杆状病毒介导LacZ基因转染体外培养的人虹膜色素上皮细胞

目的：研究重组杆状病毒(baculovinus)载体介导β—半乳糖苷酶基因(LacZ)对体外培养虹膜色素上皮(IPE)细胞的转染和表达情况。方法：将质粒pCMV—β中的CMV—LacZ表达盒插入杆状病毒表达栽体pFast BacI的Eco RI／Hind Ⅲ位点，构建重组质粒pBac—β，并利用Bac—to—Bac表达系统在Sf9细胞中产生出重组杆状病毒BV—β。将MOI为200的BV—β感染经酶消化加显微法分离培养的IPE细胞，24h后进行X-gal染色。在显微镜下观察IPE中LacZ表达阳性的情况，记录阳性细胞所占的百分比。结果：限制性酶切分析及测序结果表明，我们已成功构建表达质粒pBac—β及重组杆状病毒BV—β。X-gal染色证实杆状病毒介导LacZ在细胞中的表达呈蓝色，弥漫于整个胞浆。感染后24h时表达阳性率达85％。结论：重组杆状病毒可有效介导报告基因在体外培养的IPE细胞中表达，为利用杆状病毒构建可供移植的基因工程化虹膜色素上皮细胞提供了实验依据。     

GM1协同治疗重症脑梗死的疗效分析

目的：评价神经节苷酯（GM1）在重症脑梗死治疗中的疗效。方被：对重症脑梗死病人随机分为GM1组和对照（NC）组进行疗效观察并比较。结果：GM1组NIHSS评分优于NC组，GM1组BI指数明显高于NC组。结论：GM1可明显改善病人神经系统功能缺损程度。     

神经节苷脂对去垢剂损伤红细胞膜的保护作用

神经节苷脂对去垢剂损伤红细胞膜的保护作用沈红李玉书范明汪家政军事医学科学院基础医学研究所北京１００８５０神经节苷脂是存在于脊椎动物细胞浆膜外层上的糖鞘脂。在哺乳动物脑中含量最高，尤其浓集于神经元的突触膜上。外源性神经节苷脂在神经系统的发育和损伤修复中...     

滤膜荧光法检测大肠菌群及其与标准滤膜法的比较

目的：用滤膜荧光法检测大肠菌群，并将该法与标准滤膜法进行比较。方法：将菌种于肉汤培养基中培养至对数生长期，稀释，用微孔滤膜过滤，将滤膜置于含ＭＵＧＡＬ的培养液的衬垫上，置３７℃培养，在不同时间取出观察，并作荧光斑点扫描。结果：经实验室模拟水样和列车餐车水样检验，滤膜荧光法和标准滤膜法结果无差别。结论：滤膜荧光法与标准滤膜法相比具有快速、适用于现场检测的特点     

肉苁蓉总苷介导特异性雄激素受体对SAMP8小鼠突触相关蛋白及认知功能的影响

目的:明确肉苁蓉总苷(GCs)改善快速老化小鼠(SAMP8)认知功能障碍是否特异性介导雄激素受体(androgen receptor, AR)调控突触相关蛋白的表达。方法:7月龄雄SAMP8小鼠78只随机分为模型组、GCs组、GCs+氟他胺(F)组、GCs+氟维司群(ICI)组、F组、ICI组。采用Morris水迷宫检测各组小鼠学习记忆功能;Western blot和RT-PCR检测各组小鼠海马突触素(synaptophysin, SYN)、突触后致密物(postsynaptic density-95, PSD-95)、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)的表达。结果:GCs可以明显改善SAMP8小鼠的学习认知功能,GCs+F组和GCs+ICI组小鼠的学习记忆功能较GCs组有明显降低;Western blot和RT-PCR显示,与模型组相比,GCs组BDNF、SYN、PSD-95在蛋白水平和基因水平的表达均显著增加(P<0.05);与GCs组相比,GCs+F组、GCs+ICI组SYN表达增加,BDNF和PSD-95表...     

左卡尼汀联合脑苷肌肽治疗缺氧缺血性脑病新生儿的效果探讨

目的：探讨左卡尼汀联合脑苷肌肽治疗缺氧缺血性脑病新生儿的临床效果。方法：选取2017年1月—2022年1月我院收治的缺氧缺血性脑病新生儿86例为观察对象,采取随机数字表法分成对照组(43例)、观察组(43例)。两组均给予常规基础治疗,对照组采用脑苷肌肽注射液治疗,观察组采用左卡尼汀注射液+脑苷肌肽注射液治疗,均治疗2周。对比两组临床疗效、症状恢复时间、治疗前后神经行为测定(NBNA)评分和血清指标及治疗期间不良反应。结果：观察组临床总有效率显著高于对照组;治疗后两组患儿NBNA评分均较治疗前升高,且观察组高于对照组;观察组肌张力恢复时间、反射恢复时间、意识恢复时间、惊厥停止时间均短于对照组;治疗后两组患儿血清泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、人脂氧素A4(LXA4)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)水平均降低,观察组低于对照组;治疗期间,观察组不良反应总发生率显著低于对照组;差异均有统计学意义(P<0.05)。结论：缺氧缺血性脑病患儿应用左卡尼汀联合脑苷肌肽可有效缓解临床症状,改善血清UCH-L1、HIF-1α、LXA4、GFAP水平,减少并...     

基于TXNIP/NLRP3/Caspase-1通路探讨清热止血方联合雷公藤多苷治疗过敏性紫癜性肾炎模型大鼠的作用机制

目的 探讨清热止血方联合雷公藤多苷对过敏性紫癜性肾炎模型大鼠的作用机制。方法 腹腔注射卵白蛋白与完全弗氏佐剂复制过敏性紫癜性肾炎大鼠模型。将造模成功的54只大鼠按照随机数字表法分为模型组(n=11)、清热止血方组(3.17 mg/kg,n=11)、雷公藤多苷组(4.69 mg/kg,n=11)、联合组(清热止血方3.17 mg/kg+雷公藤多苷4.69 mg/kg,n=11)、激素组(醋酸泼尼松2.34 mg/kg,n=10),另设空白组(n=9)。各给药组给予相应药物灌胃,空白组及模型组予等量的生理盐水灌胃,2次/d,连续灌胃4周。采用尿液分析仪检测大鼠尿红细胞计数及24 h尿蛋白定量;采用透射电镜观察大鼠肾小球系膜区病变情况;采用蛋白质印迹法及实时荧光PCR法检测大鼠肾脏组织硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)的蛋白及mRNA表达量。结果 与模型组比较,各给药组大鼠尿红细胞计数,24 h尿蛋白定量,肾脏组织中TXNIP、NLRP3、Caspase-1蛋白表达量均降低(...     

黄豆苷元胶囊治疗围绝经期综合症疗效观察

目的评价黄豆苷元胶囊治疗围绝经期综合症的有效性。方法60例围绝经期妇女随机分为黄豆苷元组(32例)和对照组(28例),黄豆苷元组口服黄豆苷元胶囊150mg·d-1,对照组口服倍美力片0.625mg·d-1,两组连续治疗3个月。用药前及用药3个月后观察围绝经期征候群,测血清E2,FSH,LH及脂蛋白,并观察药物不良反应。结果两组围绝经期征候群均有显著改善,FSH,LH均显著下降,E2均显著上升,两组比较差异无显著性;两组TC,TG,LDL均有明显下降,HDL略有上升,黄豆苷元组变化略大于对照组,但差异无显著性。胃肠道反应、阴道出血、乳房肿胀发生率黄豆苷元组分别为:12.5%,0,0,对照组分别为:42.9%,75%,21.4%,两组比较有显著差异。结论黄豆苷元胶囊对围绝经期综合征有显著疗效,而且药物副作用小。     

柚皮苷抑制低氧/复氧致大鼠心肌细胞系H9c2损伤

目的研究柚皮苷(NAR)对H9c2低氧/复氧(H/R)损伤心肌细胞内质网应激的影响。方法将H9c2心肌细胞随机分为对照组(C组)、低氧/复氧组(H/R组)低氧4 h后复氧24 h、柚皮苷10、20和40μg/mL组。于低氧前6 h给予柚皮苷培养再行低氧4 h后复氧24 h。实验后TUNEL检测心肌细胞凋亡;Western blot检测GRP78、ATF6、Bax及Bcl-2蛋白表达。结果与对照组相比,H/R组细胞凋亡增加,GRP78、ATF6、Bax蛋白表达和Bax/Bcl-2比率显著上调,而Bcl-2蛋白表达显著下调(P0.05);与H/R组比较,柚皮苷3个剂量组均可使细胞凋亡减少,GRP78、ATF6、Bax、Bax/Bcl-2比率下调,Bcl-2上调(P0.05),尤其以柚皮苷20和40μg/mL组作用最显著。结论柚皮苷预处理可以降低细胞凋亡,其机制可能与抑制内质网应激有关。