金属离子与人红细胞膜相互作用的顺磁和荧光光谱研究

研究金属离子与细胞膜的相互作用与金属离子性质的关系。     

血卟啉在H-22肝癌荷瘤小鼠体内的分布

目的探讨声敏剂血卟啉衍生物在肿瘤组织中的富集情况,以便在给药后超声结合血卟啉治疗肿瘤时选择最佳的超声处理时间。方法H-22肝癌荷瘤小鼠尾静脉注射HpD后,不同时间点取材,采用荧光分光光度法测定不同组织提取液中HpD的荧光强度,研究HpD在不同组织中的分布以及代谢变化。结果给药后2 h肿瘤组织以外的其他各组织内(血浆、肝、肾、皮肤、肌肉)血卟啉含量均达到其代谢过程的最高点,后逐渐下降;肿瘤组织中的HpD含量注射后不断上升,6 h时达到顶峰,随后又开始下降,10~24 h代谢比较缓慢,表现为肿瘤组织中对HpD的滞留作用,24 h时肿瘤组织中的HpD含量高于其他各组织,48~72 h趋于稳定在较低水平。结论提出了不同部位的肿瘤应选择各自适当的时间点进行超声处理。     

环缩酚肽抑制视网膜表达VEGF及PECAM基因和血管增生

[目的]观察两种环缩酚肽衍生物(Hep-A和Hep-B)对氧诱导的小鼠视网膜表达血管内皮生长因子(VEGF)和细胞黏附分子(PECAM;ICAM-1;VCAM-1)基因的影响及血管增生的变化.[方法]建立氧诱导的血管增殖性视网膜病变模型,12 d开始给小鼠皮下注安慰剂(第1组,n=7)、Hep-A 10 mg/kg(第2组,n=6)或者Hep-B 10 mg/kg(第3组,n=6),每天两次.5 d后取出左侧眼,分离视网膜并抽提RNA,用荧光定量PCR测出上述基因含量,并分别求出每个靶基因与标准基因S16含量的比率;右眼经心脏荧光素灌注后取眼球做视网膜平铺片,用图像分析软件定量计算视网膜新生血管的面积.[结果]视网膜中VEGF/S16的mRNA比率为:第1组(0.554±0.050),第2组(0.355±0.037),第3组(0.287±0.051);PECAM/S16为:第1组(2.050±0.249),第2组(1.228±0.153),第3组(1.027±0.210).经ANOVA分析,第2组和第3组分别与第1组比较,视网膜中VEGF基因表达分别减少36%和48.2%(P=0.001);PECAM基因表达分别减少40.1%(P＜0.05)和49.9%(P＜0.01);而VCAM-1和ICAM-1表达无明显差异.视网膜平片检测视网膜新生血管面积:第1组为(1.06±0.03)mm2/眼,第2组为(0.17±0.01)mm2/眼,第3组为(0.11±0.01)mm2/眼;经ANOVA分析,第2组和第3组分别与第1组比较,视网膜新生血管的面积明显减少(P＜0.001).[结论]两种环缩酚肽衍生物均抑制氧诱导的小鼠视网膜表达VEGF和PECAM基因,并抑制其形成视网膜新生血管.     

活体顺序性荧光标记技术在实验性骨折愈合研究中的应用

目的介绍实验性骨折愈合研究中活体顺序性荧光标记的技术与方法。方法以成年兔胫骨骨折外固定为模型，术后分别以Tetracydin(TC，黄色，25mg／kg)、Calcein(CG，绿色，10mg／kg)、Xylenal(XO，桔色，90mg／kg)、Alizarin—complen(AE，红色，30mg／kg)四种荧光染料于兔颈部皮下定期注射；并于术后第3、6、12及24周活杀动物，解剖出胫骨，梯度乙醇脱水、脱脂，甲基丙烯酸甲脂包埋，切片厚度40～100μm，打磨，荧光显微镜下观察、摄像；同时通过组织学观察、X线摄片了解骨愈合速度与质量。结果顺序性荧光标记显示，加压组中钙化的内、外骨痴均于术后第2周出现于截骨处的远、近断端，但尚未形成骨性连接。亦无骨皮质的改建。外骨痴增生停止于术后12周，且骨皮质的改建至12周已渐减少．至术后24周已基本完成；对照组：内骨痴于术后第3周出现于截骨处远、近断端，无钙化的外骨痴形成，亦无骨皮质的改建；外骨痂增生停止于术后12周，骨皮质改建至24周尚未完成，其结果与组织学观察、X线摄片具有一致性。结论活体顺序性荧光标记技术可以从细胞水平判断新骨的开始时间、骨生长速度及生长方向，并能节约实验动物数量，是实验性骨折愈合研究中较为理想的研究手段。     

绿色荧光蛋白在胶质瘤相关研究中的应用进展

胶质瘤的发生和侵袭是多基因参与、多步骤完成的生物学过程,随着对其研究的深入,人们逐渐认识到胶质瘤这一生物学行为特征不仅是其本身恶性行为的结果,也是其与宿主细胞相互作用的结果。绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)为我们直观的观察胶质瘤的发生、发展、血管生成、肿瘤细胞和其微环境的相互作用等生物学过程以及客观评价抗胶质瘤各种治疗策略的效果提供了一种重要手段。     

神经系统中荧光蛋白组合表达转基因策略

对大脑神经元进行着色并非新鲜事，科学家早已利用转基因技术将荧光蛋白基因转移到神经元中进行表达。到目前为止，这种方法每次最多只能转移两种荧光蛋白基因，着色种类只有两种，但要详尽描绘复杂的神经元网络结构，两种颜色远远不够．需要开发新方法。来自哈佛大学的一个研究小组开发出新策略，利用多种不同颜色对神经元进行遗传标记，以提高突触回路的视觉辨析率。     

Stratus荧光酶免分析仪故障检修一例

1故障现象仪器按规定时间预热后,作标准品检测时,检测值与实际值相差甚远,不是过大就是过小,无法作样品检测。观察显示器的监控工作参数,“BLOCKTEMP”参数无规律忽高忽低。通过进一步观察发现,开机时间越长,温度愈不稳定。正常情况下,“BLOCKTEMP”为:40.0℃±0.2℃。2分析与检修根据故障现象判断为“BLOCKTEMP”检测电路出现不稳定的故障,导致仪器无法正常工作。由于厂家没有提供技术资料,图1温度检测、控制电路原理框图卸开仪器后,测绘出电路原理图。电路原理方框图见图1。图1中,虚线内是“BLOCKTEMP”检测电路,Rt是温度…     

人晶体 γ-晶体蛋白的研究:Ⅳ.近紫外线对胚 γ_2-晶体蛋白的光氧化作用

对人胚胎晶体γ_2-晶体蛋白溶液用近紫外线(γmax 365nm)照射,不同时间取样分析。利用巯基(-SH)特异性试剂 DACM[N-(7-甲基氨基-4-甲基-3-邻羟苯烯基)-马来酰亚胺],经 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳观察光照射后的γ_2-晶体蛋白及其聚合物的游离巯基,同时检测照射后的蛋白溶液的紫外吸收光谱、光散射强度、色氨酸荧光发射光谱,以及丙烯酰胺对色氨酸荧光的猝灭效应。结果显示:人胚胎γ_2-晶体蛋白经紫外线照射,使其游离-SH 减少,蛋白聚合和分解,蛋白溶液的光散射增强,其二聚体不含游离-SH,γ_2-晶体蛋白的色氨酸荧光减少,这些变化随照射时间的延长而更明显;而对丙烯酰胺对蛋白分子中的色氨酸荧光猝灭效应影响不大。说明人胚胎γ_2-晶体蛋白通过光氧化,损伤及含游离-SH 的氨基酸残基、色氨酸残基,光氧化促使蛋白聚合和分解.提出通过进一步定量分析,可能在较深层次揭示紫外光氧化损伤含-SH 氨基酸、色氨酸残基,进而影响整个蛋白质分子结构的差异。眼科学报 1993;9:85-89。     

DBH─PF分光光度法测定血清锌的研究

研究了在混合表面活性剂CTMAB和OP存在下，新试剂二溴羟基苯基荧光酮（DBH—PF）分光光度法测定血清中微量锌的最佳显色条件及应用。结果表明，在pH11．0～12．8的碱性介质中，CTMAB、OP及洒石酸钠的存在下，Zn2 与DBH－PF形成了1：3的紫色络合物，常温下可以稳定7h，λmax为602um，摩尔吸光团数k为5．851×104cm2／mol，血清锌在0～14μmol／L范围内服从Lambert－Beer定律，血清中大多数金属离子在一般情况下不干扰测定，可不加掩蔽剂直接测定血清锌。该法简便、特异、灵敏、准确、用血量少、无需沉淀蛋白、加热及特殊设备，是目前分光光度法测定血清锌的最灵敏方法之一，精密度为2．58％，平均回收率为102．7％，与AAS法比较结果无显著性差异，所以该法适于临床推广。     

应用荧光免疫法检测生殖道沙眼衣原体及加德纳细菌

应用标记荧光素的抗沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)和抗阴道加德纳细菌(Gardnerella Vaginalis,GV)单克隆抗体,直接免疫荧光法(DFA)检测66例妇女生殖道标本。结果显示:Ct感染率为12.12％,GV感染率为19.70％。在妇科门诊患者Ct和GV感染率较高,应引起高度重视,18～40岁妇女是重点防治对象。