仙甲汤对前列腺增生大鼠前列腺组织蛋白激酶表达的影响

目的观察大鼠前列腺组织蛋白激酶A、蛋白激酶C的表达.方法去势加丙酸睾酮注射法复制大鼠前列腺增生模型,原位杂交法检测各组大鼠前列腺组织蛋白激酶A、蛋白激酶C的表达.结果前列腺组织PKA mRNA阳性表达率正常组最高,模型组最低,与仙甲汤各剂量组比较有极显著性差异(P＜0.01);前列腺组织PKC mRNA阳性表达率则相反,正常组最低,模型组最高,与各治疗组比较有板显著性差异(P＜0.01).结论模型大鼠前列腺组织蛋白激酶调控失衡,仙甲汤可通过调控蛋白激酶信号因子抑制前列腺增生.     

血小板、蛋白激酶C、脂蛋白(a)检测在老年突发性聋诊断中的价值

目的研究血小板(PLT)、蛋白激酶C(PKC)及脂蛋白a[LP(a)]在老年性突发性聋中的变化及作用.方法老年性突发性耳聋和健康对照组各30例,分别检测脂蛋白(a)[LP(a)],总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、载脂蛋白AL(apoAI)、载脂蛋白B(apoB)、血小板(PLT)、膜和浆蛋白激酶C(M-PKC和P-PKC),对检测结果做统计学分析.结果突发性耳聋组LP(a)、apoB、TG均明显升高,HDL-C则明显减低,与对照组比较,差异均有显著性(LP(a)t=2.33,P＜0.05.apoB:t=2.83,P＜0.晒.TG:t=2.81,P＜0.05.HDL-C:t=3.58,P＜0.01),PLT计数明显减低,与对照组比较,差异具有显著性t=2.25,P＜0.05.M-PKC活性增高、P-PKC活性减低,与对照组比较,前者差异具有非常显著性(t=3.26,P＜0.01),后者差异具有显著性(t=2.22,P＜0.05).结论老年性突发性耳聋时LP(a)、apoB及M-PKC增高,而PLT减低,在血栓形成过程中起重要的作用,对突发性耳聋的发病起促进作用.     

泛素水解酶22调控丝裂原活化蛋白激酶激酶6基因的转录活性

目的：克隆丝裂原活化蛋白激酶激酶6(mitogen-activated protein kinase kinase 6,MKK6)基因启动子,研究泛 素水解酶22(ubiquitin specific peptidase 22,USP22)对MKK6转录活性的调控作用。方法：采用PCR扩增MKK6基因启动 子片段,并以该片段为模板对USP22结合位点进行定点突变,将野生型与突变型启动子片段定向插入荧光素酶表达 载体pGL3-Basic;用重组载体与内参质粒pRL-TK共转染HeLa细胞,行双荧光素酶活性检测以确定其转录活性;利用 染色质免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,ChIP)实验观察USP22蛋白与MKK6启动子是否存在直接的结合;下 调USP22表达后,检测MKK6转录活性的变化。结果：成功扩增MKK6启动子及其突变体并构建荧光素酶表达载体; USP22结合位点的突变导致该启动子活性在HeLa细胞中明显降低(P<0.05);USP22与MKK6启动子在细胞中存在直接结 合;抑制USP22的表达导致MKK6转录水平明显下降(P<0.05)。结论：在HeLa细胞中,USP22有效地调控MKK6基因的 转录。     

SETD5介导AKT1磷酸化调控结肠癌细胞的迁移和5-FU敏感性

目的：探讨含SET结构域蛋白5（SETD5）对结肠癌细胞增殖、迁移和对5-氟尿嘧啶（5-FU）药物敏感性的影响及机制。方法：常规培养结肠癌细胞,用Lipofectamine 2000将siSETD5-NC、si-SETD5-1~3质粒转染至HT-29细胞中,将其分为对照组（未处理）、si-SETD5-NC组、si-SETD5组和si-SETD5+SC79组,si-SETD5+SC79组HT-29细胞转染质粒的同时用10 μmol/L SC79处理。qPCR法检测NCM460、HT-29和LoVo细胞中SETD5 mRNA表达,流式细胞术、细胞划痕法、WB法和CCK-8法分别检测各组HT-29细胞的凋亡情况、迁移能力、相关蛋白的表达,以及对5-FU 的敏感性。结果：SETD5 mRNA在HT-29、LoVo细胞中均呈高表达（均P<0.01）。在HT-29细胞中成功地敲减了SETD5 mRNA（P<0.01）。敲减SETD5 mRNA可明显抑制HT-29细胞的增殖活性（P<0.01）、迁移能力（P<0.01）、相关蛋白（SETD5、p-PI3K、p-AKT1、p-mTOR 蛋白）的表达（均P<0.01）、促进细胞凋亡（P<0.01）,且提高其对 5-FU 的敏感性（P<0.01）,这些作用均可被 AKT 激活剂 SC79 部分阻挡（P<0.05 或 P<0.01）。结论：SETD5在HT-29、LoVo细胞中高表达,SETD5通过PI3K/AKT1通路促进结肠癌HT-29细胞的增殖、迁移,且降低其对5-FU的敏感性,SETD5是结肠癌临床诊断、治疗的潜在靶点。     

芒果苷对胰岛素抵抗HepG2细胞糖脂代谢的影响

目的:分析芒果苷(MGF)对胰岛素抵抗HepG2细胞(IR-HepG2细胞)糖脂代谢的影响,并探讨潜在机制.方法:以人肝癌HepG2细胞为对象,以1 mmol/L棕榈酸+2 mmol/L油酸联合培养建立IR-HepG2细胞模型.以盐酸二甲双胍为阳性对照,分别检测低、中、高浓度MGF(125、250、500μmol/L)...     

DAPK在肿瘤中的研究进展

死亡相关蛋白激酶(death-associated protein kinase,DAPK)是钙调蛋白调节的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在整个凋亡系统中发挥着重要作用,是凋亡正性调节因子之一.DAPK被认为是抑癌基因,与肿瘤的发生、发展、转移密切联系,在肿瘤早期诊断、评价预后及基因靶向治疗等方面有重要意义.     

抑制星形胶质细胞丝裂原活化蛋白激酶14减轻谷氨酸兴奋性毒性神经元损伤的机制

目的:探讨抑制星形胶质细胞丝裂原活化蛋白激酶14（MAPK14）表达对减轻谷氨酸兴奋性毒性进而发挥神经元保护的作用机制。方法:慢病毒介导MAPK14干扰载体由上海吉凯基因化学技术有限公司合成,星形胶质细胞从出生48 h的SD大鼠获取,通过慢病毒介导转染体外培养的星形胶质细胞,按照随机数字表法分为三组：（1）未转染组,为...     

中性粒细胞胞外诱捕网对人羊膜上皮细胞增殖和凋亡的影响及其可能机制

目的探讨中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)对人羊膜上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法取正常妊娠足月择期剖宫产孕妇术前外周血, 体外提取中性粒细胞并诱导生成NETs。体外培养人羊膜上皮细胞(WISH细胞)并分为4组:(1)对照组:不经过任何处理;(2)NETs组:用NETs(500 ng/ml)刺激WISH细胞;(3)NETs+SB203580(p38激酶抑制剂)组:用SB203580(5 μmol/L)预处理WISH细胞30 min后加入NETs(500 ng/ml);(4)SB203580组:只加入SB203580。处理48 h后, 分别通过细胞增殖实验、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)检测实验和流式细胞技术检测各组细胞增殖比率、细胞上清LDH水平和细胞凋亡率。4组间比较采用单因素方差分析, 两两比较采用LSD-t检验。结果 (1)细胞增殖情况:NETs组细胞增殖比率低于对照组[(9.379±0.775)%与(36.560±1.208)%, LSD-t=20.78, P<0.001];N...     

解毒通络方通过TGF-β1/Smad和ROCK通路对大鼠心肌纤维化的改善作用

目的:探讨解毒通络方在大鼠心肌纤维化进程中的作用,并阐明其作用机制.方法:30只SPF级Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型组、卡托普利组、低剂量解毒通络方组和高剂量解毒通络方组(n=6),以5 mg·kg-1盐酸异丙肾上腺素皮下注射法复制大鼠心肌纤维化模型,卡托普利组、低剂量解毒通络方组和高剂量解毒通络方组大鼠分...