应用DHPLC技术分析错配修复基因(hMLH1)T1151A多态与胃肠道肿瘤的遗传易感性

目的了解中国人hMLH1基因T1151A多态与胃肠道肿瘤的遗传易感性.方法采用病例对照研究设计,提取233例大肠癌(结,直肠癌)患者,273例胃癌患者和268例健康人外周血细胞的基因组DNA.PCR扩增hMLH1基因T1151A多态所在第12外显子的部分DNA片段(217 bp),变性高效液相色谱(DHPLC)检测,DNA测序验证,比较分析T1151A基因型在胃肠道肿瘤的分布.结果正常人群中T1151A多态T/A基因型频率为6.34%,其等位基因A频率为3.28%,在大肠癌患者和胃癌患者中T/A基因型频率与正常人群相比存在显著性差异,分别为11.6%(P=0.039)和12.1%(P=0.021),尤其在＜45岁的大肠癌患者和＜50岁的胃癌患者中,等位基因A频率与正常人群相比差异更为显著,分别为10.66%(P=0.002)和11.27%(P=0.001).结论T1151A作为中国人hMLH1基因上的一个多态位点,可能是中国人大肠癌和胃癌遗传易感因素,可作为中国人胃及大肠肿瘤、尤其是低龄胃及大肠肿瘤高危人群筛选的侯选指标.     

AFP启动子调控PNP载体的构建及分析

目的分别构建三种启动子调控的大肠杆菌嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)基因表达载体,检测、分析三者的表达差异.方法构建三种启动子调控的PNP基因表达载体.将三个PNP基因载体转染不同细胞株,检测PNP基因在各细胞株中表达,分析三者表达的特点.结果AF 0.3和[HRE]AF调控的PNP基因在AFP阳性肝癌细胞中实现了靶向性表达,而且后者在AFP阴性肝癌细胞中也实现了靶向性表达.结论三种PNP基因表达载体的成功构建为利用PNP/MeP-dR系统进行肝癌的靶向性基因治疗打下坚实的基础.     

XRCC1多态性与非吸烟女性肺腺癌易感性的关系

背景与目的XRCC1是一种DNA损伤修复基因，其单核苷酸多态性异常是导致DNA修复能力个体差异的重要原因，可能导致个体患肺癌的危险升高。本研究的目的是探讨XRCC1单核苷酸多态性与非吸烟女性肺腺癌易感性的关系。方法采用以医院患者为基础的病例对照研究方法，研究对象包括非吸烟女性肺腺癌患者126例和同期其它肺部疾病对照126例。以聚合酶链反应一限制性片段长度多态性方法分析XRCC1基因Arg399Gln多态性，比较不同基因型与非吸烟女性肺腺癌的关系，并探讨油烟暴露与基因多态交互作用对患癌风险的影响。结果与携带399Arg／Arg基因型者比较，携带399Gln／Gln基因型者患肺腺癌的风险是其8．695倍（95％CI为3．343～22．614）。携带等位基因399Gln又有油烟暴露的个体患肺腺癌的风险明显增高，校正的比值比为5．21（95％CI为1．85～14．70，P〈0．001）。结论XRCC1基因Arg399 Gln多态性可能是非吸烟女性肺腺癌的遗传易感因素。     

维生素E琥珀酸酯诱导耐药白血病K562/ADM细胞凋亡的研究

目的:研究维生素E 琥珀酸酯(vitamin E succinate , VES)对多药耐药白血病K562/ADM细胞的诱导凋亡作用及分子机制。方法: 以体外培养的K562/ADM细胞为研究对象,采用噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT) 比色法检测细胞增殖活性, Wright Giemsa染色、DNA凝胶电泳和流式细胞术(flowcytometry, FCM)检测细胞凋亡;FCM测定细胞Fas、Bcl-2 和p53 蛋白表达水平。结果:VES可显著抑制K562/ADM细胞的生长及增殖,P= 0 .004。光镜下可见K562/ADM细胞呈典型凋亡的形态学改变。DNA凝胶电泳显示典型的凋亡DNA梯形条带。FCM细胞周期分析显示,G1 期阻滞,亚G1 期细胞比例增高,P=0 .005;Fas蛋白表达明显上调,P=0. 002;Bcl -2蛋白表达下调,P=0. 000;p53蛋白表达无明显变化。结论:VES可诱导K562/ADM细胞凋亡,作用机制可能与其上调Fas表达和下调Bcl 2表达有关。     

DNA修复基因hOGG1多态与肺癌遗传易感性

背景与目的 :研究修复8_羟基鸟嘌呤的hOGG1基因Ser326Cys多态与中国人肺癌易感性的关系。 材料与方法 :采用病例_对照分子流行病学方法 ,以PCR_限制性片段多态(Restrictionfragmentlengthpolymorphism,RFLP)技术 ,对128名正常对照和124例肺癌患者hOGG1基因第326位点Ser/Cys多态性进行分析 ,并比较不同基因型与肺癌发病危险的关系。 结果: 对照组和肺癌组人群的Cys等位基因频率基本相同(37.5 %和39.9 %) ,但肺癌组的Cys/Cys基因型频率为19.4 % ,高于对照组的10.2 %。与携带Ser/Ser或Ser/Cys基因型者比较 ,携带Cys/Cys基因型个体患肺癌的危险约增加1倍(OR^ =2.12 ,95 %CI=1.03～4.39)。 结论: hOGG1基因Ser326Cys多态可能与中国人肺癌易感性相关 ,可以作为肺癌遗传易感性标志物 ,用于易感个体的预警和预防。     

5氮杂胞苷诱导NB细胞Caspase 8表达及对TRAIL敏感性的研究

目的探讨5氮杂胞苷(5-Azacytidine)对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand,TRAIL)诱导神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)细胞株SH-SY5Y凋亡的影响及其发生机制.方法应用RT-PCR方法检测5氮杂胞苷作用前后SY5Y细胞Caspase 8的表达;应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪(FCM)检测TRAIL、5氮杂胞苷+TRAIL、5氮杂胞苷+Caspase 8抑制剂+TRAIL对SY5Y细胞生长及凋亡的影响.结果SY5Y细胞不表达Caspase 8,5氮杂胞苷作用1、3和5d的SY5Y细胞Caspase 8表达逐渐增加;SY5Y细胞对TRAIL不敏感,经5氮杂胞苷诱导表达Caspase 8的 SY5Y 细胞对TRAIL敏感,并呈现一定的时间和剂量依赖性.联合用药组细胞凋亡率分别为(28.6±4.0)%、(38.5±4.2)%和(42.3±6.2)%,与单独用TRAIL组[(9.5±2.0)%、(10.7±1.8)%和(11.2±1.5)%]比较,差异有统计学意义,F值分别为41.131、45.014和49.405,P值均为0.000;Caspase 8抑制剂组细胞凋亡率分别为(11.8±2.0)%、(13.5±2.9)%和(15.1±3.4)%,与相应浓度的5氮杂胞苷+TRAIL组相比,细胞凋亡率明显降低,F值分别为41.131、45.014和49.405,P值均为0.000,说明Caspase 8抑制剂可明显降低TRAIL对表达Caspase 8的SY5Y细胞的杀伤作用.结论5氮杂胞苷能增强SY5Y细胞对TRAIL的敏感性,其发生机制可能与Caspase 8表达上调有关.     

紫杉醇诱导黑色素瘤A375细胞凋亡的分子机制

目的:探索紫杉醇对A375细胞的诱导凋亡作用及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测紫杉醇对细胞增殖能力及细胞生长的影响;流式细胞仪分析及细胞形态学观察检测细胞周期和细胞凋亡;Westernblot方法检测bcl2、Bax和Caspase3蛋白表达。结果:0.001～1.000μmol/L紫杉醇以时间和剂量依赖方式抑制A375细胞生长和诱导细胞凋亡,0.000～1.000μmol/L紫杉醇作用24h时,早期细胞凋亡率由(0.5±0.1)%增至(32.4±1.1)%,P<0.05,0.100μmol/L紫杉醇作用24和48h时,早期细胞凋亡率由(20.9±0.9)%增至(52.6±1.0)%,t=28.89,P=0.001;不同浓度紫杉醇诱导A375细胞凋亡的机制不同,0.001μmol/L时不影响细胞周期,0.010μmol/L时使G0/G1期细胞含量明显减少,0.100和1.000μmol/L时使细胞发生G2/M期阻滞。紫杉醇作用24h后,Caspase3被激活,同时bcl2和Bax蛋白表达分别被下调和上调。结论:紫杉醇可诱导A375细胞凋亡,bcl2/Bax蛋白比值的下降及Caspase3的激活参与了该细胞凋亡过程,但高浓度紫杉醇通过作用微管,低浓度紫杉醇则通过尚不清楚途径实现细胞凋亡过程。     

医学检验专业药理学教学初探

药理学是医学检验专业的必修课程，如何提高教学效果，本文从重视教师教学基本能力的训练、了解检验专业学生培养目标、加强教学针对性、综合运用多种教学法、促进教学互动、改善教学手段、提高学生学习兴趣、重视学生反馈、教学相长等方面进行探讨。     

CYP2C9基因多态性与药物代谢及疾病关系研究进展

细胞色素氧化酶CYP2C9在药物和内源性物质代谢中起重要作用，其基因具有遗传多态性。这种多态性与药物代谢能力的差异和某些疾病发生有相关性。     

药物代谢中的药酶特性与临床研究近况

目的:为了促进药物代谢酶在临床上的深入研究。方法:以近几年国内外大量有代表性的论文为依据进行分析、归纳、整理。结果:药物代谢酶大多具有遗传多态性,其活性受相关药物影响,遗传多态性和药物之间代谢性相互作用是临床药物反应千变万化的重要因素。结论:药物代谢酶的认识和研究有助于临床合理用药和减少药物不良反应。