二氧化硒和顺铂联合作用对于人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的影响

目的探讨二氧化硒和顺铂联合作用对人卵巢癌细胞株裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法将4×106个卵巢癌细胞(来源于临床标本)接种于裸鼠皮下,然后待瘤株长至一定的体积后,腹腔注射顺铂,使得肿瘤对顺铂的反应逐渐下降,反复注射6次后取瘤株接种至下一代,反复传至三代后,取瘤株细胞注射至20只雌性裸鼠左侧腋下,待瘤长成约为5 mm×5 mm×5 mm时,随机分成对照组和实验组。实验组包括顺铂组、二氧化硒组,二氧化硒+顺铂组,每组5只裸鼠,对照组给予生理盐水0.4 mL/只,顺铂组腹腔内注射DDP 3 mg/kg 0.2 mL+生理盐水0.2 mL;二氧化硒组腹腔内注射二氧化硒30μg/mL 0.2 mL+生理盐水0.2 mL;顺铂联合二氧化硒组,腹腔内注射顺铂3 mg/kg 0.2 mL+二氧化硒30μg/mL 0.2 mL。3 d给药1次,共4次。给予后计算移植瘤的体积、瘤重、抑瘤率;瘤组织标本分别进行HE染色病理检查,和检测P-gp的表达。结果顺铂组,二氧化硒联合顺铂组对移植瘤的生长有明显抑制作用;病理检测瘤组织标本均提示经顺铂治疗后的肿瘤细胞发生了凋亡。结论二氧化硒可以增强顺铂对人卵巢癌移植瘤的生长抑制作用,并可以减轻...     

葡萄籽原花青素对人卵巢癌裸鼠移植瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨葡萄籽来源的原花青素对人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤增殖和凋亡的影响和机制.方法 建立24只人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤模型,分成3组(n=8):原花青素高浓度组(200 ms/kg)、原花青素低浓度组(100 mg/kg)、空白对照组.观察各组裸鼠皮下移植瘤生长情况,HE染色观察肿瘤细胞形态,流式细胞分析细胞凋亡,RT-PCR,Westernblot检测肿瘤细胞Bax,Caspase-3在RNA及蛋白水平的表达情况.结果 原花青素处理组皮下移植瘤抑瘤率分别为34.303%、28.594%,与对照组相比差异具有显著性(P<0.05);治疗组肿瘤细胞出现明显的凋亡形态学变化,流式细胞检测治疗组肿瘤细胞凋亡率分别为67.965%,24.650%;原花青素还可以明显增高Bax、Caspase-3 RNA和蛋白的表达,且呈浓度依赖性.结论 葡萄籽原花青素对卵巢癌皮下移植瘤生长有抑制作用,并促进其凋亡,其作用可能通过增强Bax、Caspase-3的表达而实现.     

基于线粒体凋亡信号通路的二甲双胍抗骨肉瘤体内外作用机制研究

目的:探讨二甲双胍对人骨肉瘤U2OS及143B细胞增殖、凋亡及裸鼠皮下瘤的影响及其机制。方法:MTT法(MTT比色法)检测二甲双胍对骨肉瘤细胞生长增殖的影响;Hoechst33342染色观察细胞凋亡的形态学变化;Annexin V/PI双染经流式细胞仪检测骨肉瘤细胞凋亡及细胞周期运转的影响;Western blot(免疫印迹试验)检测凋亡通路相关蛋白的影响。建立裸鼠荷骨肉瘤动物模型,观察对骨肉瘤细胞体内增殖的影响。结果:50mM浓度的二甲双胍分别作用于143B细胞24、48及72h以后,细胞存活率分别为45.73%、35.16%及28.42%。二甲双胍处理的骨肉瘤细胞呈现明显强于对照组的颗粒状蓝色荧光,核皱缩、核碎裂、染色质边集并可见凋亡小体。20mM浓度二甲双胍处理后,U2OS、143B细胞的凋亡率分别30.31%、26.18%。U2OS细胞阻滞于S期,143B细胞阻滞于细胞周期G0/G1期。Westem blot法示随着二甲双胍浓度增加抗凋亡分子Bcl-2、Bcl-xl等水平明显下降,促凋亡分子如Bax等水平明显增加,线粒体中Cyt C也逐渐释放到细胞质中。有效剂量的二甲双胍联合顺铂裸鼠体内可抑制143B皮下瘤的生长增殖,抑制率为67.1%,未能观察到二甲双胍组可以有效抑制其脏器转移的发生。结论:二甲双胍主要是通过线粒体介导的细胞凋亡通路来诱导人骨肉瘤细胞U2OS和143B细胞发生凋亡的。     

茉莉酸甲酯对人肝癌细胞HepG-2裸鼠皮下移植瘤生长抑制作用的研究

目的通过建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型，观察茉莉酸甲酯（methyiasmonate，MeJA）对移植瘤的生长抑制作用，方法实验分为对照组和MeJA组、全反式维甲酸（all-trans retinoic acid，ATRA）组、MeJA＋ATRA3种处理组、观测裸鼠成瘤情况和周围血甲胎蛋白以及肿瘤组织形态学变化；RT-PCR检测瘤体中Bcl-2及Bax的mRNA表达、结果与对照组比较，3种处理组移植瘤体积变小，重量减轻（P□0．05）；HE病理切片观察处理组可见癌细胞密度减少，瘤组织分化渐成熟；各处理组外周血甲胎蛋白值降低（P□0，05）；各处理组瘤体Bcl-2mRNA表达均减弱（P□0、05）、BaxmRNA表达均增强（P□0，05）．结论MeJA对人肝癌细胞HepG-2裸鼠皮下移植瘤生长具有抑制作用，其机制可能与诱导肿瘤细胞分化，启动凋亡，使肿瘤的增殖失控发生逆转，细胞表型和功能向正常转化有关、     

放射性碘标记反义寡核苷酸在荷人淋巴瘤裸鼠中的分布及显像研究

目的:探讨用放射性碘标记的框架区(framework region mRNA,FR)mRNA反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide,ASON)作为B细胞淋巴瘤反义显像剂及反义治疗药物的可能性.方法:通过氯胺-T法用碘[125Ⅰ]与碘[131Ⅰ]标记含酪胺的18聚体寡核苷酸获得125Ⅰ-或131Ⅰ-FR-ASON,建立荷人淋巴瘤裸鼠动物模型.将148 kBq125Ⅰ-FR-ASON(2～3μg)经尾静脉注入正常小鼠,于不同时间处死小鼠,测定不同组织及标准源的放射性计数.荷瘤裸鼠瘤内注入脂质体包裹的3.33 MBq131Ⅰ-FR-ASON(7～9μg),分别于注射后不同时间进行单光子发射计算机断层(single photon emission computer tomography,SPECT)显像,以脂质体包裹的正义寡核苷酸作为对照,24 h显像后处死裸鼠,取出血液、重要器官和肿瘤组织,测定各组织的放射性计数,并计算每克组织摄取率及肿瘤与非肿瘤组织放射性摄取比值(T/NT).结果:125Ⅰ-FR-ASON注入正常小鼠体内后1 h,各脏器的放射性摄取达高峰,24 h基本清除.肝、胃和肠放射性分布最高,骨、肌肉、脑中放射性分布较少.荷瘤裸鼠瘤内注入脂质体包裹的131Ⅰ标记ASON后立即用SPECT成像仅见肿瘤部位,1和2 h成像可见示踪剂从肿瘤到腹腔,24 h仍可见肿瘤显像.比较24 h反义组与正义组肿瘤的每克组织摄取率、T/NT均有显著性差异.结论:放射性碘标记ASON对淋巴瘤组织有很强的特异性,有望用于淋巴瘤反义显像和反义治疗的研究.     

胚胎干细胞构建小口径组织工程血管的研究

目的通过小鼠胚胎干细胞定向分化出的内皮细胞和平滑肌细胞构建组织工程小口径血管。方法将小鼠胚胎干细胞诱导分化出的内皮细胞和平滑肌细胞分别种植于管状聚乳酸-羟基乙酸（polylactic glycolic acid，PLGA）管腔内面，构建出小口径组织工程血管，再将其移植入裸鼠皮下，每隔1周取1次包埋的小口径组织工程血管，共取3次；再行HE染色，免疫组化行内皮细胞、平滑肌细胞鉴定，并且在倒置相差显微镜下观察其形态。结果倒置相差显微镜下观察结果显示小鼠胚胎干细胞诱导分化出的平滑肌细胞呈长梭形，而内皮细胞呈“鹅卵石”样；HE染色显示平滑肌、内皮细胞在PLGA表面上延伸生长；动物体内移植实验结果显示，管状PLGA皮下小口径组织工程血管移植后逐渐降解、直至变薄中断，免疫组织化学和HE染色显示管腔内的血管平滑肌样细胞和内皮样细胞在PLGA上呈片状融合生长，并见大量的细胞外基质。结论胚胎干细胞诱导的平滑肌和内皮细胞与PLGA有良好亲和性，可以用胚胎干细胞与PLGA制作小口径组织工程血管。     

薏苡仁酯对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤的放射增敏作用

目的：探讨薏苡仁酯(coixenolide,CXL)对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤辐射效应的影响。方法：将该肿瘤细胞株CNE-2Z移植到裸鼠,成瘤后经CXL预处理再进行γ射线外照射。结果：CXL以量效方式提高移植瘤的放射敏感性。与对照组比较,肿瘤生长缓慢,放射损伤修复时间延长。放射增敏率7．19％～26．28％。结论：CXL对人鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤具有放射增敏作用。     

利用siRNA沉默VEGF对膀胱癌生长的影响

目的研究VEGF特异性RNA干扰对膀胱癌细胞体内外增殖的影响。方法针对VEGF构建siRNA真核表达载体Psilencer^TM -VEGF-siRNA，并转染至膀胱癌细胞T24。RT-PCR观察VEGF的基因沉默效果；MTT比色分析检测细胞体外增殖能力；流式细胞计数检测细胞的凋亡。同时，通过裸鼠移植瘤模型观察VEGF基因沉默效果及对膀胱癌体内治疗的效果。结果转染siVEGF后膀胱癌细胞的VEG基因的表达显著被抑制（最高抑制率达79％）。与对照组比较，转染siVEGF组T24细胞的增殖活性明显低于转染阴性对照质粒组和空白对照组（P〈0．01）；流式细胞计数结果显示细胞发生凋亡。裸鼠体内致瘤实验显示，转染siVEGF组T24细胞在裸鼠体内增殖显著降低，肿瘤生长减慢。结论siVEGF能够有效的抑制膀胱癌中VEGF的表达，从而有效抑制膀胱癌细胞的生长。     

裸鼠皮下种植性肝癌模型的建立

背景:目前采用Huh7肝癌细胞在BALB/c裸小鼠皮下种植性成瘤的报道较多,但对其成瘤后稳定性的研究较少。目的:建立稳定的皮下种植性裸鼠肝癌模型。方法:取1.5×106个对数期细胞Huh7肝癌细胞,种植于裸鼠皮下。成瘤后从体质量、大体形态,肿瘤生长情况,反转录-聚合酶链式反应,苏木精-伊红染色及免疫组织化学多方面进行稳定性及病理学特征鉴定。结果与结论:肿瘤形成的潜伏期约12d,肿瘤成功率为92.8%。种植肿瘤组小鼠体质量较正常对照小鼠明显减轻,肿瘤生长迅速,甲胎蛋白基因及蛋白强阳性表达,细胞分裂明显。表明成功建立了稳定的裸鼠皮下种植性肝癌模型。