Hox基因与胚胎种植

同源框基因是一类控制胚胎发育和细胞分化的调节基因，在人类子宫内膜存在并具周期性变化，影响子宫内膜的发育、分化及胚胎种植等过程。Hox蛋白对控制种植期子宫内膜细胞增生起重要作用。子宫内膜Hox基因的表达受性激素、细胞因子等调节。     

六西格玛在临床实验室的应用

六西格玛是在80年代引入工业届的全球质量策略。这种方法已被很多大公司，如摩托罗拉、通用电气、联信等广泛地采用，并在顾客满意度及利润上取得了巨大的成功。为了在卫生保健领域取得类似效益，六西格玛当前在全世界范围内的几家实验室所采用。尽管如此，关于这方面的主题很少在杂志上发表。本文的主要目的是澄清六西格玛的不同的方面，以及其在临床实验室的潜在应用，并且系统地综述在临床实验室领域讨论执行六西格玛策略的文章和书籍。     

《欧洲心血管病预防指南》要点解读

由欧洲心脏病学会（ESC）组织编撰的2007年静心血管病预防临床实践指南》在2007年欧洲心脏病年会上发布。现仅就该指南的要点解读如下。     

GFP-HPVl8 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体的构建与鉴定

目的 构建人乳头瘤病毒18型早期蛋白2(HPV18 E2)删除突变体N端(TAD)、C端(DBD)与增强型绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的真核表达载体,为研究HPV18 E2基因与宫颈癌发生的关系提供实验基础.方法 用PCR扩增HPV18 E2 TAD、DBD基因序列,用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切pEGFP-Cl载体与TAD、DBD基因PCR产物,纯化回收后,用连接酶连接并转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,并对其进行双酶切和测序鉴定.结果 阳性克隆质粒经双酶切后,琼脂糖凝胶电泳可见4.7 kb、618 bp和243 bp附近的片段.DNA测序结果经与GenBank登录的序列做BLAST分析,显示重组质粒分别含有618 bp与243 bp的目的基因片段,无碱基错配和移码突变,读码框完全正确.结论 成功地构建了GFP-HPV18 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体pEGFP-C1/TAD与pEGFP-C1/DBD.     

伽玛刀治疗肾上腺嗜铬细胞瘤18例

目的探讨嗜铬细胞瘤的伽玛刀治疗经验。方法分析2002~2006年收治的18例嗜铬细胞瘤。临床表现为高血压者17例(94.0%),15例接受尿VMA检查,阳性者13例(86.6%)。B超、CT、MRI的定位诊断准确率分别为92.0%、100.0%、100.0%。结果16例血压明显控制,1例治疗后血压升高,1例无改变。结论伽玛刀立体定向放射治疗肾上腺嗜铬细胞瘤有显著的近期疗效。     

FOXO4通过抑制炎症反应减轻心肌细胞缺氧/复氧损伤

目的探讨叉头框蛋白O(forkhead box protein O, FOXO)4在心肌细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation, H/R)损伤中的作用及对炎症反应的影响。方法 H9c2细胞体外培养至密度30%～50%, 按随机数字表法分为6组(每组3孔):对照组(Con组)、缺氧/复氧组(H/R组)、过表达FOXO4+H/R组(OF+H/R组)、过表达FOXO4阴性对照+H/R组(OF-NC+H/R组)、沉默FOXO4+H/R组(siFOXO4+H/R组)、沉默FOXO4阴性对照+H/R组(siRNA-NC+H/R组)。Con组细胞正常培养。H/R组细胞进行缺氧6 h复氧6 h处理。OF+H/R组、OF-NC+H/R组、siFOXO4+H/R组和siRNA-NC+H/R组细胞在质粒或RNAoligo转染5 h后正常培养48 h, 再进行H/R处理。Cell Counting Kit-8试剂盒检测细胞活性, 乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)试剂盒检测培养液中LDH含量, 实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluoresce...     

绞股蓝皂苷调节HMGB1-RAGE信号通路对骨肉瘤细胞恶性生物学行为的影响

目的 探讨绞股蓝皂苷(Gyp)调节高迁移率族蛋白B1-晚期糖基化终产物受体(HMGB1-RAGE)信号通路对骨肉瘤细胞恶性生物学行为的影响及其机制。方法 使用不同浓度(0～400μmol/L)绞股蓝皂苷处理MG63细胞,CCK-8检测细胞活力。将MG63细胞分为对照组(Control组)、绞股蓝皂苷低、中、高浓度组(Gyp-L组、Gyp-M组、Gyp-H组,50、100、200μmol/L Gyp)、绞股蓝皂苷高浓度+过表达HMGB1阴性对照组(Gyp-H+pcDNA-NC组,200μmol/L Gyp+转染pcDNA-NC质粒)和绞股蓝皂苷高浓度+过表达HMGB1组(Gyp-H+pcDNA-HMGB1组,200μmol/L Gyp+转染pcDNA-HMGB1质粒)。Edu检测细胞增殖水平;Transwell小室和划痕愈合实验检测细胞侵袭和迁移能力;ELISA检测转化生长因子-β(TGF-β)、基质金属蛋白酶(MMP-9)和白介素-6(IL-6)水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测通路、凋亡及EMT相关蛋白。随后建立骨肉瘤移植小鼠模型,在体检验绞股蓝皂苷对骨肉瘤移...     

鱼藤素通过AKT/FoxO1信号通路诱导胃癌细胞凋亡的作用机制

目的：研究鱼藤素(De)诱导SGC-7901胃癌细胞凋亡的其作用机制。方法：运用CCK-8细胞活力检测法考察不同浓度(10、20、40、60、80、100 mol/L)鱼藤素作用24、48 h对SGC-7901胃癌细胞的细胞毒性;将SGC-7901胃癌细胞分为对照组及20、40 mol/L鱼藤素药物组,给药作用24 h后,蛋白质印迹法检测p-AKTThr308、叉头框蛋白O1(FoxO1)、B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）等蛋白的表达水平;运用蛋白激酶B（AKT）基因转染使SGC-7901胃癌细胞中AKT过表达,然后给予20、40 mol/L鱼藤素给药作用24 h,以未用AKT基因转染的SGC-7901胃癌细胞作为对照组蛋白质印迹法检测p-AKTThr308、FoxO1、Bcl-2等蛋白的表达水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测FoxO1、Bcl-2、Bax mRNA的表达水平。结果：不同浓度的鱼藤素对SGC-7901胃癌细胞均具有一定的细胞毒性;20、40 mol/L鱼藤素给药作用24 h能够显著降低SGC-7901胃癌细胞中p-AKTThr308、Bcl-2等蛋白的表达水平,升高FoxO1的表达水平;与对照组比较,AKT基因转染后,SGC-7901胃癌细胞中p-AKTThr308、Bcl-2等蛋白表达水平升高,FoxO1蛋白表达降低,与模型组比较,20、40 mol/L鱼藤素给药作用后能够降低p-AKTThr308、Bcl-2等蛋白的表达水平,降低Bcl-2 mRNA的表达水平,升高FoxO1及Bax的表达水平。结论：鱼藤素能够通过作用于AKT/FoxO1信号通路诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡。     

琥珀酸盐受体介导Foxm1表达促进肺纤维化

目的:探讨琥珀酸盐受体(succinate receptor,SUCNR1)在肺纤维化发生发展中的作用和机制.方法:用SUCNR1敲除(SUCNR1-/-)小鼠构建博来霉素诱导的肺纤维化模型,观察对肺纤维化的影响.组织生长因子[β1(tissue growth factor β1,TGF-β1)刺激SUCNR1-/-原代肺成纤维细胞,MTT检测细胞增殖、Western blot检测细胞外基质(Collagen Ⅰ和α-SMA)生成.检测各组肺纤维化小鼠肺组织中叉头框蛋白M1(forkhead box protein M1,Foxm1)表达,使用Foxm1抑制剂处理TGF-β.1和琥珀酸盐刺激的原代肺成纤维细胞,观察对细胞增殖和细胞外基质生成的影响.结果:SUCNR1-/-小鼠肺纤维化较SUCNR1wt明显减轻.刺激SUCNR1-/-原代肺成纤维细胞增殖能力、Collagen Ⅰ和α-SMA生成明显降低.Foxm1在博来霉素诱导的肺纤维化模型中明显升高,但在SUCNR1-/-模型中明显减少;抑制Foxm1可减少TGF-β1和琥珀酸盐诱导的肺成纤维细胞增殖、Collagen Ⅰ和α-SMA生成.结论:SUCNR1参与了肺纤维化的发生发展,其可能机制是通过促进Foxm1表达而启动肺成纤维细胞.     

环状RNA在妇科恶性肿瘤中的研究进展

环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类不具有5' 末端帽子和3' 末端poly(A)尾巴,并以共价键形成环状结构的RNA分子,广泛存在于真核生物细胞中。近年来,随着高通量测序技术和生物信息学的发展,研究学者在各类细胞中检测到了大量内源性circRNA的表达,并发现其具有miRNA海绵、调控基因表达及翻译等生物学功能。越来越多的研究证实circRNA在胶质瘤、结直肠癌、膀胱癌等恶性肿瘤有显著的差异表达,发挥着癌基因或抑癌基因的作用,有望成为恶性肿瘤的新型诊断标记物、分子治疗靶点和预后评估指标。本文就circRNA的形成机制、生物学特性、功能及其在妇科恶性肿瘤领域的最新研究进展作一详细综述。