褪黑素对吗啡戒断大鼠脑内cAMP和cGMP含量的影响

目的 :观察褪黑素 (MT)对吗啡戒断大鼠不同脑区cAMP和cGMP含量的影响。方法 :以剂量递增法连续皮下注射吗啡建立吗啡依赖模型 ,采用放射免疫学方法测定脑内cAMP和cGMP的含量。结果 :(1)MT对大鼠吗啡戒断症状具有明显的抑制作用 ;(2 )与对照组比较 ,吗啡依赖大鼠的纹状体、间脑、中脑、脑桥和海马内cAMP含量显著增高 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,cGMP含量显著下降 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。与吗啡依赖组比较 ,催促戒断大鼠海马和纹状体内cAMP的含量显著升高 (P <0 0 5 ) ,而cGMP含量显著下降 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,其他部位则无明显变化 ;(3)褪黑素急性治疗可使吗啡戒断大鼠纹状体、间脑、中脑、脑桥和海马内cAMP含量明显下降 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,cGMP含量明显增高 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 :MT可显著抑制大鼠吗啡戒断反应 ,并与调节中枢cAMP和cGMP含量有关。     

PD大鼠移植后神经元凋亡及褪黑素的抗凋亡作用

目的探讨PD大鼠移植后神经元凋亡的时程特点及褪黑素的抗凋亡作用。方法将大鼠PD模型分为3组,即胚鼠腹侧中脑组织(VM)移植组、褪黑素(MT)干预组及对照组;采用原位末端标记法(TUNEL)结合流式细胞术及免疫组化方法,对3组的神经元凋亡情况进行定量分析。结果神经细胞在移植后1~5天凋亡达到高峰,此后逐渐平缓下降;褪黑素干预组各个时相点凋亡细胞数均明显低于胚VM移植组。结论PD大鼠移植后1~5天是细胞凋亡的高峰期;褪黑素具有明显的抗凋亡作用。     

大鼠出生前接触苯妥英和(或)褪黑素对学习记忆的影响

目的　探讨褪黑素对苯妥英诱发的仔代学习记忆功能发育异常的影响。方法　Wistar孕大鼠于妊娠d 11～ 14ig苯妥英 10 0 ,2 0 0mg·kg- 1·d- 1或合并ig褪黑素 4 0mg·kg- 1(每日 3次 ) ,观察F1代仔鼠的味觉回避反射、穿梭反射和Morris水迷宫空间识别能力。结果　出生前染毒仔鼠成年后味觉回避反射、主动回避反射及空间识别等学习和记忆能力下降。褪黑素和苯妥英合并用药组仔鼠上述 3种学习和记忆能力均有不同程度的改善。结论　褪黑素对苯妥英诱发的大鼠仔代学习记忆功能发育异常具有拮抗作用 ,该效应可能与其拮抗胚胎脑组织中氧化应激反应有关。     

大鼠出生前接触苯妥英和褪黑素对仔代反射功能发育及自发运动的影响

目的 :探讨苯妥英 (DPH)神经发育毒性与胚胎脑组织中自由基产生和氧化应激反应的关系。方法 :Wistar孕鼠于妊娠d 11～ 14经 0 ,10 0 ,2 0 0mg·kg-1DPH或合并 4 0mg·kg-1褪黑素 (MT)染毒处理 ,研究MT对DPH的仔代反射功能发育及自发运动损害作用的拮抗效应。结果 :孕鼠在染毒期及染毒后增重下降 ,仔代体重减轻 ,哺乳期死亡率增高 ;DPH染毒仔鼠的转身运动增多 ,空中翻正反射及游泳能力发育延迟 ,成年后行走次数、站立次数、刻板动作等自发活动增多 ,旋转手比率增多 ,对阿朴吗啡“激发”反应性增强。MT和DPH合并处理可明显拮抗上述DPH仔鼠的行为异常。结论 :氧化性损伤在DPH神经发育毒性发生中发挥重要作用 ,而MT可拮抗其毒性作用。     

不同褪黑素治疗方案对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠内源性神经干细胞增殖的影响

目的 探讨不同褪黑素治疗方案对缺氧缺血性脑损伤（HIBD）新生大鼠脑内源性神经干细胞（NSCs）增殖及远期组织学的影响,以寻求褪黑素治疗的较优方案。方法 将96只7日龄Sprague-Dawley大鼠随机分为正常对照组、缺氧缺血性脑损伤（HIBD）组、单剂量即刻褪黑素治疗（SDIT）组及7日连续褪黑素治疗（7DCT）组（n=24）。HIBD大鼠模型采用分离并电凝大鼠右侧颈总动脉,低氧舱（氧气浓度为8%±0.01%）内缺氧2 h的方法建立。造模后7 d,采用增殖细胞核抗原（PCNA）/巢蛋白（Nestin）免疫荧光双标法检测各组大鼠侧脑室室管膜下区（SVZ）及海马齿状回（DG）区内源性NSCs的增殖情况（n=8）;采用Western blot法检测各组大鼠脑Nestin蛋白的表达水平（n=8）。造模后28 d,采用苏木精-伊红染色（HE）和尼氏染色法观察海马CA1区的组织病理学及锥体细胞数的变化（n=8）。结果 免疫荧光染色结果显示：SDIT组和7DCT组PCNA⁺Nestin⁺DAPI⁺细胞数均较HIBD组增加,且7DCT组显著多于SDIT组（P < 0.01）;Western blot结果显示：SDIT组与7DCT组Nestin蛋白的表达水平均显著高于HIBD组,且7DCT组显著高于SDIT组（P < 0.05）;HE染色结果显示：SDIT组及7DCT组细胞损伤减轻;尼氏染色结果显示：SDIT组和7DCT组锥体细胞数均较HIBD组增加,且7DCT组显著高于SDIT组（P < 0.01）。结论 SDIT和7DCT均可促进HIBD新生大鼠脑内源性NSCs的增殖,减轻远期组织学损伤,且7DCT疗效优于SDIT。     

褪黑素与褪黑素受体在成人甲状腺肿瘤中的表达及其意义

目的:研究甲状腺肿瘤患者褪黑素(MLT)与褪黑素受体(MR)表达的改变及意义。方法:取甲状腺肿瘤(腺瘤及腺癌)组织及腺瘤旁1cm正常组织匀浆及自身外周血,用ELISA方法检测MLT浓度改变,以免疫组化SP法检测MR蛋白改变,RT-PCR半定量分析MR亚型mRNA表达的改变。结果:ELISA方法显示,甲状腺肿瘤组织匀浆上清MLT浓度较自身外周血明显增高;甲状腺腺癌组高于腺瘤组和瘤旁组织组;甲状腺腺瘤组高于瘤旁组织组,但无统计学差异;各组外周血MLT浓度无统计学差异。免疫组化方法显示,成人甲状腺腺癌细胞膜、细胞质和细胞核中MT2亚型蛋白均呈棕褐色强阳性染色( ),较腺瘤及瘤旁正常甲状腺组织染色强度明显增加;mt1受体蛋白亚型表达无差异。RT-PCR结果显示,人甲状腺腺瘤、腺癌及瘤旁正常甲状腺组织均有mt1、MT2受体表达,甲状腺腺瘤组mt1、MT2受体亚型表达量与正常甲状腺组织无差异,甲状腺腺癌组MT2受体亚型表达量较正常甲状腺组织明显增加,mt1受体亚型表达量无差异。结论:成人甲状腺肿瘤组织中MLT浓聚,存在mt1、MT2受体亚型,其中腺癌的细胞膜、细胞质、细胞核内MT2呈高表达。提示MLT与甲状腺肿瘤有一定关联,可能主要通过MT2受体发挥抗甲状腺腺癌作用。     

褪黑素对顺铂诱导急性肾损伤小鼠肾组织Ki67、MPO的影响

目的 探讨褪黑素对顺铂(cisplatin,CP)诱导的小鼠急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)肾组织中Ki67、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)蛋白表达的影响。方法 将40只SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组(Control组)、模型组(Cisplatin组)、治疗组(Cis+Mel组)及褪黑素组(Mel组),每组10只。Cisplatin组和Cis+Mel组采用腹腔一次性注射CP(15 mg·kg^-1)建立小鼠AKI模型,Cis+Mel组在注射CP 2 h后腹腔注射褪黑素(20mg·kg^-1),每日1次,连续给药3 d,Mel组一次性腹腔注射褪黑素(20 mg·kg^-1),观察各组小鼠精神状态及每天体质量。取小鼠肾脏,用质量分数4%多聚甲醛溶液固定,苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肾组织形态学改变,免疫组化法检测肾组织中Ki67、MPO蛋白表达。结果 与Control组比较,Cisplatin组小鼠体质量下降,差异有统计学意义(P<0.001),肾组织中...     

褪黑素及其尿代谢产物诊断中枢性性早熟的价值与研究进展

褪黑素（N-乙酰基-5-甲氧基色胺）是松果体分泌的一种受昼夜节律调节的神经内分泌激素,受下丘脑视交叉上核（SCN）调控,主要于夜间呈脉冲式分泌,使生物体的功能活动适应外界环境变化。调节生殖系统是其主要功能之一,褪黑素可通过影响下丘脑促性腺激素释放激素（GnRH）介导的神经元的功能活动、直接抑制性腺组织等途径对下丘脑-垂体-性腺轴起负性调节作用,从而抑制性腺发育。褪黑素在人体中主要通过肝脏代谢,其次是肾脏,主要代谢产物从尿液排出。其中,尿6-羟基硫酸褪黑素可较准确地反映循环中褪黑素水平。因采样方便、无创可重复性强且不受昼夜激素变化的影响,检测尿6-羟基硫酸褪黑素逐渐被应用于探索中枢性性早熟的诊断方法的研究中。现结合既往研究情况,就褪黑素对下丘脑-垂体-性腺轴（HPG axis）及生殖系统的作用做一综述,并探讨检测尿代谢物6-羟基硫酸褪黑素这一无创检查辅助诊断中枢性性早熟（CPP）的临床意义和可行性,为进一步简化中枢性性早熟诊断流程及提高患者及家属依从性提供依据。     

外源性褪黑素对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠皮质酮、糖皮质激素受体mRNA的影响及自身受体的变化

目的 观察外源性褪黑素对缺氧缺血性脑损伤(HIBD)新生大鼠干预后不同时间点肾上腺组织中褪黑素受体1及糖皮质激素受体mRNA和血浆皮质酮水平的变化.方法 7日龄SD火鼠随机分为治疗组、模型组,假手术组和正常组.常压低体积分数氧建立HIBD模型.治疗组新生大鼠腹腔注射褪黑素10 mg/kg;模型组和假手术组新生大鼠注射乙醇载体溶液(0.05 g/L)10 mg/kg;正常组不作任何干顶.各组分别于HIBD完成2、4、8、12、24、48 h 6个时间点摘取其肾上腺组织,采用反转录多聚酶链式反应法半定量测定各组褪黑素受体1及糖皮质激素受体mRNA的表达;暴露心脏,右心室采血,采用放射免疫分析法检测各组血浆皮质酮水平.结果 模型组2 h肾上腺组织中褪黑素受体1及精皮质激素受体mRNA表达下调,血浆皮质酮水平显著升高,4 h达高峰(Pa<0.05);治疗组血浆皮质酬及肾上腺组织中褪黑素受体1变化均不明显(Pa>0.05),糖皮质激素受体在24 h恢复正常生理水平.结论 缺氧缺血应激反应刺激下丘脑-垂体-肾上腺皮质系统过度兴奋,引发机体的应激损伤,血浆皮质酮和肾上腺组织的精皮质激素受体参与HIBD的病理生理过程,外源性褪黑索可能通过自身受体调控应激激素,降低内源性皮质酮水平,使糖皮质激素受体表达上调,减轻HIBD后的过度应激损伤.