷人肝癌移植瘤裸鼠体内的放免显像和生物学分布。方法 采用２－硫基乙醇为还原剂的直接法标记肝癌单抗片段ＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ’）２,Ｗｈａｔｍａｎ ３ｍｍ纸层析法测＾１８８ＲｅＨＡｂ１８Ｆ（ａｂ’）２标记率,活细胞放射免疫结合法测标记物的免疫活性。放免显像实验时,于荷肝癌裸鼠尾静脉注射标记物１１．１ＭＢｑ,ＳＰＥＣＴ低通通用型标直器显像。     

188Re-奥曲肽在荷瘤裸鼠体内分布的实验研究

目的研究188Re-奥曲肽在荷瘤裸鼠体内的分布,为进一步肿瘤靶向治疗奠定基础.方法16只荷人H460非小细胞肺癌的BALB/c裸鼠分为4组,经尾静脉注射188Re-奥曲肽18.5MBq(0.2ml),于注射后2h,4h,24h,48h每个时间点处死一组裸鼠,取血液、肿瘤组织及主要脏器测量其放射性计数率值,经放射性衰变校正后计算每克组织的百分注射剂量率(%ID/g),观察标记物在动物体内的生物学分布.另2只荷瘤裸鼠同样尾静脉注射相同剂量的188Re-奥曲肽,于注射后相同时间点行SPECT扫描,利用感兴趣区技术对肿瘤/非瘤组织放射性比值(T/NT)进行半定量分析.结果188Re-奥曲肽标记率达(95.3±1.8)%,188Re-奥曲肽在荷瘤裸鼠体内主要分布于肿瘤组织、肝脏、肾脏及肠道,肿瘤部位在4h摄取达到高峰9.8%ID/g,此时SPECT在肿瘤部位有明显的放射性核素浓聚,T/NT在尾静脉药物注射后24h达到高值为7.1.结论188Re-奥曲肽在BALB/c荷瘤裸鼠体内对人非小细胞肺癌具有靶向定位作用,其在肿瘤部位的分布具有较高的T/NT,188Re-奥曲肽有望用于表达生长抑素受体肿瘤的核素靶向治疗.     

miRNA-188-5p表达下调通过调控PTEN/Akt途径抑制皮肤鳞状细胞癌细胞的增殖和侵袭能力

【摘要】 目的 探讨miRNA-188-5p（miR-188-5p）在皮肤鳞状细胞癌（鳞癌）组织和细胞中的表达,分析其表达下调对皮肤鳞癌细胞增殖和侵袭能力的影响。方法 2012年11月至2018年10月在河南省新乡医学院第一附属医院收集50例手术切除的皮肤鳞癌组织及50例癌旁正常皮肤组织。实时荧光定量PCR（qPCR）检测皮肤鳞癌组织、癌旁正常皮肤组织、皮肤鳞癌细胞系SCL-1、A431、HSC-5和人永生化角质形成细胞株HaCaT细胞中miR-188-5p的表达。培养的A431和HSC-5细胞分别分为2组：miR-188-5p抑制剂组和阴性对照组,对转染miR-188-5p抑制剂的细胞和阴性对照组细胞,通过qPCR检测miR-188-5p的相对表达（2-△△Ct）,并以CCK8法和Transwell小室分别检测各组细胞的增殖活性和侵袭能力。双荧光素酶报告实验检测miR-188-5p和PTEN的相互作用,Western印迹法检测PTEN、总Akt（t-Akt）和磷酸化Akt（p-Akt）的表达。两独立样本比较采用t检验。结果 皮肤鳞癌组织中miR-188-5p的相对表达（5.213 ± 3.138）显著高于癌旁正常皮肤组织（1.010 ± 0.364,t = 9.187,P < 0.001）。SCL-1、A431和HSC-5细胞中miR-188-5p的表达（3.858 ± 0.163、7.068 ± 0.262和4.572 ± 0.413）均显著高于HaCaT细胞（1.079 ± 0.300,t = 17.890、21.110和8.737,均P < 0.05）。与阴性对照组相比,miR-188-5p抑制剂组A431和HSC-5细胞miR-188-5p表达显著下调（均P < 0.01）,细胞增殖和侵袭能力下降（均P < 0.05）。双荧光素酶报告实验显示,miR-188-5p表达下调显著上调A431和HSC-5细胞中PTEN的表达,但抑制p-Akt的表达。结论 miR-188-5p在皮肤鳞癌组织和细胞中高表达,且miR-188-5p表达下调可能通过调控PTEN/Akt途径,抑制皮肤鳞癌细胞增殖活性和侵袭能力。     

反义c-myc寡脱氧核苷酸联合^188Re放射治疗对家兔髂总动脉损伤后平滑肌细胞增殖的影响

目的观察反义c-myc寡脱氧核苷酸联合188Re放射治疗对家兔髂总动脉损伤后平滑肌细胞增殖的影响,探讨反义c-myc寡脱氧核苷酸(ODN)联合188Re防治再狭窄的潜在作用。方法通过球囊导管损伤家兔髂总动脉后,利用充盈188Re液的球囊导管对血管行照射后,将反义c-myc ODN通过pluronic gel缓释系统和Lipofectin转染导入系统,将其作用于损伤血管的外膜,3周后对所取的血管节段进行组织切片和α-actin免疫组化染色,在显微镜下进行形态观察和采用图像分析系统进行图像分析,计算出动脉内膜α-actin染色阳性细胞百分比,并进行统计学分析。结果通过形态观察和计算α-actin染色阳性细胞百分比,发现单纯反义c-myc ODN和188Re放射治疗,以及两者联合均能明显抑制平滑肌细胞增殖,且后者比前两者抑制效果更明显。结论反义c-myc ODN联合188Re放射治疗能显著抑制内膜平滑肌细胞的增殖。     

188Re标记小剂量奥曲肽方法学及其在小鼠体内分布的研究

目的建立188Re标记小剂量奥曲肽(octreotide)的方法,观察其在小鼠体内的生物学分布.方法 SnCl2·2H2O的用量为50～1 600μg,奥曲肽的用量为10、20或30μg,乙酸缓冲液的pH值从4.0至6.0,反应体系的温度为室温、60、80或100℃,淋洗液体积从0.05至0.20 ml,测定标记物的标记率及其在体外的稳定性.将标记物经小鼠尾静脉注射,于0.5、1、2、4、24 h取血液及主要脏器测量其放射性计数率值.结果 188Re直接法标记小剂量奥曲肽的最佳条件葡庚糖酸钠(0.3 mmol/L)0.1 ml,SnCl2·2H2O(16 g/L)0.05 ml,乙酸缓冲液(pH=5)0.1 ml,奥曲肽(0.1 g/L)0.1 ml,通氮气震荡反应1 h,再加入新鲜188Re淋洗液0.1ml,100℃水浴30 min,188Re-奥曲肽标记率可达到(95.3±1.8)%,室温下放置24 h放化纯为(89.6±2.5)%.188Re-奥曲肽在正常小鼠体内主要分布于肝脏、肾脏及肠道.结论研究建立的188Re标记奥曲肽操作简便,标记率高,体外稳定性好,无需进一步纯化,奥曲肽用量较小,预期能提高靶向定位质量,188Re-奥曲肽在小鼠体内主要被肠道、肝脏、肾脏等器官摄取,血液清除快.