氨基酸神经递质受体

<正> 在近期的两次Fidia研究基金研讨会上,介绍了研究氨基酸神经递质受体的分子生物学方面的进展,一个是今年10月22-24日在伦敦皇家学会举行的名为“递质氨基酸受体:结构、转导及药物发展模型”,另一个是今年10月25-27日在美国圣路易斯举行的名为“神经递质对基因表达的调节”,该会为第20届神经科学年会的一个卫星会。 Peter Seeburg(Heidelburg,FRG)介绍了他对GABA_A受体(GABA_A Receptor)研究的新成果。GABA_A受体是哺乳类中枢神经系统内含量最多的抑制性受体。GABA_A受体具有一个配体激发的Cl~-通道,这一通道的活动能被一系列的临床用药调制,如巴比妥盐     

趋化性细胞因子受体在Tc1和Tc2亚群的差异表达

目的研究趋化性细胞因子受体在体外长期培养的人Te1和Tc2细胞系中的表达。方法将新鲜分离的PBMC在特定细胞因子及细胞因子抗体存在条件下，定向诱导为Ⅰ型和Ⅱ型T细胞系，用免疫荧光染色结合流式细胞术分析鉴定，并以膜表面及胞内三色流式细胞术检测趋化性细胞因子受体在不同T细胞亚群的表达。结果①在Ⅰ型和Ⅱ型T细胞整体水平上，CXCR4的表达水平接近，CXCR3和CCR5的表达在Ⅰ型T细胞明显高于Ⅱ型T细胞，CCR3在2种T细胞系的表达水平均较低，但在Ⅱ型T细胞的表达略高于Ⅰ型T细胞；②趋化性细胞因子受体在Tc1和Tc2亚群细胞的表达与上述结果类似，即CXCR的表达水平接近，CXCR3和CCR5的表达在Tc1高于Tc2，CCR3的表达水平较低，但在Tc2则略高于Tc1。结论趋化性细胞因子受体在Tc1和Tc2亚群的表达具有差异性。     

高密度脂蛋白亚类与蛋白激酶C活性的关系

目的：观察高密度脂蛋白（HDL）亚类与外周细胞和肝细胞HDL受体结合活性及细胞PKC活性的关系。方法： 以纯化的前β1-HDL及不含apoE的HDL3为配体，分别与人动脉平滑肌细胞（SMC）和肝癌细胞系HepG2反应，观察两种细胞HDL受体结合活性及细胞PKC活性的变化。结果： 前β1-HDL与SMC HDL受体的亲和力不仅显著高于不含apoE的HDL3与SMC HDL受体的亲和力（P＜0.05），而且还显著高于它与HepG2细胞HDL受体的亲和力（P＜0.05）；前β1-HDL和不含apoE的HDL3分别与SMC反应后，均可激活细胞PKC信号传递途径，且前β1-HDL的作用较不含apoE的HDL3更为明显；而这二种HDL亚类分别与HepG2细胞反应后，细胞PKC活性均无明显变化。结论： 前β1-HDL似乎可以比不含apoE的HDL3更为有效的促进细胞胆固醇移出，而且血浆中前β1-HDL可能更多地作用于外周细胞如SMC，并通过外周细胞膜上的HDL受体介导激活PKC信号传递途径，从而促进外周细胞中过剩的胆固醇移出，而肝细胞HDL受体介导的胆固醇进入细胞可能与PKC信号途径无关。     

细胞外基质受体α-Dystroglycan影响胸腺细胞分化发育的可能机制

目的研究细胞外基质受体alpha-Dystroglycan(α-DG)对胸腺细胞分化的影响及机制。方法摘取15日胚龄鼠胸腺小叶进行体外器官培养。将α-DG抗体、对照抗体或培养液滴加在胸腺小叶上。FACS(Fluorescence-activated cell sorting)分析胸腺细胞表面分子CD4、CD8、CD95和CD69等的表达。结果α-DG中和抗体能明显抑制胸腺细胞分化，显示胸腺双阴性细胞比例从对照组的26．5％增高到实验组的71．6％，双阳性细胞和CD8单阳性细胞比例则显著下降，分别从39．8％和20．7％下降到7．5％和6．8％，CD4单阳性细胞比例则无明显变化；同时胸腺细胞数目明显减少；CD95、CD69的表达水平随α-DG中和抗体的持续存在呈现显著升高。结论α-DG通过参与胸腺细胞的活化和凋亡活动影响胸腺细胞的发育。     

人乳头瘤病毒11型L1/CD80嵌合真核表达质粒的构建和鉴定

生殖道尖锐湿疣主要是由人乳头瘤病毒6型(HPV6)和11型(HPV11)感染引起。HPV病毒仅存在终末分化的复层鳞状上皮组织中，含量很少。HPV病毒的晚期表达基因L1所表达的外壳蛋白不仅是主要的外壳蛋白，还是主要的病毒抗原蛋白，在宿主细胞表面有其蛋白受体，可成为预防性疫苗最理想的靶抗原。我们构建了含有完整的HPV11型L1基因的真核表达质粒，为增强其作为治疗性疫苗的免疫效果，并进一步将HPV11L1基因和共刺激分子CD80进行连接重组，构建HPV11 L17／CD80嵌合基因的DNA疫苗，为下一步研究其免疫原性提供试验数据。     

过氧化物酶增殖体激活受体α在急性肺损伤大鼠肺组织的表达及其意义

目的: 观察内毒素(LPS)复制的急性肺损伤（ALI）大鼠肺组织过氧化物酶增殖体激活受体α（PPARα）表达的变化,探讨PPARα在ALI中可能的作用。方法: 将40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、LPS致伤1 h组、2 h组、4 h组和8 h组。用LPS(5 mg/kg) 静脉注射复制大鼠ALI模型，分别在LPS致伤后1 h、2 h、4 h、8 h时处死大鼠，测定各组肺组织湿/干重比（W/D）及肺组织病理变化；采用RT-PCR法检测肺组织中PPARα mRNA的表达；采用免疫组化法检测肺组织中PPARα的表达。结果: LPS致伤后2 h、4 h、8 h肺组织W/D均显著高于对照组（均P< 0.01）；LPS致伤后2h、4h PPARα mRNA表达分别显著低于对照组（均P < 0.01）；而LPS致伤4h和8h组PPARα表达阳性细胞数显著低于对照组（均P< 0.05）。结论: PPARα在ALI大鼠肺组织表达降低。表明PPARα在急性肺损伤的发病机制中具有重要作用。     

C1q受体研究进展

补体分子C1q具有调节各种细胞反应的能力.近年,随着C1q功能研究的深入,发现许多细胞内或者细胞表面存在结合C1q的蛋白或者受体,如C1qRp、gC1qbp、C1qRo2-、钙网素/CRT/cC1qR胶凝素受体、CR1.其中某些蛋白除结合C1q外还结合其它配体.     

抗人DR5抗体mDRA- 6细胞毒作用机制分析

目的:探讨鼠抗人DR5单克隆抗体(mAb)mDRA-6对Jurkat细胞的细胞毒作用及其机制。方法:以流式细胞术测定mAbmDRA-6对Jurkat细胞的细胞毒作用和细胞凋亡作用,以及caspase8、9的抑制剂对mAbmDRA-6诱导的Jurkat细胞凋亡的影响。在荧光显微镜下,观察mAbmDRA-6对Jurkat细胞形态的影响。以琼脂糖凝胶电泳检测Jurkat细胞中的DNA片段化。结果:mAbmDRA-6对Jurkat细胞具有显著的细胞毒作用,并呈剂量和时间依赖性。经mAbmDRA-6处理后,Jurkat细胞可出现典型的细胞凋亡的形态特征:细胞膜皱缩,出泡,染色质浓缩,形成凋亡小体等。经mAbmDRA-6处理后,Jurkat细胞膜表面高表达丝氨酸磷脂,并可导致Jurkat细胞中的DNA片段化。caspase8的抑制剂可明显抑制mAbmDRA-6诱导的Jurkat细胞凋亡,caspase9的抑制剂的影响很小。结论:mAbmDRA-6可通过死亡受体信号传导途径诱导Jurakt细胞凋亡,对Jurkat细胞产生细胞毒作用,其在以TRAIL/DR5系统进行的肿瘤治疗和探讨DR5功能结构域方面具有广阔的应用前景。     

TLR2和TLR4在原发性肝癌中的表达

目的：本研究通过检测原发性肝癌Toll样受体2（TLR2）和Toll样受体4（TLR4）的表达，分析其与临床病理生理因素的关系，探讨TLR2，TLR4在原发性肝癌疾病过程中的可能作用。方法：采用免疫组化法和实时荧光定量PCR分别在蛋白水平及mRNA水平检测原发性肝癌组织和配对癌旁组织TLR2、TLR4的表达。结果：原发性肝癌组织在蛋白水平和mRNA水平TLR2和TLR4的表达均明显低于癌旁组织（P<0.01）。但免疫组化结果显示不论是肝癌组织还是癌旁组织，TLR2和TLR4的表达均明显高于正常肝组织（P<0.01，P<0.05），有门静脉分支癌栓的患者癌组织TLR4的表达强度低于无门静脉分支癌栓的患者（P<0.05）。结论：肝癌组织TLR2和TLR4的表达与癌旁组织相比受到相对抑制，但高于正常肝组织，TLR2和TLR4信号途径可能参与了原发性肝癌的病理过程。     

Direct and indirect role of Toll-like receptors in T cell mediated immunity

Toll-like receptors (TLR) are pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) recognition receptors that playan important role in protective immunity against infection and inflammation.They act as central integrators ofa wide variety of signals,responding to diverse agonists of microbial products.Stimulation of Toll-like receptorsby microbial products leads to signaling pathways that activate not only innate,but also adaptive immunity byAPC dependent or independent mechanisms.Recent evidence revealed that TLR signals played a determiningrole in the skewing of na(?)ve T cells towards either Th1 or Th2 responses.Activation of Toll-like receptors alsodirectly or indirectly influences regulatory T cell functions.Therefore,TLRs are required in both immuneactivation and immune regulation.Study of TLRs has significantly enhanced our understanding of innate andadaptive immune responses and provides novel therapeutic approaches against infectious and inflammatorydiseases.Cellular & Molecular Immunology.2004;1(4):239-246.