甘草黄酮对S180、H22荷瘤小鼠红细胞膜和肿瘤细胞膜Na^＋，K^＋-ATPase及Ca^2＋，Mg^2＋-ATPase活性的影响

目的观察甘草黄酮对S180、H22荷瘤小鼠红细胞膜和肿瘤细胞膜Na^ ，K^ -ATPse及Ca^2 ，Mg^2 -ATPase活性的影响。方法荷瘤小鼠分为治疗组(高剂量、中剂量、低剂量)和对照组(生理盐水组、环磷酰胺组)，分别测定各组红细胞膜和肿瘤细胞膜的Na^ ，K^ -ATPase及Ca^2 ，Mg^2 -ATPase活性。结果甘草黄酮可明显恢复红细胞膜Na^ ，K^ -ATPase及Ca^2 ，Mg^2 -ATPase活性；对肿瘤细胞膜上活性异常升高的Na^ ，K^ -ATPase及Ca^2 ，Mg^2 -ATPase有显著的抑制作用。结论甘草黄酮调节红细胞膜和肿瘤细胞膜Na^ ，K^ -ATPase及Ca^2 ，Mg^2 -ATPase活性功能可能是其抗肿瘤作用机理之一。     

荷瘤兔骨髓间充质干细胞在射频消融自体血清诱导下向肝样细胞的分化

目的:鉴于目前对体外培养诱导骨髓间充质干细胞向肝样细胞分化的条件掌握尚不成熟,尤其是无血清培养.实验拟将临床常用微创治疗同细胞移植结合,观察荷瘤兔骨髓间充质干细胞在射频消融兔肝肿瘤自体血清诱导下向肝样细胞的分化,寻求一种自体肝组织的修复方法.方法:实验于2006-09/2007-09在西安交通大学医学院中心实验室完成.实验室为教育部基因与环境研究重点实验室.[1]实验材料:健康新西兰大白兔,二三月龄,雌雄不限,体质量1.5～2.0kg,由西安交通大学医学院动物试验中心提供,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准.荷瘤种兔包块由西安交通大学第一医院介入中心刘亚民教授馈赠.[2]实验方法:取荷瘤种兔瘤组织块,在兔在肝脏右叶做一直径为2~3mm的隧道,将肿瘤组织块植入隧道底部制备肝肿瘤动物模型.射频消融治疗灭活荷瘤兔肝脏肿瘤及边缘1cm正常肝脏组织,于72h后取全血及骨髓.应用体外细胞培养技术自骨髓血中分离、纯化兔骨髓间充质干细胞后,取P2细胞在4种不同培养基培育:对照组:含体积分数为0.1胎牛血清的低糖DMEM培养液;射频兔肝肿瘤治疗血清组:无血清低糖DMEM培养液加入射频兔肝肿瘤治疗血清;射频肝肿瘤治疗血清热灭活组:无血清低糖DMEM培养液加入射频肝肿瘤治疗灭活血清;生长因子组:含0.1胎牛血清的低糖DMEM培养液加入肝细胞生长因子及表皮细胞生长因子.[3]实验评估:倒置显微镜下观查细胞形态变化,流式细胞仪测定细胞周期并观察其增殖及生长特征,免疫荧光法检测肝细胞标志物白蛋白及CK18表达,鉴定细胞性质及功能.结果:[1]原代、传代培养及流式细胞仪结果显示,射频肝肿瘤治疗兔血清及肝细胞生长因子、表皮生长因子对兔骨髓间充质干细胞的诱导能明显促进细胞的增殖,S G2 M期细胞百分数明显增高,2周后免疫荧光染色可见分化细胞表达肝细胞标志物CK18和白蛋白.[2]射频肝肿瘤治疗兔灭活血清及胎牛血清能使兔骨髓间充质干细胞生长,但不如射频肝肿瘤治疗兔血清及肝细胞生长因子、皮细胞生长因子促进细胞增殖明显(P<0.01),传代培养2周,细胞形态未见明显变化,未见肝细胞标志物CK18和白蛋白表达.结论:肿瘤射频消融兔血清可激活、诱导自体骨髓间充质干细胞增殖并向肝样细胞分化,使射频消融肿瘤治疗的同时行肝样细胞移植修复肝损伤成为可能.     

C6胶质瘤荷瘤大鼠刀照射后胶质瘤细胞死亡方式实验研究

目的 采用放射线照射大鼠C6脑胶质瘤模型，分析放射线诱导胶质瘤细胞死亡方式的发生规律。方法选用24只生后5—6周雌性SD大鼠，购自安徽医科大学实验动物中心。大鼠C6胶质瘤细胞购自中科院细胞库。所有大鼠均采用立体定向法制作脑胶质瘤模型，即人脑皮质下5mm注入4m体外培养和传代后的C6细胞悬液。随机抽签法将大鼠分为9Gy照射组、12Gy照射组和模型组，每组8只。前2组分别于造模后21d行照射剂量分别为9Gy、12Gy伽玛刀治疗，模型组未给予照射。治疗后1周取大鼠肿瘤与脑组织交界处组织，采用流式细胞仪检测肿瘤细胞坏死率及凋亡率，HE染色观察组织学变化。结果纳入大鼠24只，模mm和实验组2分别有1只大鼠在麻醉意外中死亡，其余22只大鼠均进入结果分析。①肿瘤细胞坏死率及凋亡率：两剂量照射组肿瘤细胞凋亡率和坏死率均高于模型组，差异有统计学意义（P〈0．05）；9Gy照射组肿瘤细胞的凋亡率高于12Gy照射组，坏死率低于12Gy照射组，差异有统计学意义（P〈0．01）。②组织学变化：各组肿瘤与脑组织均可见肿瘤生长，伽玛刀两剂量组治疗后出现了肿瘤中心坏死，坏死区细胞稀疏，向外细胞渐增多，其间含有很多的破碎细胞，再向外则为密集的瘤细胞，并有细胞内、外的水肿和出血，同时也有不同程度的核固缩细胞，12Gy照射组较9Gy照射组坏死增加。结论伽玛刀可诱导脑胶质瘤模型大鼠肿瘤细胞凋亡和坏死，在治疗剂量范围内，随着剂量的增加肿瘤坏死有增加趋势。     

当归贝母苦参丸加味方对荷瘤小鼠H22肝癌肿瘤组织MMP13和bFGF表达的影响

目的研究当归贝母苦参丸加味方对H22荷瘤小鼠瘤组织基质金属蛋白酶13(MMP13)和成纤维细胞生长因子2(bFGF)表达的影响。方法建立H22荷瘤小鼠模型进行体内抗肿瘤试验,将60只荷瘤小鼠随机分为模型组,顺铂阳性对照组,当归贝母苦参丸加味方高、低剂量组,当归贝母苦参丸加味方高、低剂量联合顺铂组,连续灌胃给药14d,观察肿瘤生长情况以及小鼠一般情况,肿瘤大体标本及HE染色后组织形态观察;RT-qPCR和免疫组织化学技术分别检测肿瘤组织中MMP13和bFGF的表达。结果大体观察剥离的肿瘤瘤体发现,模型组与中药低剂量组瘤体较大,瘤体内有溃烂,包膜基本完整;各治疗组瘤体较模型组相比较小,但包膜不完整,有不同程度溃烂,剥离易出血,当归贝母苦参丸加味方高、低剂量联合顺铂组瘤体小,包膜完整,肿瘤溃烂较少;HE染色病理形态观察发现,各治疗组结缔组织明显,细胞稀疏程度增加,坏死癌细胞数目增加。RT-qPCR检测显示,与模型组相比,各用药组中MMP13和bFGF mRNA的表达量均降低,差异有统计学意义(P0.05);免疫组化检测显示,MMP13和bFGF在当归贝母苦参丸加味方高、低剂量联合顺铂组中蛋白着色变浅,呈弱阳性表达,当归贝母苦参丸加味方高、低剂量联合顺铂组较单独用药蛋白表达量低,差异有统计学意义(P0.05)。结论当归贝母苦参丸加味方可以在mRNA和蛋白水平下调荷瘤小鼠肿瘤组织中MMP13和bFGF的表达,进而抑制肿瘤侵袭和血管生成,发挥抑瘤减毒增效目的。     

扶正抗瘤方的辅助抗肿瘤研究

目的:观察扶正抗瘤方对S180荷瘤小鼠的辅助抑瘤作用及免疫调节作用。方法:建立小鼠移植S180肉瘤模型,观察扶正抗瘤方400 mg.kg-1ig连续45 d,对荷瘤小鼠瘤重及免疫学指标的影响。结果:扶正抗瘤方组和环磷酰胺(CTX)组肿瘤生长受到抑制,而且二者合用(联合组)时抑瘤效果显著;扶正抗瘤方联合CTX组胸腺指数、脾指数、吞噬指数、足跖肿胀度与模型组比较均有提高,联合组与CTX比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01),扶正抗瘤方组和联合组ALT与荷瘤模型组比较均有下降,与CTX组比较亦有下降(P<0.05);二者尿素氮(BUN)与模型组相比有下降趋势;扶正抗瘤方组自然杀伤细胞(NK)细胞活性高于模型组(P<0.05),而联合组则明显高于模型组及CTX组(P<0.01)。结论:扶正抗瘤方联合化疗药物不仅可以抑制肿瘤生长,还可提高小鼠的免疫功能,具有良好的免疫调节作用。     

冬凌草甲素联用刺五加皂甙对Ec-9706荷瘤裸鼠的抑瘤作用

目的 研究冬凌草甲素与刺五加皂甙联用对裸鼠Ec-9706模型的抑瘤作用.方法 以Ec-9706细胞株接种裸鼠制成荷瘤模型,研究冬凌草甲素与刺五加皂甙联用高、中、低剂量组与阳性对照组比较对荷瘤裸鼠的抑瘤效应.结果 高、中、低剂量组及阳性对照组1和2的抑瘤率分别为35.1%,37.1%,43.1%,49.6%和19.2%,与空白对照组比较差异均有统计学意义,高、中、低剂量组和阳性对照组1、阳性对照组2相比,差异有统计学意义(P<0.01);三个剂量组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 冬凌草甲素与刺五加皂甙联用对Ec-9706荷瘤裸鼠有明显的抑瘤作用,能提高生命质量.     

黄芪水煎剂对荷瘤小鼠抗肿瘤的实验研究

目的:探讨黄芪水煎剂对荷瘤小鼠血液中β—内啡肽及P物质水平的影响。方法:抗肿瘤中药黄芪水煎剂给予荷瘤小鼠灌胃(5g/kg),每日一次,连用20d。采用放免方法测定血中β—内啡肽及P物质水平的变化。结果:荷瘤小鼠血中β—内啡肽水平明显升高(P<0.01),P物质浓度无显著变化(P>0.05),瘤体重量明显低(P<0.01)。结论:黄芪水煎剂可起到减轻肿瘤小鼠的疼痛和抗肿瘤的作用。     

血府逐瘀汤对荷瘤小鼠的抑瘤作用

目的：观察血府逐瘀汤对荷瘤小鼠免疫功能的影响，探讨血府逐瘀汤的抗肿瘤效果及其抗肿瘤的免疫学机制。方法：小鼠造模后给予不同药物治疗，10d后观察药物对瘤重和脾细胞功能的影响。结果：血府逐瘀汤能够显著抑制瘤重，活化T淋巴细胞增殖能力，提高荷瘤小鼠脾脏L3T4^ 细胞数量，升高L3T4^ ／Lyt-2^ 细胞比值，促进IL-2的分泌，但对Lyt-2^ 细胞数量影响不大。结论：血府逐瘀汤能够完全逆转肿瘤抗原和环磷酰胺引起的免疫抑制，其抑瘤作用与增强机体细胞免疫功能有关。     

川芎嗪对荷瘤鼠化疗后免疫功能的影响

应用环磷酰胺对荷瘤鼠进行化疗，观察川芎嗪对其免疫功能影响，结果表明，川芎嗪对荷瘤鼠化疗所引起的免疫功能低下具有明显的恢复作用，可显著提高化疗荷瘤鼠T细胞转化能力，明显促进化疗荷瘤鼠NK细胞活性和IL一2产生的能力。提示川芎嗪可对抗或恢复肿瘤对化疗药导致的免疫抑制或免疫缺损，该结果回临床应用中药与化疗药物进行肿瘤治疗具有十分重要的指导意义。