人巨细胞病毒感染Balb/c小鼠椎间盘的相关检测

目的 建立人巨细胞病毒(HCMV)感染Balb/c小鼠模型,探索HCMV感染椎间盘的依据.方法 取不同剂量组HCMV AD169株腹腔注射6～8周SPF级Balb/c小鼠♀♂各6只,同时设立灭活病毒对照组6只和细胞对照组6只.取各组小鼠椎间盘组织进行病毒分离与鉴定;采用PCR和RT-PCR分别检测HCMV UIJ83基因和UL154基因及其相应基因的转录;取椎间盘组织行HE染色病理并观察.结果 2×106和2×105 PFLJ/ml病毒组♀小鼠病毒分离、PCR及RT-PCR均为阳性;HE染色可见椎间盘组织局部灶性淋巴细胞浸润等慢性炎症反应,纤维环板层结构紊乱,关节软骨钙化层增厚,大量黏液及泡沫细胞,软骨下血管明显减少.♂小鼠、其它剂量病毒组、灭活病毒组和HF对照组均为阴性.结论 HCMV可以感染小鼠椎间盘组织,并与感染病毒剂量有关;人巨细胞病毒感染与椎间盘变性有相关性,可能是椎间盘退变的一个重要危险因素.     

HCMV感染介导的椎间盘组织退变模型的病理学观察

目的 探讨HCMV感染Balb/c小鼠对椎间盘退变及病理学改变的模型研究,活体Balb/c小鼠模型导入组织学、基因表达、免疫学的研究,确定人巨细胞病毒注射到腹腔对椎间盘退变的影响及不同剂量的对照性研究。方法 （1）随机选取6-8周SPF级Balb/c小鼠84只,建立五个不同感染量HCMVAD169株感染Balb/c小鼠模型雌雄各6只为感染组（A组）,同时设立病毒灭活组（B组）和细胞对照组（C组）雌雄各6只;（2）间接ELISA法检测小鼠血清中的IgG、IgM抗体水平,取各组小鼠椎间盘组织进行病毒分离,采用PCR和RT-PCR分别检测HCMVUL83基因和UL54基因转录产物;（3）取各组小鼠椎间盘组织行病理学观察。结果 A组和B组小鼠IgG抗体均为阳性,C组为阴性,小鼠IgM抗体仅A组中2×106PFU/ml和2×105PFU/ml感染组雌性小鼠为阳性;上述两感染组小鼠病毒分离、PCR及RT-PCR均为阳性,病理学可见椎间盘组织髓核细胞数目减少,排列不均匀,纤维环结构紊乱;雄性小鼠、其余A组、B组和C组均无明显变化。结论 HCMV注射后似乎能逐渐诱导椎间盘退变,出现病理学改变;该模型对椎间盘退变的分子水平研究有显著的优势;进一步研究将会阐述HCMV介导椎间盘退变相关的分子学等机制和过程。     

Balb／鼠尾胶原与大鼠尾胶原对新生Balb／C鼠脑细胞培养的影响

目的 确定鼠脑细胞体外培养的适宜生长基质。方法 以Balb/C鼠尾胶原与大鼠尾胶原作为生长基质,培养新生Balb/C鼠脑细胞。结果 Balb/C鼠尾胶原有利于神经元的生存、生长与分化,而大鼠尾胶原则利于星形胶质细胞的生存、生长、分化与增殖。结论 2种鼠尾胶原均为培养鼠脑细胞适宜的生长基质,培养1个月左右宜用Balb/C鼠尾胶原而长期培养则宜选择大鼠尾胶原。     

C57BL/6小鼠系膜增生型肾小球肾炎的复制

目的：探索一种复制小鼠系膜增生型。肾小球。肾炎动物模型的方法。方法：80只C57BL／6小鼠随机分为4组（每组20只）：A-正常对照组；B-竹叶青蛇毒2mg／kg注射组；C-竹叶青蛇毒4mg／kg注射组；D-竹叶青蛇毒6mg／ks注射组。按照分组要求计算B、C、D3组小鼠中每只小鼠需注射的竹叶青蛇毒的总量，配制3种不同浓度的竹叶青蛇毒液，B、C、D3组小鼠分别尾静脉注射不同浓度的竹叶青蛇毒液0．2mL，A组小鼠尾静脉注射生理盐水0．2mL以进行对照。结果：竹叶青蛇毒注射后的小鼠均出现中毒性症状。C、D组小鼠因蛇毒注射剂量较大，死亡率高达50％，且集中于前3d内死亡，3d后中毒小鼠的活动基本如常。B组与正常对照组小鼠无死亡。中毒小鼠的肾功能与正常对照组相较无明显差别，但均出现了肾小球系膜细胞增生，系膜基质增多，肾小球及间质内炎性细胞浸润等病理学改变。结论：竹叶青蛇毒尾静脉注射是一种复制小鼠系膜增生型肾小球肾炎动物模型的较好的方法。     

呼吸道合胞病毒诱发的哮喘小鼠模型的建立

[目的]探讨建立呼吸道合胞病毒诱发的哮喘小鼠模型的方法，为研究哮喘发病机理、筛选有效的治疗药物奠定基础。[方法]随机将BALB／C小鼠分成正常对照和模型组两组。用福尔马林灭活的呼吸道合胞病毒（FI-RSV）致敏、激发模型组小鼠，观察激发后小鼠的哮喘症状；分别于激发后0、24、48、72h处死动物，摘眼球取血分离血清，ELISA测定血清IgE、IL-4、IFN-γ水平；取肺组织行HE染色，观察支气管黏膜及黏膜下炎症细胞浸润及EOS的浸润情况。[结果]模型组小鼠激发即刻可见典型的哮喘症状。激发后24h肺组织炎症细胞浸润最多。模型组小鼠血清IgE、IL-4水平均低于正常对照纽；IFN-γ均高于正常对照组；模型组小鼠激发后24h血清IgE、IL-4水平最高，IFN-γ水平最低（P〈0．05或P〈0．01）。结论：FI-RSV复制BALB／C小鼠哮喘模型成功可行，且24h小鼠哮喘模型较理想。     

4个与营养代谢相关基因对小鼠的血清生化指标的影响

目的研究4个与营养代谢相关基因(DL、Tr、Pe、P3)对BALB/c小鼠的血液生化指标的影响。方法将4个基因的反义核酸微量定量注入小鼠侧脑室。设反义核酸实验组、随机序列核酸对照组和生理盐水对照组3组;3次注射后于第4天取血清进行生化指标测定。结果DL和Tr实验组与对照组分别在6项指标上有显著性差异,Pe实验组、P3实验组与对照组分别有4项和3项指标有显著性差异。结论3个反义核酸实验组(DL、Tr和P3)BABL/c小鼠的血中甘油三酯含量都显著高于对照组,尤其是Tr反义核酸实验组的胆固醇含量也显著高于对照组,且都超出正常值范围,进一步证明Tr基因与脂类代谢有一定的相关性。另外上述3个反义核酸实验组(DL、Tr和P3)的血中葡萄糖含量也明显高于对照组并超出正常值范围,说明这些基因还可能与糖代谢相关。     

胎猪皮肤前体组织异种移植模型的研究

目的探讨胎猪皮肤前体组织异种移植模型及移植后发育过程。方法取精确胎龄为56d的胎猪皮肤前体组织,分组进行移植,①背部创面模型组：制备成微粒皮后移植到BALB／c裸鼠背部创面,以人尸体皮覆盖;背部皮下模型组：制备成小张邮票皮,植入裸鼠背部皮下;耳廓皮下模型组：制备成微粒皮植入裸鼠耳廓皮下。各组于移植后观察其生长发育特性,并于移植后6周和12周取材行HE染色观察其组织结构形态。新生组织块大小采用双样本t检验。结果各模型的胎猪皮肤前体组织移植后均能存活并继续生长,背部创面模型组生长能力显著大于耳廓皮下模型组,新生皮肤组织均具有真皮和表皮,耳廓皮下模型的真皮附属器仅见毛囊（毛发）．偶见皮脂腺,未见汗腺,但是背部创面模型组及背部皮下模型组不仅能发育成毛囊（毛发）、还见大量皮脂腺和汗腺。结论背部创面移植模型最适合于胎猪皮肤前体组织异种移植及移植后发育的研究。     

胎鼠肺发育中PI3K-AKT信号传导通路效应物表达

目的 探讨1-磷脂酰肌醇3-激酶-丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶B(PI3K-AKT)信号传导通路效应物在胎鼠肺发育过程中的表达.方法 运用Western蛋白印迹方法 检测不同胎儿期鼠肺上皮细胞中AKT、磷酸化AKT (pAKT)及相关蛋白的表达.运用免疫组织化学方法 检测不同胎儿期鼠肺上皮细胞中pAKT的表达水平.结果 Western 蛋白印迹法显示,AKT在不同胎儿期肺上皮细胞中的蛋白表达无明显差异;第12天胎鼠肺pAKT高度表达,第14天开始减少;第12天胎鼠肺cyclinD1高度表达,第14天开始减少;第12天胎鼠肺SPC低度表达,第14天开始逐渐增加.免疫组织化学法显示,第14天胎鼠肺上皮细胞中pAKT高度表达,第18天胎鼠肺上皮细胞中pAKT无明显表达.结论 PI3K-AKT信号传导通路通过许多生物过程在胎鼠肺发育中起重要作用.     

地磁场对小鼠行为的影响

目的:研究地磁场对小鼠行为的影响.方法:12只雌性BALB/c小鼠,随机分为4组:磁屏蔽A组和磁屏蔽B组,均饲养于磁屏蔽室中,屏蔽地磁场来模拟零磁空间;地磁C组和地磁D组,均暴露于地磁环境中.各组饲养环境(温度、湿度、光照强度等)均相同.1 d后,利用UGO-7431行为分析仪定量检测小鼠的行为学指标,每组的测试周期长度设定为10 min/次,实验次数设定为6次(n=6),并进行统计学分析.结果:①磁屏蔽A组和磁屏蔽B组之间比较,水平向活动强度HA(1865.2±92.6 vs 1890.8±130.1)和垂直向活动强度VA(94.0±11.5 vs 95.2±10.8)的检测结果均无显著性差异(P>0.05);②地磁C组和地磁D组之间比较,HA(1427.0±56.3 vs 1389.5±47.4)和VA(70.7±6.2 vs 66.3±5.6)的检测结果均无显著性差异(P>0.05);③磁屏蔽A组和磁屏蔽B组分别与地磁场C组和地磁D组比较,HA和VA的差异均具有统计学意义(P<0.05).结论:屏蔽地磁场后,小鼠在零磁空间环境下行为学指标变化显著,表现为亢奋、烦躁,证实地磁场与动物的日常行为息息相关.     

脐血源性T淋巴细胞在白血病小鼠体内存活及浸润状况的研究

目的研究脐血源性T淋巴细胞在小鼠体内的存活、浸润情况,为深入探讨脐血源性T淋巴细胞过继性输注治疗白血病提供实验和理论依据。方法24只红白血病小鼠随机分为对照组和试验组。将分离制备的脐血源性T淋巴细胞标记后经尾静脉移植入白血病小鼠体内,采用免疫荧光、免疫组织化学等方法观察脐血源性T淋巴细胞在小鼠体内的存活时间及浸润状况。结果①移植后第3、7、14天在实验组小鼠外周血、肝和脾组织中均可检测到人CD3+细胞和Brdu+细胞;②实验组小鼠肝、脾组织内均见CD25+细胞散在浸润。结论脐血源性T淋巴细胞能在白血病小鼠体内存活并趋化至白血病细胞浸润部位。