NLRP3炎症小体与糖尿病心肌病的关系及中医药调控研究进展

糖尿病心肌病（DCM）是糖尿病的并发症之一,是指发生在糖尿病中,其发病机制区别于其他心血管疾病如冠心病、心脏瓣膜病、亦或先天性心脏病的一种特发类心肌病,亦是多年以来糖尿病患者的主要致死病因之一。研究表明,DCM的发病机制与胰岛素抵抗、多种炎症反应激活、氧化应激增加、冠状动脉微循环受阻、晚期糖基化终产物（AGEs）积累等过程有密切联系。而在多种炎症反应中,NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎症小体激活可通过炎症的级联反应诱导分泌出大量促炎细胞因子,继而介导细胞焦亡过程,促进心肌损伤。目前基于NLRP3炎症小体在DCM损伤防治重要作用功能,国内外开展了大量中医药实验研究,证明了黄芪多糖、人参皂苷Rb₁等中药提取物或单味中药如云芝、冬虫夏草亦或抵挡汤、加味桃核承气汤等组方制剂及针刺、中医运动疗法等可通过调控NLRP3炎症小体的相关通路从而抑制其组装或激活,降低炎症反应,进而抑制DCM中心肌的重构,改善DCM的心脏功能。该文就NLRP3炎症小体与DCM的关系及中医药在此领域中发挥抗炎效应的研究进展进行综述,旨在为DCM开发治疗手段提供新的思路。     

基于AMPK/ULK1自噬通路探讨人参败毒散对溃疡性结肠炎黏膜屏障的干预机制

目的 研究人参败毒散调控腺苷酸活化蛋白激酶/Unc-51样激酶1（AMPK/ULK1）自噬通路抑制溃疡性结肠炎小鼠黏膜屏障损伤的作用机制。方法 将60只SD大鼠随机分为6组,分为正常组,模型组,柳氮磺胺吡啶肠溶片组（西药组）,人参败毒散高、中、低剂量组。通过2,4,6-三硝基苯磺酸（TNBS）/50%乙醇诱导UC模型,西药组（0.3125 g·kg^-1）、人参败毒散高、中、低剂量组（31.2、15.6、7.8 g·kg^-1）灌胃2周后,检测结肠组织病理学改变;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测腺苷酸活化蛋白（AMPKα）mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测紧密连接蛋白中闭合蛋白（Occludin）、紧密连接蛋白蛋白-2（Claudin-2）、自噬标志蛋白p62、微管相关蛋白1轻链3B（LC3B）及AMPK/ULK1通路磷酸化蛋白p-AMPK、p-ULK1的表达水平。结果 与正常组比较,模型组结肠损伤评分明显上调（P<0.05）,AMPKα mRNA表达明显下调（P<0.05）,p-AMPK、p-ULK1、Occludin蛋白水平及LC3Ⅱ/Ⅰ明显下调（P<0.05）,而p62、Claudin-2蛋白水平明显上调（P<0.05）;与模型组比较,人参败毒散高、中、低剂量组的结肠损伤评分下降,AMPKα mRNA明显上调,p-AMPK、p-ULK1、Occludin蛋白水平及LC3Ⅱ/Ⅰ上升,而p62、Claudin-2蛋白表达下降,以人参败毒散中剂量组干预效应最明显（P<0.05）。结论 人参败毒散可抗肠道黏膜屏障损伤,以人参败毒散中剂量组疗效最佳,其机制可能与激活AMPK/ULK1自噬通路有关,通过加速LC3Ⅰ向LC3Ⅱ转化,促进p62降解,从而改善紧密连接蛋白Occludin、Claudin-2功能,修复肠道机械屏障损伤。     

基于TRPV1/TRPA1调控TLR/NLRP3通路探讨中医药干预动脉粥样硬化研究进展

动脉粥样硬化（AS）是一种脂质堆积、血管内皮功能障碍导致的慢性炎症性疾病,Toll样受体（TLR）/核转录因子-κB(NF-κB)通路与NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体通路在动脉粥样硬化的产生中发挥着重要的致炎作用,而瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)与瞬时受体电位锚蛋白1(TRPA1)在动脉粥样硬化的发生过程中发挥着重要的保护作用。作者对近10年国内外期刊发表的相关研究进行梳理,研究显示,TRPV1/TRPA1的激活可以通过多种途径激活内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、抑制活性氧（ROS）、抑制胆固醇晶体（CC）的产生进而调控TLR/NF-κB与NLRP3炎性小体通路,抑制TLR/NLRP3介导的炎症反应。同时,中医药中多种单味药有效成分与方剂可有效激活TRPV1/TRPA1或其下游途径,其对动脉粥样硬化中TLR/NLRP3通路可能具有显著调控作用。该文进一步对已探明的方剂及中药单味药有效成分调控AS中TLR/NLRP3通路的机制进行梳理,将TRPV1/TRPA1调控TLR/NLRP3途径的机制与中药方剂与单体成分进行对应。为治疗动脉粥样硬化的中药药物相互作用机制提供新启发...     

鹰嘴豆芽素A通过调节TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路减轻卵清蛋白诱导哮喘大鼠的气道炎症

[目的] 探讨鹰嘴豆芽素A（BCA）通过调节Toll样受体4（TLR4）/核因子-κB（NF-κB）/NOD样受体蛋白3（NLRP3）信号通路对卵清蛋白（OVA）诱导哮喘大鼠气道炎症的影响。[方法] 将SD大鼠分为对照（CK）组、模型（Model）组、低剂量BCA组（BCA-L组,25 mg/kg）、高剂量BCA组（BCA-H组,100 mg/kg）、地塞米松阳性对照组（Dex组,1 mg/kg）、BCA-H+LPS（TLR4激活剂）组（100 mg/kg+0.1 mg/kg）,每组12只。除CK组,其他组均通过OVA诱导构建哮喘大鼠模型。建模成功24 h后,进行给药处理,给药每日1次,持续10 d。利用动物肺功能测定仪检测大鼠吸气阻力、呼气阻力、肺通气顺应性的变化;吉姆萨（Giemsa）染色检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数、淋巴细胞数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数;酶联免疫吸附剂测定（ELISA）检测BALF中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）、干扰素-γ（IFN-γ）水平;苏木精-伊红染色法（HE）染色检测大鼠肺组织病理变化;免疫组化检测大鼠肺组织中嗜酸性粒细胞趋化因子（Eotaxin）表达;蛋白质印迹法（Western Blot）检测大鼠肺组织中TLR4、p-NF-κB p65、NLRP3蛋白表达。[结果] 与CK组比较,Model组大鼠吸气阻力、呼气阻力、BALF中细胞总数、淋巴细胞数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数、TNF-α、IL-1β、IFN-γ水平升高,肺组织中的支气管及血管周围炎性细胞浸润明显,肺组织中Eotaxin阳性染色面积百分数、TLR4、p-NF-κB p65、NLRP3蛋白表达升高,肺通气顺应性降低（P<0.05）;与Model组比较,BCA-L组、BCA-H组、Dex组对应指标变化趋势与上述相反（P<0.05）;LPS减弱了高剂量BCA对哮喘大鼠气道炎症的改善作用。[结论] BCA可能通过抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路减轻OVA诱导哮喘大鼠的气道炎症。     

大骨节病患者踝关节软骨IGF-1、IGFBP2基因表达的特征及意义

目的探讨大骨节病(KBD)患者踝关节软骨胰岛素样生长因子1(IGF-1)、胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP2)基因表达的特征及意义。方法采用病例-对照研究方法,选择2010年1月至2016年12月在陕西省人民医院骨科住院的KBD患者10例为KBD组,并以同期因外伤致踝关节骨折但无距骨损伤的患者10例为对照组,收集两组患者软骨组织。分别采用免疫组织化学、实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法检测患者软骨组织中IGF-1、IGFBP2阳性细胞、mRNA和蛋白表达情况。根据KBD患者踝关节软骨IGF-1、IGFBP2基因表达情况,在陕西省人民医院选择1例创伤致截肢患者,取踝关节软骨制备软骨细胞进行体外细胞验证实验;将软骨细胞分为对照组(0 ng/ml T-2毒素)、T-2处理组(20 ng/ml T-2毒素)、T-2+IGFBP2沉默组(20 ng/ml T-2毒素+50 nmol/L IGFBP2 siRNA),采用MTT法和二甲基亚甲基蓝染色法检测3组软骨细胞活性及硫酸糖胺多糖(sGAG)分泌情况。结果对照组与KBD组患者软骨组织IGF-1[(47.26±8.97)、(68.15±7.42)个]、IGFBP2阳性细胞数[(27.56±5.40)、(71.85±7.62)个]比较,差异均有统计学意义(t=4.487、9.402,P均<0.01);与对照组比较,KBD组患者软骨组织IGF-1、IGFBP2 mRNA和蛋白表达水平均较高,差异均有统计学意义(t=3.340、20.700,4.684、8.699,P<0.05或<0.01)。细胞实验中,对照组、T-2处理组、T-2+IGFBP2沉默组软骨细胞活性和sGAG含量比较,差异均有统计学意义(F=226.70、80.66,P均<0.01);其中,T-2处理组、T-2+IGFBP2沉默组细胞活性、sGAG含量均低于对照组(P均<0.05),且T-2+IGFBP2沉默组均高于T-2处理组(P均<0.05)。结论KBD患者踝关节软骨中IGF-1、IGFBP2基因表达明显较高。沉默IGFBP2基因能够降低T-2毒素对软骨细胞活性及sGAG分泌的抑制作用。     

反反复复的盆腔囊肿

盆腔囊肿有多种类型,是令很多女性烦恼不已的疾病。因为不少类型不同的盆腔囊肿都有一个共同特点:如生生不息的野草,手术摘不尽,术后生又生。做手术不仅伤元气,而且有些情况还会影响以后的生育。对于这些反反复复的盆腔囊肿,女性朋友都要有意识地了解认识,学会保护自己。     

miR-216a-5p在HMGB1介导的表皮葡萄球菌感染致腹膜透析相关腹膜炎中的作用

 目的 探讨miR-216a-5p在高迁移率蛋白B1（HMGB1）介导的表皮葡萄球菌感染致小鼠腹膜透析相关腹膜炎（PDAP）中的作用及机制。方法 选取健康雄性C57BL/6J小鼠,随机分为对照组、感染组、感染+HMGB1抑制剂组,收集腹腔积液及腹膜组织分别进行白细胞计数、HE和免疫组织染色;Real-time PCR和Western Blot检测白细胞介素-1α（IL-1α）、白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因素-α（TNF-α）、HMGB1、核转录因子-κB （NF-κB）和核转录因子抑制蛋白（I-κB）的mRNA和蛋白表达水平;生信预测发现,miR-216a-5p可能与HMGB1结合,参与其诱导的PDAP的发生,并构建感染+miR-216a-5p mimics组小鼠,通过双荧光素酶报告基因检测验证miR-216a-5p和HMGB1的关系,采用Real-time PCR、Western Blot、免疫组织染色检测HMGB1的表达变化。结果 与对照组相比,感染组小鼠腹腔积液白细胞计数增多,炎性浸润明显,IL-1α、IL-6、TNF-α,以及HMGB1 mRNA和蛋白表达均升高（均P<0.05）;HMGB1抑制剂（甘草素）干预后,小鼠腹腔积液白细胞计数下降,炎性浸润改善,IL-1α、IL-6、TNF-α,以及HMGB1 mRNA和蛋白表达均下降（均P<0.05）。感染组小鼠NF-κB表达高于对照组,I-κB表达低于对照组;HMGB1抑制剂干预后NF-κB表达降低,I-κB表达升高（均P<0.05）。Real-time PCR结果证实,与对照组相比,miR-216a-5p的含量在感染组中显著减少;双荧光素酶报告基因检测提示,miR-216a-5p可直接作用于HMGB1的3’UTR区;与感染组相比,感染+miR-216a-5p mimics组小鼠中HMGB1 mRNA和蛋白表达均下降（均P<0.05）。结论 HMGB1在表皮葡萄球菌感染致小鼠PDAP中发挥重要作用,抑制HMGB1可改善小鼠炎症反应,miR-216a-5p可通过靶向HMGB1参与表皮葡萄球菌感染致PDAP的发生。     

超声清创联合重组人表皮生长因子治疗肛周脓肿合并感染的效果

目的探讨超声清创联合重组人表皮生长因子对肛周脓肿合并感染患者表皮细胞生长因子(Epidermal growth factor,EGF)、激活素A(Activin A,ACTA)水平及创面血流量的影响。方法选取2018年2月-2020年1月承德医学院附属医院肛周脓肿合并感染患者117例,依据随机数字表法分为对照A组(n=39)、对照B组(n=39)、联合组(n=39)。常规干预基础上对照A组采取超声清创,对照B组采取重组人表皮生长因子,联合组采取超声清创及重组人表皮生长因子。统计三组治疗情况、治疗前后疼痛程度评分、创面血流量及经皮氧分压、EGF、转化生长因子-β(Transforming growth factor-β,TGF-β)、ACTA、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)水平及临床疗效。结果联合组创面愈合时间、感染控制时间、住院时间分别为(12.39±2.01)d、(5.22±1.56)d、(13.91±2.51)d短于对照A组、对照B组,创面细菌清除率为(89.13±4.64)%高于对照A组、对照B组(P<0.001);治疗后1 d、3 d、7 d、14 d三组VAS评分较治疗前降低,且联合组低于对照A组、对照B组(P<0.05);治疗后1 d联合组创面血流量及经皮氧分压分别为(0.92±0.25)PU、(35.69±3.20)mmHg大于对照A组、对照B组(P<0.05);治疗后1 d联合组血清EGF、TGF-β分别为(0.70±0.11)μg/L、(0.68±0.12)μg/L高于对照A组、对照B组(P<0.05);治疗后1 d联合组血清ACTA、CRP分别为(9.45±3.58)μg/L、(5.71±2.68)mg/L低于对照A组、对照B组(P<0.05);联合组疗效优于A组和B组(P<0.05)。结论联合采取超声清创及重组人表皮生长因子治疗肛周脓肿合并感染,可改善创面愈合及感染控制情况,缓解疼痛程度,增加创面血流量及经皮氧分压,调节EGF、ACTA等水平,提高整体治疗效果。     

前列地尔辅助硫辛酸治疗糖尿病足溃疡合并感染的临床效果

目的探讨前列地尔辅助硫辛酸治疗糖尿病足溃疡合并感染对患者胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、纤维连接蛋白(FN)、血管内皮生长因子(VEGF)水平及足背血流动力学的影响。方法选取2017年5月-2019年5月新疆医科大学第一附属医院收治的104例糖尿病足溃疡合并感染患者,采用随机数字表法将所选患者分为研究组(n=52)和对照组(n=52)。对照组给予硫辛酸进行治疗,研究组在此基础上给予前列地尔进行治疗,两组均治疗4周。比较两组治疗4周后的下肢静息疼痛改善情况,治疗前、治疗4周后的血清IGF-1、FN、VEGF水平及足背动脉血流速度和足背动脉内径,统计两组治疗期间的不良反应发生率。结果治疗4周后,研究组下肢静息疼痛总改善率为96.15%,高于对照组(P<0.05)。与治疗前比,治疗4周后,两组血清IGF-1、FN、VEGF水平及足背动脉血流速度、足背动脉内径均升高,且研究组均高于对照组(P<0.05)。治疗期间,研究组不良反应发生率为5.77%,低于对照组(P<0.05)。结论前列地尔辅助硫辛酸治疗糖尿病足溃疡合并感染,可显著提高患者血清IGF-1、FN、VEGF水平,改善其足背血流动力学,并能缓解患者下肢静息疼痛,降低不良反应发生率。     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在车间洁净室污染同源性分析中的应用

目的调查车间洁净室的微生物污染来源。方法对车间的空气,环境和人员进行微生物采样和培养,然后使用MALDI-TOF-MS进行检测,并使用仪器配套的微生物鉴定系统进行同源性分析。结果共检出14种41株细菌。选择9株表皮葡萄球菌进行同源性分析,来源于人员手套和头套上的表皮葡萄球菌有94.00%的同源性。来源于沉降菌和地面环境及人员的表皮葡萄球菌之间有83.00%的同源性,均较标准菌株的71.00%为高。结论同源性分析证明车间洁净室的污染主要来自人员,其次来源于车间外环境。企业需要加强管理,防范微生物污染的发生。MALDI-TOF-MS可应用于快速检测复杂的环境菌并进行同源性分析。