单底物一步法测定血清脂肪酶及其临床应用

目的 介绍一种脂肪酶（Lipase,LPS)测定的新方法,并探索其临床应用。方法 采用一个大分子有机物作单底物的一步速率法,结果 该法零级反应长达15min以上,线性范围0-1500U/L,CV1.8%-7.8%之间。与比浊法相比r=0.998。临床观察38例急性胰腺炎,同时测定胰淀粉酶,二酶呈高度相关。结论 本法简单、准确,稳定,可与淀粉酶一起用作急腹症的常规测定。     

酶法和Jaffe速率法测定血清肌酐的方法学比较

目的了解酶法和Jaffe速率法测定血清肌酐结果的偏倚大小,为室间评估结果分组提供依据.方法按照美国全国临床实验标准委员会(NCCLS)EP9-A文件进行评估,将测得的数据进行相关回归分析,计算两方法间的偏倚.结果酶法和Jaffe速率法测定肌酐,其回归方程式Y=1.005X+17.9(Y为Jaffe速率法,X为酶法),相关系数r=0.998,有明显恒定偏倚.结论必须对不同方法原理的肌酐室间评估结果作分组处理.     

酶法测定糖化白蛋白的方法学评价及其与糖尿病诊断的相关性研究

目的对酶法测定糖化白蛋白(GA)进行方法学评价,验证其作为临床常规方法的各项性能指标。研究糖尿病患者糖化血红蛋白(HbA1c)和GA的相关性,为糖尿病早期诊断和治疗效果监测提供更好的方法。方法按美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP10-A3文件对酶法测定GA的精密度、线性、偏差、互染率、漂移性进行评价。测定336例糖尿病患者GA和HbA1c浓度,研究其变化并进行相关性分析。根据美国糖尿病学会(ADA)标准(HbA1c7%为血糖控制良好、7%~8%为血糖控制一般、8%为血糖控制不佳),采用受试者工作特征(ROC)曲线确定GA/HbA1c比值评估血糖控制程度的临界值。结果酶法测定GA的总平均不精密度为1.62%,平均偏差为7.58%,截距、斜率、非线性、互染率、漂移性均可接受;非线性参数检测高值存在正向偏移,需要进行进一步观察以确认方法的线性性能,但对临床诊断不会带来影响。GA与HbA1c诊断糖尿病的一致性较好,为88.1%;两者相关系数(r)为0.879(P0.01)。ROC曲线显示GA/HbA1c比值评估血糖控制程度的最佳临界值为2.60,敏感性为86.8%、特异性为70.1%;如GA/HbA1c比值2.60,可认为血糖控制不佳。结论酶法测定GA的方法学性能符合常规检测质量标准。GA可用于糖尿病的诊断和疗效评估。GA/HbA1c比值可作为监测血糖控制的补充指标。     

观察生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的干扰因素分析以及改进措施

目的分析探讨生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸的干扰因素分析。方法选取2015年1~3月该院收集的混合血清标本20份作为检测标本。该次研究所有的检测仪器为贝克曼DXC800全自动生化分析仪。该次研究所涉及的常规生化试剂有总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和尿酸(UA),TBA测定方法为酶循环法。观察特殊清洗前后生化试剂组合TBA测量结果。结果生化试剂处理前,TC/TBA为(8.12±0.03)μmol/L,TG/TBA为(218.03±6.45)μmol/L,HDL-C/TBA为(8.13±0.05)μmol/L,LDL-C/TBA为(184.01±5.16)μmol/L,UA/TBA为(474.11±10.24)μmol/L。经统计学检验,TG、LDL-C以及UA对TBA有影响(P0.05)。生化试剂处理后,TC/TBA为(8.13±0.05)μmol/L,TG/TBA为(8.12±0.03)μmol/L,HDL-C/TBA为(8.12±0.03)μmol/L,LDL-C/TBA为(8.12±0.04)μmol/L,UA/TBA为(8.12±0.04)μmol/L。经统计学检验,特殊清洗处理后生化试剂对TBA无影响(P0.05)。结论生化试剂对循环酶法测定血清总胆汁酸有干扰。因此,要提高改进措施如加强清洗及科学性的有序检测从而避免污染,保证检测结果准确性。     

改良酶法肌酐测定试剂的研制

目的探讨建立一种改良酶法肌酐(Cr)测定试剂,并考察其与进口Cr测定试剂(日本东洋纺公司酶法Cr试剂)对血清测定的可比性及偏倚。方法采用酶法测定Cr反应前后吸光度的变化,探讨试剂各成分和浓度对检测性能的影响,并在同一台全自动生化分析仪上同时测定两种试剂的空白吸光度(A值)、分析灵敏度,对自主研发试剂的精密度、线性范围及方法学指标进行评价。结果自主研发试剂的空白A值为0.009,分析灵敏度的A值变化率为0.13,优于进口试剂。自主研发试剂高、低值血清测定变异系数分别为1.5%和1.1%;线性范围为0~2 850μmol/L;方法学比对回归方程为Y=0.98 X+1.15,r=0.999;估计偏倚低于允许误差。以相对偏差不小于10%作为有明显干扰的评判指标,结果显示35mmol/L肌酸、3.42mmol/L胆红素、0.03g/L维生素C、5g/L血红蛋白、1 450浊度乳糜对高、低值浓度标本检测结果均无干扰。结论自主研发的Cr测定试剂性能良好,与进口试剂之间具有良好的相关性,符合临床应用基本要求。     

纯水机中活性炭芯对生化仪酶法测定肌酐的影响及消除

近年来随着大中型全自动生化分析仪的广泛应用,纯净水制备机的使用也日渐普遍[1].生物化学实验用水的质量直接影响试验结果的准确性,纯水机在给检验科带来高质量分析用水的同时,也随之带来了一笔不小的材料消费,为了降低成本,有些实验室对纯水机中的炭芯等消耗品长时间使用,常常使得部分检验结果因此造成测定误差.     

大鼠中脑中央灰质与前脑结构的联系——HRP逆、顺行追踪研究

在22只体重140g左右的SD大鼠,用HRP逆行和顺行追踪方法(TMB-ST法成色),研究了中脑中央灰质(CG)与前脑结构的联系。按照泳注中心位置,将实验材料分作背侧区(CGD)、内侧区(CGM)和外侧区(CGL)三组。三组逆行标记细胞分布没有明显差别。在大脑皮质(以扣带前、压后和额叶皮质为著)、终纹床核、视前区、广泛的下丘脑结构(以下丘脑前区、背侧区、灰结节区、外侧区以及下丘脑腹内侧核、背侧乳头体前核为著,下丘脑室旁核亦见标记细胞)以及未定带、缰外侧核等结构察见标记细胞,均以同侧为主。值得注意的CGL组在终板血管器观察到相当丰富的标记细胞,CGM组在邻近弓状核的室管膜内见相当典型的标记细胞。顺行标记纤维主要循同侧背侧纵束、室周纤维系统和内侧前脑束上行,部分向背颅侧或外颅侧方向穿中脑顶盖或网状结构行进。CGD组达束旁核、丘脑室旁核、外侧和内侧缰核、下丘脑脑后区、未定带、乳头体上核、背侧下丘脑区、下丘脑前区、丘脑后核和顶盖前区。CGM和CGL组延伸较远,除至以上部位外,还可抵达未定带下核、Forel区、背侧乳头体前核、下丘脑室旁核、内侧和外侧视前区、斜角带、终纹床核丘脑中线区和内髓板区等部位。     

运用甘油磷酸氧化酶法测定冰冻红细胞解冻后残留甘油的含量

目的 建立测定冰冻红细胞解冻洗涤后残留甘油含量的酶学方法测定工艺.方法 进行甘油磷酸氧化酶法的线性范围测定、重复性、准确性(回收试验)、游离血红蛋白干扰试验,并比较不同样本处理方法(钨酸钠裂解法、三氯醋酸裂解法及制备后2h直接取上清液法)对酶法检测甘油的影响;进行系列浓度甘油红细胞酶法测定结果与传统过碘酸钠滴定法测定结果比对.结果 用GPO-PAP法检测甘油浓度在0.05～2.0 g/L时有较好的线性关系,,=0.9994,Y=0.942 X+0.0239;甘油含量为0.2 g/L、1.0 g/L的样本,批内CV值分别为2.68％、0.81％(n=20),日间CV值分别为4.59％、4.37％(n=20);甘油浓度从0.29～2.09 g/L间其回收率97.1％～100.8％,样本的平均回收率为99.0％;10g/L游离血红蛋白对GPO-PAP法检测结果无干扰;3种样本处理方法所测得的系列浓度甘油红细胞样品及解冻去甘油红细胞制品(n=18)酶法测定结果一致(P＞0.05);系列浓度甘油红细胞测定结果显示酶法测定比滴定法更准确,滴定法测定值偏高.结论 甘油磷酸氧化酶法可用于冰冻解冻去甘油红细胞制品中残留甘油含量的测定,方法简便、快速、准确、重复性好.3种样本处理方法对GPO-PAP法检测甘油含量无影响.     

7010A生化仪测钾酶法时间点位探讨

测定时间点(ΔT=T2-T1)应处在酶催化的零级反应阶段.正确选择时间位点对酶活性浓度的准确性至关重要,本文应用紫外酶法2PUNDT,2点定标在HITACHl71 70A型全自动生化分析仪上应用RANDoX试剂盒参数2-21-27时间位点与自设2-20-28时间位点进行比较,延长酶促反应时间,使底物反应彻底,提高了精密度和准确性.检测结果的重复性比较恒定.