7型腺病毒感染的分子流行病学研究

本文结合临床病例资料，用RE对110株Ad7进行限制性位点核酸图谱分析。发现近十五年，在长春等地区，Ad7存在7b和7d两个基因组型；优势基因组型由7b转移为7d;7d可能是7b的变异株；7b的毒力、致病性强、7d的毒力相对弱，但致病范围广。7b与7d引起的肺炎等疾病临床特征差异的内在因素、致病基因片段的毒力、致病性等生物学特征不同。     

颈7神经根切断术后的肌电电生理改变（II）

为进一步研究颈７神经根切断后对上肢神经功能的早期影响，近年来我们对１８例应用健侧颈７神经根移位桥接治疗的臂丛神经损伤患者，于同一个体相同检测条件下测定并观察切断颈７神经根术前、术后２周内，健侧上肢的肌电电生理变化。观察内容及结果１．肌电：背阔肌、肱三头肌、伸指总肌和尺侧屈腕肌，术后均无明显失神经改变。２．周围神经传导：（１）五个手指指神经的腕感觉神经动作电位（ＳＮＡＰ），术后１￣３指ＳＮＡＰ波幅均     

呼吸困难,肝大,皮肤色素沉着,多发性浆膜炎

呼吸困难、肝大、皮肤色素沉着、多发性浆膜炎福州市南京军区军医学校顾裕民病历摘要男性、４５岁。因呼吸困难、腹胀、下肢浮肿于１９８２年７月２９日入院。一月前原因不明的畏寒、发烧后逐渐出现呼吸困难，并进行性加剧伴下肢浮肿，渐进性腹胀、食欲减退，于７月２９日...     

结核分枝杆菌Ag85B/GST融合蛋白表达载体构建及在大肠杆菌中的表达

目的 构建结核分枝杆菌Ag85B／GSF融合蛋白表达质粒，并在大肠杆菌(E．coli)中诱导表达。方法 以质粒pUC18／Ag85B为模板，用PCR法扩增结核杆菌Ag85B基因，扩增的Ag85B上游含有EcoR Ⅰ酶切位点，下游含有SalⅠ酶切位点；将Ag85B基因定向插入质粒pGEX-4T-1中，构建原核表达质粒pGEX-Ag85B并转化E．coli B121，筛选阳性重组子，限制性内切酶切鉴定和DNA序列测定，异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达，SDS-PAGE和Westem blot鉴定结果。结果 成功构建原核表达质粒pGEX-Ag85B并表达出Mr约56000大小的Ag85B／GSY融合蛋白，表达量占总菌体的30％。结论 为进一步进行纯化Ag85B蛋白和研究其在膀胱肿瘤治疗中的作用奠定了基础。     

流行性乙型脑炎病毒结构蛋白编码基因的重组构建

目的:建立流行性乙型脑炎病毒(JEV)C、prME,E等结构蛋白编码基因克隆.方法:病毒感染C6/36细胞,RT-PCR法依次获取该病毒结构蛋白基因并进行DNA测序分析,PCR克隆法将PCR产物分别构建于真核表达载体pcDNA 3.1的BamHI与EcoRI酶切位点并依次命名为pJC、pJME与pJE,通过DNA测序、电泳以及限制性内切酶分析加以鉴定.结果:JEV C、prME与E基因片段分别为380、2001以及1 500bp,各基因测序结果与发表的JEV JaGAr-01株相对应序列相一致,从重组质粒释出的插入子分别与各基因大小相符合.结论:pJC、pJME与pJE重组质粒分别含有C、prME与E蛋白编码基因.     

具有靶向免疫抑制作用新型重组融合蛋白B7-2-PE40KDEL真核表达载体的构建及其生物效应

目的:构建B7-2-PE40KDEL的真核表达载体,探讨通过体内表达重组融合蛋白,特异性杀伤高表达CD28 T细胞,阻断B7∶CD28/CTLA4共刺激信号途径诱导免疫耐受的可能性.方法:以原核表达载体pRSETA-B7-2-PE40KDEL质粒为模板,采用PCR及酶切连接的方法构建真核表达载体pcDNA3.1/Zeo( )-B7-2-PE40KDEL.利用RT-PCR、Western 印迹及ELISA法从mRNA、蛋白质水平检测了B7-2-PE40KDEL在RPE-CHO真核细胞中的表达情况.采用MTT法对其特异性杀伤高表达CD28 T细胞的生物活性进行测定.结果:成功构建了pcDNA3.1/Zeo( )-B7-2-PE40KDEL真核表达载体,转染入RPE-CHO细胞后可转录翻译为重组融合毒素蛋白,相对分子质量约为71×103,平均106个转染细胞24 h表达0.23 μg/L.活性测定显示真核载体所表达的B7-2-PE40KDEL可特异性地抑制高表达CD28的人T淋巴细胞系,而对CD28阴性的人白血病细胞系的抑制率较低.结论:真核载体表达的B7-2-PE40KDEL具有良好的靶向性免疫抑制活性,为进一步开展其体内特异性防治移植排斥反应及自身免疫性疾病奠定了基础.     

重组人骨形态发生蛋白7的腺相关病毒载体的构建

目的构建重组人骨形态发生蛋白7(hBMP7)的腺相关病毒(AAV)载体。方法通过RT-PCR方法,从HEK293细胞中扩增hBMP7全长cDNA并亚克隆入通用型AAV载体质粒pSNAV。将pSNAV-hBMP7质粒DNA转染BHK-21细胞,筛选出携带hBMP7的AAV载体细胞株—BHK-21细胞。用能表达Rap和Cap的重组1型单纯疱疹病毒HSV1-rc/ΔUL2按MOI=0·1感染BHK-21载体细胞株后收获病毒液,通过氯仿—PEG/NaCl沉淀—氯仿抽提纯化病毒。结果所克隆的hBMP7全长cDNA经测序证实和已知hBMP7序列完全一致。通过用能表达Rap和Cap的重组1型单纯疱疹病毒HSV1-rc/ΔUL2感染携带hBMP7基因的AAV载体细胞株BHK-21细胞的方法获得了滴度为2×1012vg/ml、纯度达99%的重组人骨形态发生蛋白7的腺相关病毒载体(AAV-hBMP7)。结论RT-PCR方法从HEK293细胞中扩增克隆hBMP全长cDNA是一种有效可行的方法。成功地构建了高滴度、高纯度的AAV-hBMP7载体,为进一步体内及体外研究基因治疗促进骨愈合提供了有力的工具。     

因为ABO基因外显子7上单独的796C〉A突变形成一新的cis—AB等位基因

背景 cis—AB极为罕见，已经报道过的符合此特殊的ABO等位基因改变的表型仅3例。cis—AB01涉及A102等位基因外显子7上G803C非同义替换；然而cis—AB02和cis—AB03不同，分别是由于B101等位基因背景下A796C和C700T的非同义替换所致。核苷酸置换使得各自的糖基转移酶发生改变，导致双功能AB转移酶活性变化。研究设计与方法在一中国台湾家庭有两名以及两名无血缘关系的个体发现cis—AB表型。采用血清学方法和分子克隆技术以及对外显子6、7测序，     

蒙药土茯苓-7味汤治疗痤疮105例

蒙医认为痤疮是消化功能减退,皮肤表面上的毛琪苏、协日乌素(黄水)偏盛而阻碍了赫依琪苏之运行所致,有时合并粘虫。本病多见于15~30岁的男女青年。笔者2000年1月~2006年12月采用蒙药土茯苓-7味汤治疗105例,疗效满意,现总结如下。1临床资料105例患者年龄均在15~30岁之间,其中男4     

血管紧张素(1-7)和依那普利拉对烧伤血清离体灌注大鼠心脏功能的影响

Objective To investigate effects of angiotcnsin ( 1-7 ) [ Ang( 1-7 ) ] and enalaprilat on function of isolated rat heart perfused by burn serum. Methods Eighty SD rats were used to prepare burn serum. Hearts of another 24 SD rats were isolated to reproduce Langendorff perfusion model. The rat hearts were divided into different groups with different perfusion fluids as K-H buffer group, K-H buffer containing 20% burn serum group ( burn serum group) , K-H buffer containing 20% burn serum and 2 μg/mL enala-prilat group (enalaprilat group), and K-H buffer containing 20% burn serum and 1 nmol/mL Ang(1-7) group [ Ang(1-7) group]. The rat hearts were perfused for 30 mins with each of above-mentioned fluids in different groups. Then left ventrieular systolic pressure (LVSP) , left ventricular end diastolic pressure ( LV-EDP) , ± dp/dt max, coronary flow(CF) , level of creatine kinase (CK) and lactate dehydrogenase (LDH) in respective coronary effluent were determined. Results Compared with LVSP ( 11.2 ± 1.0 kPa, 1 kPa = 7.5 mm Hg), +dp/dt max (642±53 kPa/s), -dp/dt max (380±61 kPa/s) and CF level in K-H buffer group, CF, LVSP(5.9±0.8, 8.0±1.1, 8.9±1.3 kPa, respectively), +dp/dt max(275±37, 454±48, 479±63 kPa/s, respectively), - dp/dt max ( 135±35, 219±47, 277±58 kPa/s, respectively ) of burn serum group, those levels in Ang(1-7) group, and enalaprilat group were decreased obviously(P<0.05 or P <0.01 ), but LVEDP, level of CK and LDH in coronary effluent were increased. Compared with those parameters in burn serum group, CF, LVSP, ±dp/dt max of Ang(1-7) group and enalaprilat group were increased obviously(P<0.05 or P<0.01), and LVEDP, level of CK and LDH in coronary effluent were decreased obviously(P<0.01). Conclusions Ang(1-7) and enalaprilat can effectively improve left ventricular function of isolated rat heart perfused by burn serum and mitigate myocardial injury.