丹参川芎嗪注射液辅治急性颅脑损伤患者的疗效及对血清HMGB1、NO、Fas水平的影响

目的观察丹参川芎嗪注射液治疗急性颅脑损伤患者的疗效及对血清高迁移族蛋白B1(HMGB1)、一氧化氮(NO)、Fas水平的影响。方法选取2014年2月1日—2015年2月1日陕西省渭南市中心医院神经外科诊治急性颅脑损伤患者84例作为研究对象。按照随机分配的原则将患者分为观察组43例及对照组41例。2组均给予降压、脱水、保持呼吸道通畅及预防并发症处理等。观察组在此基础上给予丹参川芎嗪注射液10ml静脉滴注,每日1次,维持治疗15天。患者入院/出院时分别测定血清HMGB1、NO、Fas水平及神经功能相关评分,比较治疗效果。结果观察组总有效率为65.12%,显著高于对照组的36.58%(χ~2=6.838,P<0.05)。治疗前,2组血清HMGB1、NO、Fas水平及临床神经功能缺损评分比较差异均无统计学意义(P>0.05);治疗后,2组较治疗前均显著降低(t观察组=15.472、13.290、24.556、8.771,P均<0.01;t对照组=7.951、4.591、22.490、3.805,P均<0.01),且观察组降低水平优于对照组,2组比较差异均有统计学意义(t=10.686、9.358、18.031、5.997,P均<0.01)。观察组静脉炎、皮疹、发热和头痛等不良反应发生率分别为6.98%、13.95%、4.65%及25.58%,对照组分别为4.88%、12.20%、2.44%和21.95%,2组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论急性颅脑损伤患者在常规基础的治疗上辅以丹参川芎嗪注射液,可明显降低血清HMGB1、NO及Fas水平及神经功能缺损评分,临床疗效明显提高。     

注射用血栓通中三七元素迁移的规律

目的:分析注射用血栓通中三七从原料到成品全过程的元素迁移规律,以便更好地控制成品中元素杂质。方法:采用ICP-MS法全面分析三七药材、三七总皂苷(中间体)和注射用血栓通中21种元素的含量。结果:21种元素的标准曲线相关系数r均在0. 999以上,回收率在92. 71%～107. 07%之间,RSD均在5%以内。三七药材中铝、铁含量较高,铅、砷、汞、镉、铜符合中华人民共和国药典的相关规定,三七总皂苷(中间体)和注射用血栓通中多数元素均未检出或含量极低。结论:注射用血栓通的提取工艺可有效去除三七中大部分元素,重金属及有害元素也降到较低水平。     

毛蕊异黄酮抑制肺腺癌细胞增殖和迁移的miR-21/PTEN信号通路机制研究

目的:探讨毛蕊异黄酮(CA)通过调控微RNA-21(miR-21)/人类第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)信号通路对肺腺癌细胞增殖和迁移的抑制作用机制。方法:以人肺腺癌SPC-A1细胞为对象,采用MTT法检测不同剂量CA(5、15、25、50、75、100μg/mL)作用12、24、48、72 h后的细胞增殖情况,并计算细胞存活率、30%细胞生长抑制浓度(IC_(30))和半数抑制浓度(IC_(50));采用Transwell迁移试验检测低、中、高剂量CA(50、75、100μg/m L)作用24 h后的细胞迁移情况,记录染色细胞数并计算细胞迁移抑制率;采用蛋白质印迹法和实时聚合酶链反应法检测低、中、高剂量CA(50、75、100μg/mL)作用24 h后细胞miR-21以及PTEN、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白及其mRNA的表达情况;检测细胞在分别转染miR-21模拟物(mimic)和抑制物(inhibitor)后,CA(75μg/mL)对其miR-21及PETN、VEGF、MMP-9蛋白表达的影响。结果:经50、75、100μg/mL CA作用12、24、48 h,25、50、75、100μg/m L CA作用72 h后,细胞存活率均显著降低(P<0.05或P<0.01);12～72 h各时间点CA的IC_(30)值分别为82.24、50.45、46.34、31.81μg/mL,IC_(50)值分别为108.06、73.35、70.08、49.89μg/mL。与正常对照组比较,CA各剂量组染色细胞数,低剂量组细胞中VEGF蛋白以及中、高剂量组细胞中miR-21,VEGF、MMP-9蛋白及其mRNA的相对表达量均显著减少或降低,且中、高剂量组显著少于或低于低剂量组,高剂量组显著少于或低于中剂量组(P<0.05或P<0.01);CA各剂量组细胞迁移率以及中、高剂量组细胞中PTEN蛋白及其mRNA的相对表达量均显著升高,且中、高剂量组显著高于低剂量组,高剂量组显著高于中剂量组(P<0.05或P<0.01)。转染miR-21 mimic后,miR-21 mimic组细胞miR-21及VEGF、MMP-9蛋白的相对表达量均较正常对照组显著升高,PTEN蛋白的相对表达量显著降低(P<0.01);加入CA干预后,细胞中miR-21及VEGF、MMP-9蛋白的相对表达量均较miR-21 mimic组显著降低,PTEN蛋白的相对表达量均显著升高(P<0.05或P<0.01)。转染miR-21 inhibitor后,miR-21 inhibitor组细胞中miR-21及VEGF、MMP-9蛋白的相对表达量均较正常对照组显著降低,PTEN蛋白的相对表达量显著升高(P<0.05或P<0.01);加入CA干预后,细胞中miR-21及上述蛋白的表达较miR-21 inhibitor组均未见明显变化(P>0.05)。结论:CA可剂量依赖性地抑制肺腺癌SPC-A1细胞的增殖和迁移,且这种作用可能与调控miR-21/PTEN信号通路有关。     

红景天苷对HepG2细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响

目的 红景天苷是从红景天的根茎部中提取得到的，是红景天中含量最高的天然活性化合物。该实验旨在研究红景天苷对人源性肝癌细胞（HepG2细胞）增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。方法 选取未作任何处理的HepG2细胞作为空白组，以终浓度为20、40、80 μmol·L^-1红景天苷处理的HepG2细胞作为红景天苷组。采用多功能细胞分析仪测定红景天苷对HepG2细胞增殖的影响，划痕实验测定红景天苷对HepG2细胞迁移能力的影响，Transwell小室实验测定红景天苷对HepG2细胞侵袭能力的影响，倒置显微镜观察红景天苷对HepG2细胞形态的影响，透射电镜观察红景天苷对HepG2细胞中线粒体的影响，流式细胞术分析红景天苷对HepG2细胞凋亡及周期分布的影响，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）测定红景天苷对HepG2细胞相关凋亡基因的影响，蛋白免疫印迹法测定红景天苷对HepG2细胞相关迁移、侵袭及凋亡蛋白的影响。结果 与空白组比较，红景天苷组（20、40、80 μmol·L^-1）细胞指数均明显下降（P<0.05），愈合面积均明显增加（P<0.05），且呈时间和浓度依赖性；红景天苷组（20、80 μmol·L^-1）中能够穿过Matrigel基质胶的HepG2细胞数量呈浓度依赖性减少；红景天苷组（20、40、80 μmol·L^-1）总凋亡率呈浓度依赖性升高，且阻滞细胞于G₂/M期（P<0.05）；红景天苷组（20、80 μmol·L^-1）上皮性钙黏附蛋白（E-cadherin）表达呈浓度依赖性升高（P<0.05），神经钙黏附蛋白（N-cadherin）表达呈浓度依赖性降低（P<0.05）。红景天苷组（20、40、80 μmol·L^-1）胱天蛋白酶-3（Caspase-3）mRNA表达、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）、Caspase-3蛋白及胱天蛋白酶-9（Caspase-9）蛋白表达均呈浓度依赖性升高（P<0.05），肌动蛋白结合蛋白（Girdin）及Bcl-2表达均呈浓度依赖性降低（P<0.05）。结论 红景天苷对HepG2细胞的增殖、迁移及侵袭均具有抑制作用，且通过线粒体途径诱导HepG2细胞凋亡。表明红景天苷可作为一种潜在的肝癌化疗候选药物。     

鼠妇提取物对血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的探讨鼠妇水提取物及乙酸乙酯提取物对骨桥蛋白(OPN)诱导的血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及迁移的影响。方法采用细胞培养、流式细胞术、MTT等方法,观测鼠妇不同浓度的水及乙酸乙酯提取物分别在基础培养情况下及OPN诱导的条件下针对VSMC凋亡、增殖、迁移的影响作用。结果 (1)OPN组及各浓度鼠妇水提取物、鼠妇乙酸乙酯提取物对于晚期平滑肌细胞的凋亡无影响。(2)不加入OPN刺激时,鼠妇水提取物对于细胞增殖起促进作用,且随着鼠妇水提取物浓度的增加,促进作用增强,呈剂量依赖性。鼠妇乙酸乙酯提取物抑制细胞增殖,鼠妇乙酸乙酯提取物各浓度的增加,抑制作用加强,呈剂量依赖性。给予OPN作用细胞后,两种提取物均发挥抑制细胞增殖作用。(3)OPN组、OPN+低浓度(0.5 mg/ml)鼠妇水提取物组、OPN+高浓度(1.00 mg/ml)鼠妇乙酸乙酯提取物组均可使细胞迁移数量增多,均有促细胞迁移的作用,其中OPN组迁移的细胞数量最多,OPN+低浓度鼠妇乙酸乙酯提取物组、OPN+高浓度鼠妇水提取物组次之。结论鼠妇提取物作为一种纯生物制剂,对于正常生长和刺激增殖后的平滑肌细胞作用是不同的;其对动脉粥样硬化的发生发展变化的抑制作用不是通过促进细胞凋亡来实现的。     

葫芦素抗肿瘤作用研究进展

癌症是全球主要的公共卫生问题，中国国家癌症中心的统计数据也表明癌症以逐年提升的发病率和死亡率成为威胁人类健康的重大疾病。癌症的发生发展机制复杂，涉及多阶段、多个基因及多条信号通路的异常，常规的放化疗及新兴的靶向治疗方法是肿瘤治疗的主要方式，但由于其毒副作用和耐药性的产生严重影响了患者的生活质量和持续有效的治疗效果，因此寻找安全有效的抗癌药物是全球关注的焦点。抗肿瘤植物药紫杉醇类、长春碱类、鬼臼素类、人参皂苷和多糖等的研发与应用给肿瘤治疗带来了新的希望。葫芦素是一种来源于中药葫芦科植物的高度氧化的四环三萜类化合物，药理作用广泛且机制复杂，在葫芦素家族中，目前针对葫芦素B，D，E，I抗肿瘤作用研究最多，已有大量研究证实，葫芦素B，D，E，I在治疗消化系统、呼吸系统、生殖系统、血液系统、泌尿系统等肿瘤疾病中发挥了重要作用，能够显著抑制肿瘤细胞增殖，而且在阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡和自噬性死亡、抑制细胞迁移和侵袭、抑制肿瘤血管生成、调节活性氧的水平、调节免疫等方面作用显著，有望开发成为抗癌新药。基于当前国内外针对葫芦素抗多种肿瘤的作用及机制研究成果，笔者对葫芦素抗肿瘤作用研究进展进行了全方面综述，以期为葫芦素类抗肿瘤药物新药研发提供参考。     

山慈菇提取物通过下调AEG-1表达抑制人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭＊

目的 本研究旨在观察山慈菇提取物对人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响，并探讨其分子机制。方法 取人结直肠癌SW480细胞作为研究对象，采用划痕实验和Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力，采用短发夹RNA（Short hairpin RNA，shRNA）干扰技术沉默SW480细胞中星形细胞上调基因-1（astrocyte elevated gene-1，AEG-1）基因的表达，利用Western blot法检测基质金属蛋白酶-2，9（matrix metalloproteinase-2，9，MMP-2，9）、E-钙粘蛋白（E-cadherin）和AEG-1等蛋白的表达变化。结果 山慈菇提取物可使人结直肠癌SW480细胞愈合率、迁移率和侵袭率均显著下降（P < 0.05），下调MMP2、MMP9和AEG-1蛋白表达水平（P < 0.05）以及上调E-cadherin蛋白表达水平（P < 0.05），上述作用均具有浓度依赖性。经shRNA干扰AEG-1基因表达后，SW480细胞中AEG-1蛋白表达水平显著下降（P < 0.05）；同时AEG-1干扰SW480细胞中E-cadherin蛋白表达水平显著升高（P < 0.05），MMP2和MMP9蛋白表达水平均显著下降，同时单独或者联合山慈菇提取物组的细胞迁移率、侵袭率也降低（P < 0.05）。结论 山慈菇提取物能浓度依赖性地抑制人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭，这可能与山慈菇提取物抑制AEG-1蛋白表达，继而下调MMP2、MMP9蛋白表达和上调E-cadherin蛋白表达有关。     

雷公藤红素抑制MGC - 823细胞增殖和迁移及诱导凋亡

目的 探索雷公藤红素对MGC - 823细胞的增殖，迁移及诱导凋亡的作用，并探讨其作用机制。方法 0、1、2、4、6、8、12 μM雷公藤红素作用于MGC - 823细胞，采用MTT法检测增殖比率。0、1、2和4 μM雷公藤红素作用于MGC - 823细胞0、24、48和72 h，显微镜下观察细胞形态，采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力，流式细胞术检测细胞凋亡，western blot法检测细胞中凋亡相关蛋白Bcl - 2、Bax、Akt、p - Akt等的表达水平。结果 经雷公藤红素作用后，MGC - 823细胞的增殖率均下降（P＜0.05）；细胞数量减少，体积缩小，皱缩变圆，部分不再贴壁，细胞核缩小；细胞迁移率减小（P＜0.05）；早期凋亡率增加（P＜0.05）；MGC - 823细胞中Bax表达升高，Bcl - 2和p - Akt表达降低（P＜0.05）。结论 雷公藤红素对MGC - 823细胞的增殖和迁移有抑制作用，并诱导其凋亡。