口腔链球丙酮酸氧化酶的克隆和序列分析

目的 阐明血链球菌产生过氧化氢及其调节的分子机理。方法 根据已知的肺炎链球菌丙酮酸氧化酶基因（spxB）序列设计PCR引物,扩增血链球菌ATCC10557的丙酮酸氧化酶基因,以pUC18及M13mp18、M13mp19为载体进行克隆和亚克隆,并进行序列分析。结果 成功地从血链球菌ATCC10557扩增出丙酮酸氧化酶基因,获得该基因的全部序列（1788bp),具有完整的开放读框,能编码591个氨基酸的多肽。结论 血链球菌丙酮酸氧化酶基因的克隆和序列分析,为进一步研究调节血链球菌产生过氧化氢的分子机理打下了基础。     

2-Cys peroxiredoxins的研究进展

Peroxiredoxins是新近发现的抗氧化酶家族成员,广泛存在于各种生物体内。2-Cys Peroxiredoxins(2-Cys Prxs)是其中一个亚类,具有独特的催化特性和可逆性过氧化循环。2-Cys Prxs在细胞内主要起抗氧化和调节过氧化氢(H2O2)介导的信号转导作用,还参与细胞周期进程以及发挥分子伴侣作用。     

表达幽门螺杆菌过氧化氢酶的减毒沙门氏菌疫苗株的构建及其免疫保护作用的观察

目的 探讨表达幽门螺杆菌（Hp)过氧化氢酶（KatA)的减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株在防御Hp感染中的作用。方法 构建表达KatA的重组质粒,用IPTG进行诱导表达,再将其转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261株中构建成口服活疫苗株,经口服免疫C57BL/6小鼠,并以Hp翻尼株进行攻击,用快速尿素酶试验和Hp定量培养对胃粘膜中的Hp进行检测。结果 SDS-PAGE凝胶电泳上显示一条相对分子质量约79000的新生蛋白带,占细菌总蛋白的19%,并能与抗谷胱甘肽-s-转移酶（GST）抗体发生特异性反应,动物实验结果显示;免疫小鼠能有效防御Hp的感染,结论 表达KatA的减毒沙门氏菌疫苗株能诱导抗Hp保护性免疫反应,有望在Hp感染及其相关性疾病的防治中发挥积极作用。     

酞菁钴作为双功能模拟酶的研究

设计并合成4种金属酞菁(六羧基酞菁钴、四羧基酞菁钴、六磺酸基酞菁钴、四磺酸基酞菁钴)作为SOD和CAT双功能模拟酶。对其仿SOD和CAT的部分生物学功能进行检测。结果显示核黄素-蛋氨酸光明法证实它们在10-5～10-6mol/L浓度范围内有清除O2-的作用;分光光度法证实它们能催化H2O2的分解,且分解率随浓度增大而增大;用小鼠肝匀浆法测定4种金属酞菁、SOD和CAT,均表明有良好抗脂质过氧化作用;用多形核白细胞（PMN）-鲁米诺化学发光测定呼吸爆发中的活性氧,表明模拟酶对活性氧有清除作用;大鼠心脏缺血再灌注实验表明六羧基酞菁钴能降低活性氧对心肌的损伤程度,对再灌注损伤心肌有保护作用。     

金属卟啉作为双功能模拟酶的研究

根据超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性结构相似原理,作者首次提出金属卟啉化合物可作为SOD和CAT双功能模拟酶,并对合成的4 种金属卟啉[四-(对磺酸基苯基)卟啉铁、四-(对磺酸基苯基)卟啉铜、四-(对磺酸基苯基)卟啉锰、四-(对磺酸基苯基)卟啉钴]进行了仿SOD和CAT的部分生物学功能检测 .结果显示:核黄素-蛋氨酸光明法证实它们在10-5～10-6mol/L浓度范围内有清除O(*2)-的作用;分光光度法证实它们能催化H2O2 的分解,且分解率随浓度增大而增大;用小鼠肝匀浆法测定4种金属卟啉、SOD和CAT,均表明有良好抗脂质过氧化作用;大鼠心脏缺血再灌注实验表明四-(对-磺酸基苯基)卟啉锰能降低活性氧对心肌的损伤程度, 对再灌注损伤心肌有保护作用.     

αB-晶状体蛋白在保护过氧化氢所致心肌细胞损伤中的作用

采用热休克对新生大鼠心肌细胞进行预处理 ,以诱导αB 晶状体蛋白的表达 ,并观察其对 1mmol·L- 1 的过氧化氢 (H2 O2 )所致心肌细胞损伤的保护作用。发现 :热休克预处理组心肌细胞中αB 晶状体蛋白表达明显增加 ,H2 O2 所致的细胞死亡率及LDH释放率降低 ,总抗氧化能力增强 ;H2 O2 可引起αB 晶状体蛋白从胞浆向胞核及微丝移位。提示热休克预处理的心肌细胞保护作用与其诱导αB 晶状体蛋白的表达增加有关。αB 晶状体蛋白可能通过细胞内移位 ,保护某些核结构 ,稳定细胞骨架 ,并增强心肌细胞抗氧化能力 ,从而发挥其保护作用     

锰超氧化物歧化酶过表达对H2O2诱导PC12细胞凋亡的影响

目的 揭示锰超氧化物歧化酶（MnSOD）在H2O2诱导PC12细胞凋亡中的作用及机制。方法 转染人正义和反义MnSOD基因的PC12细胞,用50 mmol H2O2攻击已转染的细胞系,并采用MTT法、流式细胞术和 Hoechst染色方法研究H2O2的细胞毒作用。结果 转染正义MnSOD的细胞比原细胞的MnSOD酶活性提高1.3倍,而转染反义MnSOD细胞的酶活性降低67%。结论 H2O2对PC12细胞毒作用是通过诱发PC12细胞凋亡作用来实现的;MnSOD具有抑制H2O2诱导PC12细胞凋亡作用,涉及线粒体的损伤,导致氧化还原失衡继而诱发细胞凋亡。     

三七中人参皂甙对老年鼠血液中抗氧化酶活力影响的研究

对５８例实验小鼠模型的研究以期为三七中人参皂甙单体Ｒｂ１及Ｒｇ１的抗衰老作用提供实验依据,探讨其抗衰老的机理。２０月抗衰老实验组小鼠分别按９０ｍｇ／ｋｇ体重给予三七个参皂甙Ｒｂ１,Ｒｇ１,连续给药３０ｄ,断头取血测工细胞超氧化物睦化酶（ＳＯＤ）及过氧化氢酶（ＣＡＴ）。     

晶氧和碳酸氢钠改善第二产程母血酸碱平衡

对９９ 例经阴道分娩的产妇于第二产程开始时给予鼻导管吸氧,静脉滴注碳酸氢钠、过氧化氢碳酸酰胺（ 晶氧） ,于第二产程始末两次采母桡动脉血行血气分析。结果显示：晶氧碳酸氢钠联用组（ Ⅰ组）于第二产程结束时其ｐＨ,ＢＥ,ＰＯ２ 及Ｏ２ｓａｔ均显著高于对照组（ Ⅲ组）（ Ｐ ＜ ０ ．０５ 和＜ ０ ．０１） ,而ＰＯ２ 及Ｏ２ｓａｔ则无统计学差异;Ⅰ组与Ⅱ组ｐＨ,ＰＯ２ 及Ｏ２ｓａｔ 值于第二产程末较开始时显著升高（ Ｐ ＜ ０ ．０５ 和＜ ０ ．０１） ,ＢＥ 在该产程始末无统计学差异;Ⅲ组上述４ 指标明显下降（ Ｐ ＜ ０ ．０５ 和＜ ０ ．０１） 。各组间及组内比较ＰＣＯ２ 均无明显变化。提示第二产程中常规给予纠酸,吸氧内给氧能有效地改善产妇过度消耗所致的酸中毒和缺氧倾向。