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41.
Objective To construct a short hairpin RNA (shRNA) adenovirus vector targeting protein kinase BI (PKB1/Akt1) and cyclooxygenase-2 (COX-2) and observe their expression in human gastric carcinoma cell line SGC-7901. Methods Akt1 and COX-2 shRNA expression frames were sub-cloned to pGSadeno adenovirus vector by homologous recombination technology to construct pGSadeno-Aktl + COX-2 ( pGSadeno-A + C) vector. Furthermore after screening and amplification,recombinant ade-novirus vector was digested with Pacl and transfected into HEK293 cells. The replication adenovirus rAd5-A + C was packed and amplified in the HEK293 cells, and its titer was detected. After human SGC-7901 cells in vitro were transfected by rAd5-A + C,Akt1 and COX-2 mRNA and protein expression levels were detected by real-time PCR and Western blot respectively. Compared with rAdS-A + C,SGC-7901 and gen-eral rAd5-HK were selected as the negative controls. Results The recombinant adenovirus rAd5-A + C was constructed successfully and its titer reached 1.0 ×1010 pfu/ml. Aktl and COX-2 mRNA expression was downregulated significantly, and their ACt values ( 12.26±0.05 and 5.41±0.09 respectively ) were higher than rAd5-HK group (10.63±0.02 and 3.75 +0.08 respectively) and control group (10.57± 0.02 and 3.73±0.08 respectively) (P <0.01 ). There was no significant difference between rAd5-HK and control groups (P >0.05). Aktl and COX-2 protein expression was downregulated by 70.5% and 63.7% respectively ( P < 0.01 ) in rAd5-HK group as compared with control group ( P > 0.05 ). Conclu-sion The shRNA aclenovirus vector targeting Akt1 and COX-2 can specifically inhibit Akt1 and COX-2 expression,and this may be a new strategy in gastric carcinoma gene therapy targeting Akt1 and COX-2. 相似文献
42.
卵巢癌中蛋白激酶C的表达及其临床意义 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨上皮性卵巢癌组织蛋白激酶C (proteinkinaseC ,PKC)的表达和化疗耐药的关系 ,以及与P -糖蛋白 (P -gp)的相关性。方法 用免疫组化S -P法检测 35例卵巢上皮性肿瘤组织、 2 0例卵巢良性肿瘤组织和 2 0例正常卵巢组织中PKC和P -gp的表达 ,并进行相关临床因素分析。结果 ①PKC、P -gp在卵巢恶性肿瘤中的表达明显高于在良性及正常组织中的表达 ;并且PKC和P -gp的表达有相关性 (P <0 0 5 ) ;②卵巢癌PKC的表达与临床病理因素无直接关系 ;③恶性肿瘤中 ,初治和复发的PKC表达阳性率分别为 34 8%和 75 % ;④化疗对PKC表达阳性和阴性卵巢癌患者的有效率分别为 2 3 5 %、 6 6 7% (P <0 0 5 ) ;⑤PKC表达阴性患者的预后优于阳性者 (P =0 0 39)。结论 PKC表达与卵巢癌组织化疗耐药明显相关 ,可能在P -gp介导的卵巢癌多药耐药中起重要作用。 相似文献
43.
正常成人红细胞与大肠杆菌脂多糖温育后,胞膜蛋白激酶C活性显著增加,脂多糖这种作用呈现剂量和时间依赖性。结果提示脂多糖能激活红细胞蛋白激酶C。 相似文献
44.
目的 研究慢性"炎症性"肺动脉高压大鼠在肺动脉高压形成过程中肺动脉蛋白激酶C(PKC)亚型的表达.方法 建立野百合碱诱导的慢性"炎症性"肺动脉高压大鼠模型,应用Western blot技术检测肺动脉高压形成过程中大鼠肺动脉四种PKC亚型(PKCα、PKCβⅡ、PKCδ和PKCε)的表达变化.结果 PKCα、PKCβⅡ和PKCδ亚型在正常和肺动脉高压大鼠肺动脉中均有表达,而PKCε亚型未检测到.在肺动脉高压形成过程中,大鼠肺动脉胞浆和胞膜组分表达的PKCα均逐渐上升,到第14天达到高峰后略有下降,且胞膜表达量的升高远比胞浆明显.胞浆PKCβⅡ和PKCδ表达量均在第8天达最高,而胞膜中二者均表现出持续升高的趋势.结论 PKCα、PKCβⅡ和PKCδ亚型可能参与了慢性"炎症性"肺动脉高压的形成,其表达变化可能与其转位有关. 相似文献
45.
46.
注射用环磷腺苷为蛋白激酶致活剂,可改善心肌缺氧,缓解冠心病症状及改善心电图。本品属于注射剂,为确保临床用药安全,《中国药典》2005年版规定需进行无菌检查。本试验按2005年版《中国药典(二部)》所载“无菌检查法”,验证并建立注射用环磷腺苷的无菌检查方法。 相似文献
47.
Attenuation of myocardial injury due to oxygen free radicals(OFR) by pretreatment with OFR or calcitonin gene-related peptide 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:研究氧自由基(OFR)及降钙素基因相关肽(CGRP)预处置对OFR所致离体大鼠心脏损伤的拮抗作用.方法:Langendorf法灌流心脏,电解KH液产生OFR.结果:CGRP或OFR预处置减轻OFR所致心脏收缩功能下降,冠脉流量减少和肌酸激酶(CK)释放增加.蛋白激酶C(PKC)抑制剂H7可取消OFR预处置的心脏保护作用(对照组,OFR损伤组,OFR预处置组,H7加OFR预处置组及H7组的CK释放量分别是110±7,215±23,169±14,240±30,113±19U·L-1).结论:OFR或CGRP预处置对OFR所致心肌损伤具有拮抗作用,该作用与PKC激活有关. 相似文献
48.
实验性视网膜光化学损伤中的蛋白激酶C 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:研究实验性视网膜光化学损伤中蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)活性的改变;探索地塞米松(dexamethasone,DXM)对视网膜中PKC活性的影响。
方法;48只SD大鼠分为对照组和DXM组,后者于光照前3天开始,连续5天腹膜腔注射DXM 1mg/(kg·d)。经(1 900±106.9)Ix的绿色荧光灯(λ=510nm~560nm)连续照射24小时后的6小时和1、3、7、14天,进行视网膜PKC活性检测。
结果:光化学损伤后视网膜中的PKC活性在短暂的上升后即出现持续性的下降;DXM对PKC的活性改变无明显作用。
结论:光化学损伤中的视网膜功能障碍可能与PKC活性的持续降低有关。
(中华眼底病杂志,1997,13:78-80) 相似文献
49.
目的:研究RhoA和蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)在舌癌细胞迁移过程中的作用。方法:采用Boyden趋化小室、细胞黏附试验和划痕法测定细胞的迁移能力,观察RhoA激动剂溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)及PKA激动剂cAMP对人舌癌细胞Tca8113的迁移作用。数据以SPSS10.0统计软件包进行t检验。结果:加入1μmol/L LPA和3μmol/L LPA后,细胞迁移数与对照组相比显著增加(P〈0.01),舌癌细胞的迁移能力显著增强。不同浓度LPA组细胞与先用100μmol/L cAMP或200μmol/L cAMP处理后再加入LPA组比较,各组在包被Matrigel或Fn基质表面上的黏附情况存在剂量依赖关系。经cAMP处理后,舌癌细胞在基质表面的黏附显著降低,且随着浓度的增加,其抑制作用更加显著。结论:RhoA的活化可以促进Tea8113细胞的迁移,而cAMP通过激活PKA,抑制LPA引起的RhoA活化.进而抑制细胞的迁移能力。 相似文献
50.
DNA依赖性蛋白激酶(DNA—dependent protein kinase catalytic subunit,DNA—PKcs)是唯一由DNA末端激活的真核细胞激酶,它在双链DNA损伤修复中起重要作用,生化分析指出DNA—PKcs激酶只有DNA末端连接蛋白存在时才能激活,Seki等从人胎脑cDNA文库中分离出该蛋白的全长cDNA,命名为激酶相互作用蛋白2(kinase interacting protein 2,KIP2), 相似文献