MiRNA let-7a对人喉鳞癌细胞增殖的抑制作用CSCD

目的探讨miRNA let-7a调控高迁移率族蛋白2(HMGA2)对人喉鳞癌细胞株TU212增殖的影响。方法合成let-7a模拟体(let-7a mimics)并采用阳离子脂质体法瞬时转染入喉癌TU212细胞,裸鼠皮下注射TU212细胞,构建裸鼠移植瘤模型。RT-qPCR和Western blot法分别检测转染后TU212细胞及移植瘤内let-7a和HMGA2的表达。结果在过表达let-7a的喉癌TU212细胞中,HMGA2的转录和翻译水平下调,细胞增殖能力降低。体外成瘤实验证实,与let-7a NC组和空白对照组相比,转染let-7a mimics的喉癌细胞TU212成瘤组织的质量和体积均显著下降;let-7a过表达的TU212成瘤组织中HMGA2的mRNA和蛋白水平均明显下调。结论let-7a能显著抑制HMGA2的mRNA和蛋白表达,进而显著抑制喉癌细胞的增殖。     

宫颈癌裸鼠模型的建立和应用进展

近年在临床基础上进行回顾性研究探讨宫颈癌相关病因、诊断指标及愈后的同时,日益重视建立动物模型进行前瞻性研究.宫颈癌裸鼠模型的建立为其侵袭转移机制的研究、治疗药物的筛选、治疗方法的选择提供了重要的手段和研究工具,为进一步改善宫颈癌患者的预后直至治愈开辟了广泛的研究途径.通过对模型的种类、制作方法和应用进行综述,提出了一些有待深入研究的问题.     

抑制MDC1基因蛋白表达对裸鼠食管癌细胞移植瘤大小及放疗敏感程度的影响

目的分析抑制MDC1基因蛋白表达对裸鼠食管癌细胞移植瘤大小及放疗敏感程度的影响。方法取54只SPF级BALB/C雄性裸鼠,构建食管癌动物模型。通过MDC1 mRNA序列,对有效的干扰序列与阴性对照序列进行设计并合成,且与载体p SIH1-H1-cop GFP生成重组质粒。裸鼠随机分为6组,分别为空白对照组(Eca109细胞未进行任何处理)、阴性转染组(转染阴性Eca109细胞)、单一照射组(Eca109细胞仅进行放射线照射)、阳性转染组(转染阳性ECA09细胞)、阴性转染+照射组(转染阴性Eca109细胞联合放射线照射)、阳性转染+照射组(转染阳性ECA09细胞联合放射线照射),每组各9只。采用蛋白印迹法与实时荧光定量PCR法对MDC1蛋白及mRNA表达量进行检测,取MDC1阳性转染Eca109细胞、阴性转染的Eca109细胞,分别将其接种于裸鼠。记录各组裸鼠移植瘤照射后1周、2周、3周、4周的体积变化情况,并用流式细胞仪对裸鼠移植瘤组织中细胞周期分布及细胞凋亡情况进行检测,且根据蛋白印迹法对各组裸鼠移植瘤组织中CHK2、CHK2-T68、CHK1表达情况进行检测,并将所得数据纳入统计学分析。结果p MDC1-shRNA质粒成功构建,且Eca109细胞得以转染,取得MDC1稳定转染的Eca109细胞。接种的裸鼠均成活,且于接种后7 d左右裸鼠爪下移植瘤形成。经15 Gy照射后,单一照射组、阴性转染+照射组裸鼠移植瘤生长速度较空白对照组明显减缓(P 0. 05),阳性转染+照射组裸鼠移植瘤生长速度较其它各组均明显减缓(P 0. 05),生长抑制率明显增高(P 0. 05)。照射前,各组裸鼠移植瘤体积的比较,并无显著差异(P 0. 05);照射后1周、2周、3周、4周,空白对照组裸鼠移植瘤增长较明显,阳性转染+照射组裸鼠移植瘤增长较缓慢,与单一照射组、阴性转染+照射组裸鼠移植瘤体积明显缩小(P 0. 05)。各组裸鼠移植瘤组织中细胞周期分布及细胞凋亡率的比较,并无显著差异(P 0. 05)。与对照组、单一照射组比较,阳性转染+照射组裸鼠移植瘤组织中CHK2-T68磷酸化水平显著下降(P 0. 05),而CHK2与CHK1蛋白表达水平较接近(P 0. 05)。结论 RNA干扰下调MDC1基因蛋白表达具有提高裸鼠食管癌细胞放疗敏感程度的作用,主要体现在阻滞放射线照射后裸鼠移植瘤的肿瘤体积增长方面。     

人浆细胞瘤Balb/c-nu-hu模型的建立

背景：建立相关动物模型是研究多发性骨髓瘤病理生理机制及药物治疗的重要方法。 目的：为研究多发性骨髓瘤细胞在人胎骨微环境内的生长特性,建立新的Balb/c-nu-hu人鼠嵌合的浆细胞瘤动物模型。 方法：取孕16周人女性胎儿1 cm左右胎骨植入Balb/c-nu裸鼠皮下,建立新的Balb/c-nu-hu鼠-人嵌合体;胎骨植入3周后将白细胞介素6依赖的人多发性骨髓瘤细胞株XG-7悬液注入胎骨内建立人浆细胞瘤Balb/c-nu-hu模型;观察裸鼠及肿瘤的生长情况。40 d后,取胎骨、肿瘤及裸鼠重要组织行苏木精-伊红染色及抗人CD34、CD59、CD138和VEGF免疫组织化学染色;X射线片前后对比检查模型裸鼠体内胎骨骨密度的变化。 结果与结论：胎骨表面及胎骨内见新生血管生成,且具有高度活性;XG-7细胞株能在植入人胎骨的裸鼠体内生长、浸润,形成髓外肿瘤,具有多种与浆细胞瘤相似的病理学特征,其中免疫组织化学结果显示CD138、CD59阳性说明其具有浆细胞表面标记,血管CD34阳性表明其为人源性;模型裸鼠出现恶病质,终末人骨髓瘤细胞浸润播散至鼠外周血及淋巴结,X射线片显示胎骨出现骨破坏。说明Balb/c-nu-hu鼠-人嵌合体模型可作为一种建立肿瘤模型可靠的基础动物载体,利用Balb/c-nu-hu鼠-人嵌合体可以成功建立人浆细胞瘤模型。     

裸鼠原位和异位脑肿瘤生物发光信号成像实验研究

目的应用生物发光成像技术,非侵入性地连续检测活体裸鼠原位和异位脑肿瘤发展演进过程。方法用SMPU-R-MND-luc载体转染人脑肿瘤U87MG细胞系,形成具有高荧光素酶活性的细胞克隆。在裸鼠脑内和胁腰部皮下植入持续表达荧光素酶的肿瘤细胞,建立原位和异位脑肿瘤模型,用影像学资料显示肿瘤部位。用光子发射定量分析动态监测肿瘤生长情况。结果成功地建立了表达荧光素酶活性的原位和异位脑肿瘤动物模型。采集反映肿瘤生长的生物发光信号,肿瘤细胞植入后不同时间点的发光信号值呈显著正相关,而且原位和异位脑肿瘤间存在明显差异。但生物发光脑肿瘤生物发光信号值在第4 d和第14 d时无显著差异。结论体内生物发光成像可以非侵入性地动态检测活体内脑肿瘤演进过程,为研究肿瘤发展机制及最佳治疗策略的选择提供了新的手段和工具。     

重构型Caspase-3对人脑胶质瘤抑瘤效应的实验研究

目的 探讨重构型Caspase-3对裸鼠皮下人脑胶质瘤生长的影响.方法 用脂质体包裹法将重构型Caspase-3基因的真核表达载体pcDNA-Rev-Caspase-3注入裸鼠皮下SHG 44人脑胶质瘤内,观察肿瘤生长情况并计算抑瘤率,结合病理组织学、电镜确定重构型Caspase-3对人脑胶质瘤的作用.结果 重构型Caspase-3在荷瘤裸鼠瘤体内获得表达,裸鼠肿瘤生长受到抑制,抑瘤率达到46.1%.结论 重构型Caspase-3能够促进肿瘤凋亡,导致肿瘤细胞死亡,抑制人脑胶质瘤生长.为进一步研究胶质瘤的基因治疗打下了基础.     

建立荷人结肠癌裸鼠移植瘤模型及MRI成像检查

背景:肿瘤移植瘤动物模型是探索和模拟肿瘤在人体内生物学行为的一种较为理想的方法,但应用MRI对模型进行评价的研究较少.目的:应用人结肠癌LoVo细胞接种裸鼠,鼠间移植传代,建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型,并应用MRI进行初步评价.方法:采用细胞移植和瘤块移植两种方法建立裸鼠移植瘤模型,观察移植瘤大体形态和组织病理学改变,测定宿主血液中的癌胚抗原值,应用免疫组化法观察肿瘤细胞中癌胚抗原的的分布,对6只裸鼠移植瘤模型进行MRI成像检查,并测量肿瘤、肝脏、肌肉组织的T1WI和T2WI的信噪比和三者的T1,T2值.结果与结论:移植瘤的形态和功能特性与原发肿瘤基本相似,移植瘤的移植成功率为100%;6只裸鼠模型的MRI测量结果显示,其肿瘤、肝脏、肌肉的T1WI平均信噪比分别为26.19,22_71,26.621 T2WI平均信噪比分别为9.42,7.66,8.59;平均T1值分别为1 039.22,907.63,1611.51 ms;平均T2值分别为1 09.95,37.31,64.35 ms.结果证实荷人结肠癌裸鼠模型的MRI成像图像清楚,组织分辨率高,测定组织的T1值和T2值可作为定量指标进行分析.     

裸鼠结直肠癌原位移植模型的建立和应用进展

疾病动物模型是当代生物医学研究中一种便于认识客观事物的非常重要的实验方法和手段.通过模型的间接性研究,可以有意识地改变那些在自然条件下不可能或不容易控制的因素,以观察模型的反应结果,并将研究结果推及于人类疾病,从而有助于更有效地揭示人类疾病的本质和发展规律.     

裸鼠皮下脑胶质瘤模型的复制与生长特性的观察

目的 建立裸鼠皮下C6脑胶质瘤模型,了解其生长特性.方法 将C6脑胶质细胞的培养悬液注射于裸鼠左侧腋下区皮下.观察接种区皮下肿瘤的生长状况,测量肿瘤直径并计算肿瘤体积,绘制肿瘤体积-时间生长曲线.HE染色和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化染色观察肿瘤细胞的生长及转移状况.结果 瘤细胞接种后第7天,裸鼠腋下区开始出现肿瘤,并呈加速生长.20 d后,皮下肿瘤呈快速的近指数生长.裸鼠生存期为22~48 d.光镜下见瘤体边界清晰,瘤内血管丰富,存在大量GFAP阳性细胞.结论 将体外培养的C6脑胶质瘤细胞植入裸鼠皮下,可建立重复性好的脑胶质瘤动物模型.     

视网膜母细胞瘤Y79细胞裸鼠玻璃体腔移植瘤模型的建立

目的建立视网膜母细胞瘤裸鼠玻璃体腔移植瘤模型并观察其生长状态,为开展肿瘤体内实验做好前期工作。方法培养视网膜母细胞瘤Y79细胞,调整细胞浓度为（4.5-5.5）×107/ml,注射至裸鼠玻璃体腔内（5μl/只）,观察肿瘤的生长状态。结果注射早期玻璃体腔内浑浊明显,而后依次出现肿瘤团块;角膜混浊;眼内结构破坏;眼球突出于眼外。摘除的肿瘤组织HE染色结果显示瘤细胞大小不等,胞浆少,核大,核分裂相常见。结论利用Y79细胞系可以建立良好的视网膜母细胞瘤玻璃体腔移植瘤模型,为人们探索视网膜母细胞瘤的发展规律以及治疗方法提供了有用的工具。