安颤灵对蛋白酶体抑制剂lactacystin诱导PC12细胞凋亡的影响

观察安颤灵含药血清对lactacystin诱导Pc12细胞凋亡的影响。方法：按照血清药理学实验方法制备安颤灵含药血清,采用lactacystin作用于PC12细胞,建立泛素-蛋白酶体系统损伤的细胞模型。将含药血清分为大、中、小剂量组,MTT方法检测各组的细胞活力;将对数生长期的PC12细胞分为正常组、lactacystin组（损伤组）、中药组,通过Tunel及免疫细胞化学方法,观察各组细胞凋亡情况。结果：与大、小剂量组相比,中剂量组细胞的存活率显著升高（P〈0．01）;与正常组相比,lactacystin组细胞凋亡指数明显增加（P〈0．01）;与lactacystin组相比,中药组细胞凋亡指数明显降低（P〈0．01）。结论：安颤灵含药血清具有抗lactacystin诱导的细胞凋亡作用。     

PSMA6/PSMC6/PSMA3基因多态性与系统性红斑狼疮发病的相关性

目的:明确蛋白酶体(PSM)相关基因单核苷酸多态性与中国人群系统性红斑狼疮(SLE)的相关性。方法:PCR扩增101例SLE患者和143名正常对照者外周血目的基因片段,通过二代测序对目的基因片段进行测序检测蛋白酶体20 s亚单位和相关ATP酶基因的4个目标位点PSMA6(rs2277460),PSMA3(rs2348071),PSMC6(rs2295826,rs2295827)的基因型及等位基因频率。结果:SLE组及对照组中rs2277460(GG,GA、AA)基因型频率分别为97.22%,1.85%%,0.93%和96.5%,3.5%,0;rs2348071AA,AG,GG分别为30.56%、53.7%、15.74%和33.57%、50.35%、16.08%;rs2295826AA,AG,GG分别为75.93%、24.07%、0和69.23%、29.37%、1.4%;rs2295827CC、CT、TT分别为78.7%、19.45%、1.85%和76.22%、20.98%、2.8%,均无统计学差异(P0.05)。结论:PSMA6/PSMC6/PSMA3 SNPs可能与SLE的发病无关。     

泛素蛋白酶体途径在急性早幼粒细胞白血病中作用的研究进展简

急性早幼粒细胞白血病（acute promyelocytic leukemia,APL）以表达PML-RARα为特征.泛素-蛋白酶体途径在全反式维甲酸及三氧化二砷诱导其降解过程中发挥重要作用,并参与细胞周期调节、转录调控等过程.深入研究该通路在APL中的作用有助于明确部分药物的起效机制及开拓APL的临床治疗思路.本文就泛素-蛋白酶体途径的组成、泛素-蛋白酶体途径介导的蛋白质修饰在APL中的作用、泛素化途径相关药物在APL中的应用进行综述.     

Keap1-Nrf2-ARE信号通路在多器官疾病中的研究进展

<正>Nrf2作为细胞抗氧化应激反应的核心转录因子,能够激活内源性抗氧化应答。在生理状态下,Nrf2分子与胞浆中的Keap1蛋白分子结合而处于非活性状态,通过泛素化-蛋白酶体途径进行降解,无法进入细胞核发挥转录活性。当机体受到亲电试剂刺激或处于氧化应激状态时,Nrf2与Keap1解偶联,Nrf2磷酸化后转移入核并与抗氧化反应原件(antioxidant response element,ARE)上的相应位     

新药时代自体造血干细胞移植在多发性骨髓瘤一线治疗中的地位

多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)患者的总生存期(overall survival, OS)在过去20年间从3年延长至8~10年, 这得益于蛋白酶体抑制剂和免疫调节药物等的广泛应用。即使在新药时代, 自体造血干细胞移植(autologous stem cell transplantation, ASCT)仍可显著提高移植后反应率, 增加微小残留病变阴性率, 延长无进展生存期。ASCT对OS的影响在不同研究中结果并不一致, 这主要与进展后采用不同治疗方案有关。随着更多新药的出现, ASCT后复发患者会有更多选择。故新药时代, ASCT仍是MM患者诱导治疗后的一线巩固方案。     

7蛋白酶体抑制剂对星形胶质细胞周期素D1和周期素依赖性激酶4表达的影响

目的：研究蛋白酶体抑制对体外培养的星形胶质细胞周期素Dl（cyclinD1）和周期素依赖性激酶4（CDK4）表达的影响。方法：SD乳鼠皮质星形胶质细胞原代培养,并纯化鉴定;予不同浓度（2和4μmol·L^-1）的蛋白酶体抑制剂（lactacystin）对第二代星形胶质细胞进行短期（12h）急性干预处理,应用免疫荧光及Westernblot检测星形胶质细胞cyclinD1和CDK4表达的水平。结果：纯化传代的皮质星形胶质细胞经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫荧光鉴定,其阳性率可达99％;lactacystin2和4μmol·L^-1可诱导星形胶质细胞cyclinDl和CDK4表达的下降,与对照组相比差异有显著统计学意义（P〈0．01）。结论：一定程度蛋白酶体活性抑制可诱导培养的星形胶质细胞cyclinD1和CDK4表达的减少,从而影响胶质细胞细胞周期,促进胶质细胞分化。提示蛋白酶体功能障碍后可能通过影响胶质细胞细胞周期来参与阿尔茨海默病的病理改变。     

泛素特异性肽酶22调控乙型肝炎病毒X蛋白水平及功能

目的探究泛素特异性肽酶22(ubiquitin specific peptidase 22, USP22)与乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitis B virus X protein, HBx)相互作用对HBx蛋白水平及其生物学功能的影响。方法通过GST pull-down、免疫共沉淀以及激光共聚焦试验检测HBx与USP22的相互作用。瞬时转染USP22真核表达质粒或干扰USP22表达的siRNA, Western blot检测肝细胞中HBx蛋白表达水平的变化。以环己酰亚胺(cycloheximide, CHX)、蛋白酶体抑制剂MG132(carbobenzoxy-Leu-Leu-leucinal, MG132)分别处理转染后的细胞, 检测HBx蛋白的降解速率。进一步通过细胞内泛素化试验检测USP22对HBx泛素化的影响, 明确USP22影响HBx蛋白稳定性的具体机制。最后, 以双荧光素酶报告试验和平板克隆试验检测USP22对HBx生物学功能的影响。结果 USP22与HBx存在相互作用。USP22显著增加HBx蛋白稳定性, 并通过去除HBx的泛素化抑制HBx通过蛋白酶体降解, 进而增强...     

泛素-蛋白酶体系统及其参与造血调控的相关研究进展

泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)是目前已知最重要且有高度选择性、能量依赖性的细胞内非溶酶体途径降解蛋白质的系统,是机体调节细胞内蛋白水平与功能的一个重要机制.作为重要的造血调控因子,TGF-β家族诱导造血细胞的存活、增生、分化,能抑制白血病细胞的异常增殖.诱导白血病细胞分化.Smads是介导TGF-β家族上述功能的胞内关键信号分子,而泛素蛋白酶可调控Smads蛋白的活性,从而参与对机体造血功能的调控,本文仅对泛素-蛋白酶体系统所介导Smads活性调控参与造血的机制进行探讨.     

宫颈鳞状细胞癌组织中Skp2与P27~（Kip1）的表达及其临床意义

目的探讨细胞S相激酶相关蛋白（Skp2）和P27Kip1在宫颈鳞状细胞癌（SCC）发生过程中的表达及二者关系。方法用免疫组化方法检测10例正常宫颈组织、43例宫颈上皮内瘤变（CIN）和34例SCC组织中Skp2、P27Kip1蛋白的表达,用RT-PCR法对34例新鲜SCC组织进行Skp2 mRNA表达的检测。结果Skp2 mRNA在SCC呈过表达;Skp2蛋白表达在SCC发生过程中呈增高趋势;Skp2蛋白阳性率与淋巴结转移有关（P〈0.05）;COX分析表明,Skp2是一个独立的预后参数。P27Kip1蛋白在正常宫颈中表达最高,随病变进展表达呈下降趋势;P27Kip1蛋白阳性率与淋巴结转移相关（P〈0.05）;Skp2与P27Kip1表达呈显著负相关（P〈0.01）。结论Skp2高表达和P27Kip1失活致细胞增殖周期失调在SCC发生过程中起重要作用,可作为SCC早期诊断、临床生物学行为和预后评价的新的参考指标。     

泛素蛋白酶体途径在高氧肺损伤发病机制中的研究进展

泛素蛋白酶体途径是生物中特异的蛋白质降解系统之一。它参与体内许多重要的生理过程,临床中许多疾病的发生都与该途径的激活有关。高氧将产生氧自由基,引起细胞损伤、凋亡、坏死,同时引起炎性介质产生、炎性细胞浸润,从而产生肺部炎性反应、组织损伤和异常修复发生。本文将探讨泛素蛋白酶体途径的组成、功能及其在高氧肺损伤发病机制的作用。