RP-HPLC法测定转基因贯叶连翘植株中褪黑素

目的 建立测定褪黑素的反相高效液相色谱紫外分析方法，分析并测定通过组培获得的贯叶连翘不同转基因株系及其亲本植株的褪黑素。方法 以Symmetry C18 (150 mm×4.6 mm，5.0 μm)为色谱柱；100 mmol乙酸铵甲醇(80∶20)为流动相，体积流量为0.8 mL/min；检测波长为265.8 nm，灵敏度为2.00 AUFS。结果 褪黑素浓度在20～500 ng/mL线性关系良好(R2=0.999 2)，平均加样回收率为98.09%(n=6)，RSD为2.21%，最小检出量为1.0 ng/mL。褪黑素峰保留时间约为8.8 min。结论 该方法可以简便准确分析不同株系贯叶连翘中的褪黑激素的量；贯叶连翘YXu55(含庆大霉素抗性标记和AANAT-HIOMT基因)转基因株系的褪黑素的量均高于pZP122(仅含庆大霉素抗性标记，不含AANAT-HIOMT基因的空白质粒)转基因株系和未转基因的对照植株；而pZP122转基因株系褪黑素的量跟未转基因的对照植株的量几乎相等。     

褪黑素对卡因酸介导大鼠海马神经元毒性的影响

目的探讨褪黑素对腹腔注射卡因酸介导大鼠海马神经元损害的影响.方法将大鼠随机分成3组,实验组给予腹腔注射卡因酸,治疗组给予腹腔注射卡因酸和褪黑素,对照组给予腹腔注射等体积磷酸缓冲液(PBS);3天后以尼氏染色法检测大鼠海马神经元,DNA缺口末端标记(TUNEL)法检测海马神经元凋亡.结果大鼠海马神经元计数,尼氏染色实验组及治疗组明显少于对照组(P＜0.01),治疗组明显高于实验组(P＜0.01);TUNEL染色阳性细胞数治疗组明显低于实验组(P＜0.01).结论褪黑素对腹腔注射卡因酸介导大鼠海马神经元凋亡具有保护作用.     

褪黑素受体1B基因多态性与青少年骨密度的相关性

目的探讨褪黑素受体1B基因(MTNR1B)多态性与骨密度之间的相关性。方法选取140名16~20岁之间的正常女性,采用双能X线骨密度吸收仪测量双侧近端股骨的骨密度。同时,采取外周静脉血,采用试剂盒提取DNA。根据人类单倍体图计划(HapMap)提供的汉族人数据,我们在MTNR1B基因上选取了6个标签SNP(tagSNPs)。通过PCR-RFLP的方法检测褪黑素受体1B基因上6个标签SNP的基因型。采用ANOVA的统计学方法比较不同基因型对应骨密度大小。结果MTNR1B基因6个多态性位点各基因型所对应的骨密度,没有明显差异(P>0.05)。结论褪黑素受体1B基因多态性与骨密度之间没有相关性。     

褪黑素在鸡脊柱侧凸模型中的影响

目的　通过鸡松果体蒂部切断的方法 ,研究褪黑素在松果体切除鸡脊柱侧凸动物模型中的作用。方法　 10只刚孵育出的WhiteLeghorn鸡作为对照组 ,未行任何处理 ,控制白天 12h光照 (强度 5 0 0Lux)、夜间 12h完全黑暗 (强度 0 - 5lux)条件下饲养 ;2 0只WhiteLeghorn鸡在鸡龄 3d时行松果体切除 ,控制光照条件同对照组 ;2 0只WhiteLeghorn鸡 3d时行松果体蒂部切断术 ,控制光照同对照组。 5周时留取所有鸡白天 (mid -day)和夜间 (mid -night)的血清 ,用RIA试剂盒测定血清中褪黑素含量。所有的鸡处死后 ,取骨骼标本 ,行脊柱前后位平片检查。结果　 5周时 ,对照组褪黑素含量呈现明显白天低 (5 7.2 5± 7.4 3)pg/ml,夜间高 (2 5 7.92± 2 6 .0 9)pg/ml的周期性变化。松果体切除组褪黑素含量 ,白天为 (6 0 .0 5± 5 .4 8)pg/ml,夜间为 (5 5 .0 9± 8.35 )pg/ml,其分泌维持低水平。松果体蒂部切断组褪黑素含量 ,白天为 (5 8.77± 8.4 4 )pg/ml,夜间为 (2 4 8.4 7± 2 7.2 1)pg/ml,仍呈白天低 ,夜间高的周期性变化。X线检查 :对照组 10只鸡无脊柱侧凸发生 ;松果体切除组 2 0只鸡中 9只鸡发生了脊柱侧凸 ,发生率为 4 5 % ;松果体蒂部切断组 2 0只鸡中有 11只发生了侧弯 ,发生率为 5 5 %。结论　松果体切除和松果体蒂部     

调和阴阳法针灸对老年不寐患者睡眠质量及MT、NE、5-HT水平的影响

目的 探讨调和阴阳法针灸对老年不寐患者睡眠质量及褪黑素（MT）、去甲肾上腺素（NE）、5-羟色胺（5-HT）水平的影响。方法 选取2020年7月—2022年7月河北医科大学第一医院收治的老年不寐患者120例,采用随机数表法分为观察组和对照组,每组60例。对照组采取常规药物治疗,观察组在对照组基础上联合调和阴阳法针灸。比较两组临床疗效,同时评估其中医证候积分和匹兹堡睡眠质量指数（PSQI）评分,测定MT、NE、5-HT、多巴胺（DA）、γ-氨基丁酸（GABA）水平,观察记录不良反应发生情况。结果 观察组总有效率高于对照组（P <0.05）;观察组治疗前后入睡困难、多梦易醒、神疲食少、目赤口苦、舌红少津、脉弦数、舌苔黄评分的差值均高于对照组（P <0.05）。观察组与对照组治疗前及治疗后2、4周的PSQI评分比较,结果 ①不同时间点PSQI评分比较,差异有统计学意义（F =17.894,P =0.000）;②两组PSQI评分比较,差异有统计学意义（F =26.894,P =0.000）,观察组PSQI评分较低,相对睡眠质量较好;③观察组与对照组PSQI评分变化趋势比较,差异有统计学意义（F =45.247,P =0.000）。观察组治疗前后睡眠总时间、快速眼动睡眠期、睡眠潜伏期、醒觉时间、睡眠效率的差值均高于对照组（P <0.05）;观察组治疗前后MT、NE、5-HT的差值均高于对照组（P <0.05）;观察组治疗前后DA、GABA的差值均高于对照组（P <0.05）;两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义（P >0.05）。结论 调和阴阳法针灸治疗老年失眠症疗效显著,不仅能有效改善患者中医症状、睡眠质量及睡眠结构,还能改善血清MT、NE、5-HT、DA、GABA水平,安全性较高。     

基于铁死亡探讨褪黑素缓解布比卡因脊髓神经毒性的机制

目的：探讨褪黑素（MT）能否通过抑制铁死亡缓解布比卡因脊髓神经毒性。方法：将36只成年雄性SPF级SD大鼠随机分为3组：生理盐水组（N组）、布比卡因组（B组）、褪黑素与布比卡因共处理组（BM组）,各组于0 d、1 d、2 d、3 d测定最大抗伤害效应百分比（%MPE）、BBB评分进行行为学评估,并于给药后3 d取材,取腰膨大处脊髓组织进行HE、尼氏染色观察各组脊髓组织神经元病理损伤情况和神经元存活数量,透射电镜观察线粒体超微结构改变,多重免疫荧光检测活性氧（ROS）表达水平,ELISA检测谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）、铁含量,western blotting检测脊髓组织GPX4、4HNE的蛋白表达水平。结果：与N组比较,B组%MPE升高,BBB评分降低,脊髓组织空泡增多,存活神经元数量减少,脊髓组织损伤程度较重,线粒体缩小,双层膜密度增加,线粒体嵴消失或断裂,ROS、MDA、铁含量增多,GSH降低,4HNE蛋白表达升高,GPX4蛋白表达降低（均P<0.05）。与B组比较,BM组%MPE降低,BBB评分升高,脊髓组织损伤较轻,脊髓组织空泡减少,存活神经元增多,线粒体损伤改善...     

汉族成人部分外周组织褪黑素受体分布及意义

褪黑素 (melatonin ,Mel)具有广泛的生物学效应 ,但其在生物体内作用的靶器官未完全明确 ,阻碍了对它作用机制的进一步研究。本实验室研究显示人胚胎甲状腺、肾上腺、心血管等组织均存在MR。因而 ,明确外周组织是否存在MR ,对于研究Mel在更为广泛的生物学作用及其机制具有重要意义。目的 :证实汉族成人骨骼肌和皮肤等外周组织存在褪黑素受体 (mela toninreceptor,MR) ,并研究MR亚型及其亚细胞分布。方法 :所有组织均取自健康志愿者。用免疫组织化学和逆转录 -多聚酶链反应 (RT -PCR)产物基因测序等方法证实人骨骼肌组织存在MR及其亚…     

褪黑素对睡眠剥夺大鼠记忆的影响

目的探讨褪黑素对睡眠剥夺(SD)大鼠记忆的影响及其机制。方法24只大鼠随机分为对照组(SD 生理盐水)和2个实验组(SD 小、大剂量褪黑素),用小平台水环境法建立大鼠SD模型,SD48h和SD72h后用水迷宫测试大鼠的记忆能力,最后检测大鼠大脑皮层和海马中一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)含量。结果实验组大鼠SD48h和SD72h水迷宫反应时均明显小于对照组(F=11.89、5.44,P=0.00、0.012)。实验组大鼠大脑皮层和海马组织中NO和MDA含量明显低于对照组(F=14.31~27.41,P=0.00)。结论褪黑素对睡眠剥夺大鼠记忆障碍有改善作用,这可能与抑制睡眠剥夺大鼠大脑皮层和海马中NO及MDA的升高作用有关。