人牙本质涎蛋白在COS-7细胞中的表达

目的 :构建人牙本质涎蛋白 (humandentinsialoprotein ,hDSP)真核表达载体 ,用瞬时系统表达目的基因。方法 :将hDSP全长基因定向克隆入真核表达质粒载体pcDNA3 ,构建pcDNA3 hDSP重组质粒 ,脂质体转染法转染COS 7细胞 ,48～ 72h收集细胞及培养上清 ,Westernblot和免疫组化检测表达产物。结果 :酶切鉴定表明重组表达载体构建成功 ;Westernblot检测显示在 60 0 0 0处出现一条清晰的特异性免疫阳性条带 ;免疫组化染色显示细胞胞质内有大量棕黄色颗粒 ,进一步证明该转染方法可行 ,转染效率较高。结论 :hDSP全长基因可以在COS 7细胞获得瞬时高效表达。     

CD^＋7急性髓系白血病

ＣＤ＾＋７急性髓系白血病在分化较差的ＡＭＬ亚型中发生率较高，除髓系抗原外，细胞膜上常有ＣＤ３４和ＨＬＡ－ＤＲ表达，对白细胞介素和干细胞因子敏感，部分病例有Ｔ细胞受体和免疫球蛋白重链的基因重排。临床表现上髓外浸润多见，髓系化疗方案不敏感，完全缓解率低，易复发，这些与ＣＤ＾＋７干细胞性白血病相似，提示ＣＤ＾＋７ＡＭＬ为早期造血的恶性疾病。     

大鼠IgECH2-3-FasL融合蛋白真核表达质粒的构建

在人类哮喘及其他过敏反应性疾病中 ,肥大细胞始终处于重要地位。IgE的Fc段与肥大细胞上高亲和力受体FcεRⅠ相连接触发过敏反应。单独的Fc段能封闭其高亲和力受体 ,阻断过敏反应 ,且将关键结合位点定位于Fc段的CH3[1 3 ] 。国外研究发现 ,肥大细胞表面表达Fas,抗Fas抗体能够诱     

蒙药德伦古日古木-7治疗口疮的体会

应用蒙药德伦古日古木-7治疗嘴唇疮25例，取得较好疗效，在实践中证实了脾和下嘴唇的经络关系.     

共刺激分子B7在移植免疫中的研究现状及展望

B7家族成员是最重要的共刺激分子,其中对B7-1、B7-2分子的研究最为深入,近年来,该家族中B7-H1、B7-H2、B7-H3、B7-DC、B7-H4等新成员也被陆续发现,其作用机制主要是为T细胞活化提供所需的正性和负性共刺激信号,通过复杂的网络平衡作用决定最终的免疫效应。随着器官移植的迅速发展,诱导对移植物的特异性耐受成为解决移植排斥的重要途径,正性共刺激通路B7CD28通路、B7-H2ICOS通路、B7-H3通路的过度活化,以及负性共刺激通路B7CT-LA-4通路、B7-H1、B7-DCPD-1通路、B7-H4BTLA通路的发现,在移植免疫中意义尤为突出。     

骨形态发生蛋白-7对肾、骨的作用

骨形态发生蛋白-7（Bone Morphogenetic Protein-7，BMP-7）属转化生长因子．8（Transforming Growth Factor-β，TGF-β）超家族成员，是一种多效性细胞因子，与肾脏发育、肾功能的维持、各种肾脏疾病密切相关，是肾脏保护因子，重组人骨形态蛋白-7（rhBMP-7）已被认为是肾病治疗的新方法。另外，BMP-7在骨骼发育、骨修复中也具有一定的调节作用，并与多种骨疾病密切相关，尤其在肾性骨营养失调病的肾脏形态功能和骨代谢紊乱性疾病中有密切联系。祖国传统医学“肾主骨”理论认为：肾对骨起调控作用，肾精充足，则骨髓生化有源，骨的生长发育及修复均与肾气滋养有关，BMP-7可能是“肾主骨”理论的物质基础的新依据。本文对BMP-7在肾、骨中的作用做一综述。     

基因芯片技术鉴定出血性大肠杆菌O157∶H7和霍乱弧菌O139

目的:建立一种同时快速检测肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157∶H7和霍乱弧菌O139的基因芯片,并验证该芯片的特异性和敏感性。方法:选择EHEC O157∶H7的产志贺样毒素基因stx1、stx2和β-葡糖醛酸糖苷酶基因(u idA);霍乱弧菌O139的肠毒素A亚单位(ctxA)、毒力协调菌毛A亚单位(tcpA)、糖基转移酶(glycosotransferaseLPSgt)基因序列分别设计引物和探针,反向引物用荧光素Cy3标记,探针在3′端氨基修饰。在优化的PCR和杂交反应条件下,分别进行三重PCR扩增,产物混合后与芯片进行杂交,产生特异性荧光信号,进一步筛选探针。随后将筛选出的探针制备芯片用于检测临床样本。结果:PCR产物在相应探针处均产生特异性杂交信号,临床样本检测结果表明,此芯片比常规细菌学检测方法灵敏。结论:所研制的同时定性检测EHEC O157∶H7和霍乱弧菌O139的基因芯片是特异、灵敏而且快速的,为这两种肠道致病菌感染的快速诊断提供了新的方法。     

一堂医学影像教学课引发的思考

笔者日前接受医院教育处委派,为已进入临床实习的7年制临床医学专业学生增加一堂影像课讲座。课上,通过与学生简单的对话,了解到大部分学生进入临床实习后,对于影像知识的重视程度不够,加之实习任务较重,对于以前所学的影像知识已较生疏。这既真实地反映了影像医学在整个医学界     

小鼠轮状病毒EW株VP7基因的克隆及其在重组腺病毒中的表达

目的：构建表达小鼠轮状病毒(EDIM)EW株VP7基因的重组腺病毒，以在小鼠模型上研究轮状病毒的免疫保护机制。方法：用RT-PCR方法扩增EDIM VP7全长cDNA并进行基因序列分析，将所得的VP7基因片段插入腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV，获得重组质粒pShuttleCMV-EVP7，将该质粒与腺病毒骨架质粒pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183获得重组腺病毒质粒pAdCMV-EVP7，将该质粒线性化后转染293细胞包装重组腺病毒rvAdEVP7。以rvAdEVP7感染293细胞，并分别应用电子显微镜、PCR、RT-PCR和Western blot等方法观察rvAdEVP7的形态、VP7基因整合、遗传稳定性、VP7基因在细胞内转录及表达等有关生物学特性。结果：获得了小鼠轮状病毒的全长cDNA，重组腺病毒rvAdEVP7具有典型的腺病毒形态，PCR、RT-PCR和Western blot等分子生物学方法分析显示：rvAdEVP7中确有特异性的VP7基因稳定整合；有较好的遗传稳定性；感染293细胞后能有效转录；可表达轮状病毒主要结构蛋白VP7。结论：成功构建含VP7基因的重组腺病毒rvAdEVP7，为进一步研究轮状病毒的免疫保护机制打下了基础。     

金乡县2000～2002年动物粪便O_(157):H_7大肠杆菌带菌监测情况

为查明 O1 57:H7大肠杆菌在本地区动物携带情况 ,2 0 0 0～ 2 0 0 2年采集金乡县部分农家动物粪便 ,用免疫磁珠富集方法捕获 O1 57:H7,接种于山梨醇 -麦康凯培养基 ,可疑菌落转种科玛嘉大肠杆菌 O1 57显色培养基之后进行生化和血清学鉴定。结果显示 ,3年共检测牛、鸡、猪、羊动物粪便 14 6 0份 ,检出 O1 57大肠杆菌 6 5株 ,检出率为 4 .4 5 % ,其中猪携带率最高为 7.35 % ,提示本地区有肠出血性大肠杆菌 O1 57:H7感染的可能 ,应加强动物管理和疫情监测 ,防止疫情扩散蔓延。