Endostatin基因真核表达载体的构建及活性鉴定

目的：构建endostatin基因的真核表达载体,并将其转染C6脑胶质瘤 细胞,探讨其体外抑制血管内皮细胞生长的活性。方法：利用PCR将大鼠血清蛋白分泌信号连接在endostatin基因的碳末端,构建成真核表达载体pcDNA3-Sendostatin,利用Lipofectamine法将其转染C6脑胶质瘤细胞,采用细胞增殖实验进行endostatin表达蛋白体外活性鉴定。结果：成功构建了endostatin基因真核表达载体,转染该载体的C6脑胶质瘤细胞可分泌表达抑制血管内皮细胞增生的endostatin蛋白。结论：endostatin是一种有效的血管生成抑制剂,可进一步用于在体肿瘤的抗血管生成治疗。     

表达幽门螺杆菌过氧化氢酶的减毒沙门氏菌疫苗株的构建及其免疫保护作用的观察

目的 探讨表达幽门螺杆菌（Hp)过氧化氢酶（KatA)的减毒鼠伤寒沙门氏菌疫苗株在防御Hp感染中的作用。方法 构建表达KatA的重组质粒,用IPTG进行诱导表达,再将其转入减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261株中构建成口服活疫苗株,经口服免疫C57BL/6小鼠,并以Hp翻尼株进行攻击,用快速尿素酶试验和Hp定量培养对胃粘膜中的Hp进行检测。结果 SDS-PAGE凝胶电泳上显示一条相对分子质量约79000的新生蛋白带,占细菌总蛋白的19%,并能与抗谷胱甘肽-s-转移酶（GST）抗体发生特异性反应,动物实验结果显示;免疫小鼠能有效防御Hp的感染,结论 表达KatA的减毒沙门氏菌疫苗株能诱导抗Hp保护性免疫反应,有望在Hp感染及其相关性疾病的防治中发挥积极作用。     

西尼罗I型病毒亚克隆的构建及其鉴定

目的构建西尼罗病毒基因组的cDNA亚克隆，为西尼罗病毒全长cDNA克隆的研发和应用打下基础。方法根据基因组中限制性酶切位点的分布设计4对引物，QIAamp RNA抽提试剂盒提取西尼罗病毒培养细胞BHK-21的总RNA，长片段RT-PCR技术扩增目的基因片段。将目的基因片段与pMD18-T载体进行连接，转化人感受态细胞E.coli DH5α，进行蓝白斑筛选后得到阳性克隆。将重组质粒进行PCR和测序鉴定。结果获得的目的基因片段经PCR和测序结果表明西尼罗病毒功能基因正确地克隆进入载体。结论成功获得西尼罗I型病毒功能基因的cDNA亚克隆，可应用于西尼罗病毒全长cDNA克隆的制备。     

浅谈高校贫困生的心理问题与和谐人际关系的构建

近年来,高校贫困生的心理问题逐步成为学生工作面临的新问题.贫困生的心理问题主要表现为自卑感与强烈的自尊心、孤独感与自我封闭心理、上网成癌与沉溺心理.研究发现,经济上的贫困并不是导致贫困生产生心理问题的主要因素,由经济贫困引发的人际适应问题才是真正的内因.因此.从人际适应问题入手,构建和谐人际关系成为解决贫困生心理问题的必然之策.提出从构建和谐的校园自然环境和人文环境,建立系统的知行转化机制2个方面构建和谐的人际关系.     

IL-27亚基基因真核表达质粒的构建与表达

目的 克隆人白细胞介素27(interleukin 27,IL-27)蛋白亚基EB病毒诱导的基因3(Epstein-Barr vi-rus-induced gene 3,EBI3)与p28基因的cDNA,分别构建其真核表达质粒并在COS-7细胞表达.方法 人外周血单核细胞诱导为成熟树突状细胞后提取细胞总RNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增EBl3与p28基因cDNA,酶切后插入pcDNA-3.1构建真核表达载体pcDNA-EBI3与pcDNA-p28.重组质粒转染COS-7细胞,RT-PCR检测目的 基因表达.结果 成功构建克隆人IL-27蛋白亚基真核表达质粒,重组质粒分别转染COS-7细胞后检测到相应基因表达.结论 人IL-27蛋白亚基基因克隆及真核表达质粒的成功构建,为构建表达有生物学活性的重组人单链IL-27蛋白奠定基础.     

质量管理体系档案资料的分类与收集管理

目的为了适应和增强市场竞争能力,建立良好的质量管理体系,规范实验室的行为,提高疾病控制机构的整体水平。方法论述疾病预防控制机构在质量管理体系活动过程中,如何分类、收集和整理所形成的各类档案资料。结果做好档案资料的规范化管理,便以对质量管理体系的协调性、符合性、充分性、可操作性进行审核,保证质量管理体系持续符合认可准则要求及有效运转。     

人穿孔素真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

目的:观察克隆的人穿孔素(pfn)基因在COS-7细胞中的表达情况. 方法:用PCR方法获取人pfn全长基因,将所获基因克隆入真核表达载体pcDNA3.1( ),转染COS-7细胞,RT-PCR检测pfn基因在COS-7细胞中的表达. 结果:成功获得人pfn全长基因,并构建了真核表达载体.转染COS-7后,检测出pfn基因的表达. 结论:人pfn全长基因可以在转染的COS-7细胞中表达.     

基于“签、约、服”三环节的医防融合式家庭医生工作室构建研究

提高基层医疗卫生服务能力,为居民提供优质、高效的家庭医生签约服务,是目前基层医疗卫生机构需要解决的重点问题之一。家庭医生工作室是推进家庭医生服务的重要形式与载体,可以有效整合区域内医疗资源,更好地促进分级诊疗,同时提高居民的获得感和满意度。重庆市渝中区大溪沟街道社区卫生服务中心自2016年开始积极探索家庭医生工作室建设,紧扣签约服务的“签、约、服”三环节构建医防融合式家庭医生工作室,建立了“三定”（定岗、定任务、定分配）、“三优”（优化服务内容、服务流程、服务渠道）、“两衔接”（全科医生与市级专家、社区卫生与市级医院资源整合衔接）的有效签约服务模式。本文介绍了医防融合式家庭医生工作室的团队建设、服务内容及服务方式,并对其构建策略进行汇总分析,以期为其他地区的家庭医生工作室建设提供参考。     

疲劳自评量表的理论构建及其研制

目的研制合理评价疲劳特征及程度的疲劳自评量表(Fatigue Self-assessment Scale)。方法参照心理测量学的相关方法,通过以下途径研制疲劳自评量表,包括:测量对象、目标及测验用途的确定;疲劳内涵的理论构建;量表类型及条目形式的选择;量表结构的确立;量表条目的确定;量表的条目分析及条目选择;采用信度分析法、探索性因子分析方法及LISREL8.54中的结构方程分析量表的可靠性、有效性。结果量表各维度的格朗巴赫系数(Cronbach’s alpha)最低为0.772,最高为0.908;量表第一部分的RMSEA(近似误差的均方根)为0.065,NNFI(非范拟合指数)为0.95,CFI(比较拟合指数)为0.96;量表第二部分的RMSEA为0.10,NNFI为0.93,CFI为0.96。结论该量表信度良好,并具有良好的结构效度。