蛴螬提取物对兔脉络膜新生血管VEGF和bFGF表达的影响

目的:评价蛴螬提取物对有色家兔脉络膜新生血管(cho-roidal neovascularization,CNV)血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的抑制作用。方法:有色家兔40只,实验组32只,空白对照组8只。实验组兔通过倍频Nd:YAG激光(波长为532nm)眼底光凝方式建立CNV模型。光凝后立即随机分为4组,每组8只(16眼),分别为实验对照组、维生素E治疗组、驻景丸加减方治疗组、蛴螬提取物治疗组。激光光凝后7,14,21,28d各组兔均行眼底照相观察、荧光素眼底血管造影(FFA)和光学相干断层扫描(OCT)检查。分别于光凝后14、28d两次处死,每次随机选取动物4只(8眼),检查完后空气注射处死动物摘取眼球后节行组织病理学检查,行VEGF和bFGF免疫组织化学分析,并行透射电镜观察,以评估蛴螬提取物对CNV的抑制效果。结果:光凝后14d,实验组CNV的生成率分别为47.9%、41.7%、43.3%和28.6%,经χ2检验,CNV生成率治疗组较对照组均降低(P<0.05),且蛴螬提取物组最低,与另外3组比较有统计学意义(P<0.05)。光凝后28d,光凝区纤维血管组织增生(FVP)厚度治疗组较对照组显著变薄(P<0.05)。且视网膜脉络膜巩膜切片新生血管定量分析及组织学切片,透射电镜观察结果显示实验治疗组CNV的生成与对照组相比均减少,差异有统计学意义(P<0.05);且蛴螬提取物治疗组表达低于其他组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:蛴螬提取物可以抑制实验性CNV中VEGF和bFGF的表达,从而可以抑制实验性CNV的形成。     

蛴螬矿物元素和维生素含量分析

目的 :研究蛴螬的矿物元素及维生素含量。方法 :原子吸收分光光度法及荧光法分析矿物元素含量 ,用紫外荧光法及 HPLC法测定维生素含量。结果 :蛴螬中 Ca、Mg、Cr、Fe、Zn的含量高是其重要的营养特征 ,Cu、Mn含量也非常丰富 ,蛴螬中 K/Na的比值也很高。 B族维生素含量较高。     

蛴螬提取物对视网膜新生血管大鼠趋化因子受体7及血管内皮生长因子表达的影响

目的:通过对蛴螬提取物干预实验性年龄相关性黄斑变性(age-related maculat degeneradon,AMD)实验研究,观察蛴螬提取物对实验眼脉络膜新生血管组织的趋化因子受体7(CXC chemokine receptor 7,CXCR7)及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响,同时比较口服、滴眼两种给药途径的差异。方法:建立病变易发生脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)大鼠模型,将32只大鼠随机分成A、B、C、D 4组。A组:健康空白组(8只);B组:模型组(8只);C组:口服组(8只);D组:滴眼组(8只)。C组予以蛴螬提取物,按5.6 g·kg~(-1),稀释至2 m L灌胃,每日1次;D组予以蛴螬滴眼液滴眼,每日4次;A、B、D组蒸馏水灌胃,每天1次,每次2 m L,A、B、C组予以玻璃酸钠滴眼液滴眼,每日4次。于造模后7 d、28 d行荧光素眼底血管造影检查,造模后28 d行免疫组化检测CXCR7与VEGF表达。结果:荧光素眼底血管造影检查显示:造模后第4周除B组眼底仍有荧光渗漏增多外,C、D组未见明显发展。CX-CR7与VEGF免疫组化结果显示:CXCR7与VEGF含量B组较A组显著上升,差异有统计学意义(P<0.05)。给药后,C、D组含量较B组明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),C、D组含量接近,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:蛴螬提取物可以抑制实验性CNV模型中CXCR7与VEGF的表达,从而可以抑制实验性CNV的形成。两种给药途径并无明显差异。     

蛴螬提取物对视网膜中央静脉阻塞模型兔小胶质 细胞CD68 表达的影响及机制研究

目的 探讨蛴螬提取物对实验性兔视网膜静脉阻塞（RVO）的治疗作用及相关机制。方法 选 取40 只兔并随机分为空白组、模型组、复方血栓通组及蛴螬组。除空白组外,其余3 组采用光化学动力 法复制RVO 动物模型,于给药后7、14 及28 d 行荧光素眼底血管造影术（FFA）,于给药后1、3、7、14 及28 d 行免疫组织化学检测白细胞分化抗原68（CD68）的表达。结果 FFA 检查显示,模型组给药7 d 后,中央静脉荧光渗漏、出血,出现无灌注区;复方血栓通组与蛴螬组出现无灌注区,但渗漏、出血较模型 组少;给药28 d 后,模型组渗漏、出血的静脉周围无灌注区面积增大,并出现新生血管;复方血栓通组渗 漏、出血明显减少;蛴螬组渗漏、出血基本吸收。复方血栓通组、蛴螬组与模型组给药后7、14 及28 d 的 无灌注区与视盘面积比值比较,差异有统计学意义（P <0.05）。免疫组织化学结果显示,各模型组CD68 表 达增加,复方血栓通和蛴螬提取物都使CD68 的阳性表达随时间的延长而减弱,但蛴螬组CD68 表达减弱 得更快。复方血栓通组、蛴螬组与模型组3、7、14 及28 d CD68 表达比较,差异有统计学意义（P <0.05）。 结论 复方血栓通与蛴螬提取物均不同程度抑制视网膜小胶质细胞的活化,而蛴螬提取物的抑制作用更明显, 说明其比单纯的活血化瘀药能更快地抑制小胶质细胞活化。     

蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡的影响

目的：研究蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡通路的影响，为天然药物蛴螬的开发提供实验和理论依据。方法:应用MTT法检测蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株的抗增殖作用及细胞毒活性；通过倒置显微镜、HE染色、吖碇橙（AO）/溴化乙啶（EB）荧光染色方法观察肿瘤细胞的形态学改变；应用流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化；应用免疫细胞化学技术（S-P法）检测用药前后凋亡通路中Bcl-2、Fas、caspase-9、caspase-3的表达改变，探讨蛴螬提取物对凋亡通路的影响。结果:(1)用MTT法检测结果表明，蛴螬提取物在体外对MCF-7人乳腺癌细胞株有明显的抑制增殖作用，实验组与对照组相比其生长抑制率有显著差异（P<0.01），而且这种抑制作用呈现浓度和时间的依赖性；(2)倒置显微镜观察表明，实验组可见胞核固缩、碎裂、凋亡小体形成等凋亡形态学变化；(3)HE染色表明实验组胞核浓缩呈蓝黑色、胞浆呈淡红色、核染色质浓缩、呈碎块状，有凋亡小体形成；(4)经AO／EB荧光染色观察结果表明，实验组出现凋亡细胞；(5)流式细胞仪结果表明实验组凋亡率明显增加，呈时间依赖性；(6)免疫细胞化学染色结果表明，实验组 Bcl-2表达下调，Fas、caspase-3、caspase-9表达均上调，与对照组比差异显著（P<0.01）。结论:①蛴螬提取物在体外显著抑制MCF-7人乳腺癌细胞株增殖；②蛴螬提取物对MCF-7人乳腺癌细胞株凋亡通路的影响机制可能是通过下调Bcl-2，上调Fas、caspase-3 、caspase-9的蛋白表达而起作用，是经由细胞凋亡的线粒体途径和死亡受体途径来完成凋亡的启动和执行。     

蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的研究蛴螬石油醚提取物对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法MTT法检测蛴螬石油醚提取物对体外培养的HeLa细胞株增殖抑制作用及细胞毒活性;末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的脱氧核苷酸缺口末端标记(TdT-mediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)法检测细胞凋亡;通过免疫细胞化学S-P法测定凋亡相关基因产物Bcl-2、Bax蛋白与凋亡相关蛋白caspase-8和caspase-3的表达情况。结果蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞的增殖抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性(P<0.01)。蛴螬石油醚提取物作用细胞后凋亡细胞数目随时间延长而增多;凋亡指数与药物处理呈时间依赖性和剂量依赖性。蛴螬石油醚提取物作用后Bcl-2蛋白表达均下降,Bax、caspase-8和caspase-3表达上升,4种蛋白表达各组间比较均差异显著(P<0.01)。结论蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用。蛴螬石油醚提取物对HeLa细胞抑制增殖作用(50μg/mL作用48h之前)主要以诱导凋亡为主。蛴螬石油醚提取物诱导凋亡作用可能与下调Bcl-2表达,上调Bax、caspase-8和caspase-3表达有关。     

白芍田蛴螬分布型及防治决策

本文阐明蛴螬混合种群在白芍田呈聚集分布,X~2检验表明,当田间虫口密度为2.5～8头/m~2时,符合负二项分布。以此计算出蛴螬不同发生程度下序贯抽样的接受线和拒绝线。