荧光原位杂交（FISH）在毒理遗传学研究中的应用

荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）在毒理遗传学研究中的应用汪旭梁子卿合正基刘素清综述云南师范大学生命科学系昆明６５００９２原位杂交（ＩｎＳｉｔｕＨｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ，ＩＳＨ），是一种在保持组织、细胞或染色体原有形态结构的基础上，对其内部特殊核苷酸顺序进行...     

用荧光探剂DPH研究家蝇线粒体膜脂流动性

本文探讨了用ＤＰＨ作为荧光探剂，研究家蝇飞翔肌线粒体膜脂流动性的方法。实验表明：ＤＰＨ确是用来研究家蝇生物膜流动性的有效探剂。同时，初步观察了不同杀虫剂对ＤＰＨ与线粒体膜结合后荧光强度的影响。其中氯菊酯和倍硫磷、马拉硫磷、敌百虫、氧化乐果，可使ＤＰＨ探剂与线粒体膜结合后的荧光相对强度增加；而氰戊菊酯、氯氰菊酯，溴氰菊酯及辛硫磷、乙酰甲胺磷，则可使荧光强度减弱。     

视盘血管炎——关于混合型的研讨

对６０例（６３眼）视盘血管炎的临床分型进行了探讨，结果表明，除分为Ⅰ、Ⅱ两型外，尚存在混合型，当视盘睫状血管炎性病变波及中央静脉，或两个血管系统同时受炎症侵犯时，即可再现混合型的临床表现，视盘明显水肿，视网膜静脉迂张，散在渗出，出血，动脉狭细。眼底荧光血管造影可见视盘荧光早期充盈明显迟缓，后期渗漏面积〉２．０ＰＤ，视网膜循环时间延长，混合型兼有Ⅰ，Ⅱ两型的临床特征，应作为一个独立类型存在，同时观察     

荧光探针标记单克隆抗体在不同条件下的荧光变化

应用流式细胞术，探讨了不同贮存条件和时间对ＦＩＴＣ和ＰＥ标记单抗的荧光变化。结果表明４℃－３０℃１冷冻干燥对ＦＩＴＣ标主单抗无明显影响，ＰＥ偶联物皮４℃为宜。两种标记物检测的正常粉外周血Ｔ细胞及其亚群结果一致。     

精子微生物动静态分析技术的新进展

本文简单介绍了荧光染色精子新技术在CASA系统中的地位、意义和它的特点，以及它在操作功能上的独到之处。     

应用荧光斑点法和比值法检测G6PD

目的建立适合于G6PD缺乏的新生儿筛查及确诊方法。方法应用荧光斑点法(FST)对新生儿筛查滤纸干血片进行检测，对可疑阳性者召回，抽静脉血以D6PD／6PGD比值法进行确诊，同时结合新生儿父母亲的G6PD结果，根据遗传关系综合分析。结果FST筛查25000例新生儿，G6PD缺乏阳性率为4．56％，确诊检出率为4．09％。与比值法的符合率为90．4％，G6PD重度缺乏者的符合率为100％，G6PD中间缺乏者的符合率为78．5％，室间质量控制结果与反馈结果符合率为100％。结论FST汀具有高的敏感性、特异性和准确性，方法简便、快捷、费用低廉，可对滤纸干血片标本进行大规模的筛查检测，同时利用比值法进行确诊，可减少假阳性及假阴性，有利于早期诊断和防治G6PD缺乏所致的新生儿黄疸和急性溶血。     

荧光定量PCR快速诊断21三体综合征

目的　建立荧光定量PCR技术检测 2 1三体综合征。方法　采用PCR方法同时扩增位于 2 1号染色体上的人肝型磷酸果糖激酶基因 (humanliver typephosphofructokinasegene ,PFKL CH 2 1)和位于 1号染色体上的人肌型磷酸果糖激酶基因 (humanmuscle typephosphofructokinasegene ,PFKM CH1) ,使用SYBRGreenⅠ荧光染料处理产物、琼脂糖电泳后在凝胶成像系统进行分析 ,得出扩增产物的荧光强度对比值。用此方法检测 2 6例 2 1三体综合征患儿及 2 0名正常人。结果　 2 6例 2 1三体综合征患儿PFKL CH2 1/PFKM CH 1扩增产物的荧光强度对比值为 1.5 8± 0 .17,而正常人为 1 0 0± 0 .0 5 ,两者差异有显著性。结论　SYBRGreenⅠ荧光定量PCR技术检测 2 1三体综合征具有准确、快速、安全、实用等特点 ,有较高的临床使用价值。     

眼附属器淋巴组织增生性病变的临床病理和分子遗传学特征及其意义

目的 分析眼附属器淋巴组织增生性病变的临床病理特点,探讨其分子遗传学特征及其意义.方法 收集1995-2007年37例眼附属器淋巴组织增生性病变石蜡组织标本(其中5例为反应性增生性病变,32例为淋巴瘤),依据2001年WHO肿瘤分类标准对32例淋巴瘤标本重新诊断分类.采用IgH、MALT1、bcl-6、c-Mye、bcl-2、CCND1、bcl-10、FOXP1双色分离重排探针、IgH/bcl-2双色融合易位探针和18号染色体着丝粒探针,利用间期荧光原位杂交(FISH)的方法 检测眼附属器淋巴组织增生性病变的分子遗传学特点.结果 32例淋巴瘤均为非霍奇金B细胞淋巴瘤.其中,黏膜相关淋巴组织结外边缘区B细胞淋巴瘤(MALT)淋巴瘤28例(87.5%),滤泡性淋巴瘤2例,弥漫性大B细胞淋巴瘤2例.60.7%(17/28)的眼附属器MALT淋巴瘤携带分子遗传学异常.其中,IgH基因断裂1例,但未找到与其发生相互易位的伙伴基因;基因3拷贝者16例,其中MALT1基因、bcl-6基因和c-Myc基因3拷贝的发生率分别为25%(7/28)、43%(12/28)和7%(2/28).16例基因3拷贝病例中,两种基因3拷贝合并存在者5例,其中bcl-6基因合并MALT1基因3拷贝者4例,bcl-6基因合并c-Myc基因3拷贝者1例.进一步研究显示,MALT1基因3拷贝者均存在18号染色体三体.2例滤泡性淋巴瘤都携带t(14;18)(q32;q21)/IgH-bcl-2.2例弥漫性大B细胞淋巴瘤均存在遗传学异常,1例表现为bcl-6基因3拷贝合并18号染色体三体,另1例表现为bcl-6基因3拷贝合并IgH和c-Myc基因双断裂.5例反应性淋巴组织增牛性标本均未见分子遗传学异常.结论 MALT淋巴瘤是眼附属器最常见的淋巴瘤类型;间期FISH有助于淋巴组织增生性病变的良恶性鉴别及淋巴瘤的分类;MALTI基因3拷贝者由18号染色体三体所致;18号染色体三体和bcl-6基因3拷贝(可能为3号染色体三体所致)是眼附属器MALT淋巴瘤常见的分子遗传学异常.     

组织芯片及其在肿瘤病理学研究中的应用

组织芯片是一类新型生物芯片，它可以快速、高效地对大量组织样本进行分析，在肿瘤病理学研究中已得到有效的应用。本就组织芯片的制备及其应用进行了综合讨论。     

宫颈病变程度与人类乳头瘤病毒(16、18型)负荷的关系

目的探讨宫颈病变程度与人类乳头状瘤病毒(HPV)16、18型负荷的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)方法,检测宫颈不同病变活检组织及石蜡包埋标本中HPV16、18型感染状况。结果正常宫颈上皮感染HPV16、18型阳性率为3%,CINⅠ、Ⅱ、Ⅲ级和宫颈癌感染HPV16、18阳性率分别为45.7%,69.5%,72.2%和74.6%。正常宫颈与CIN,宫颈癌HPV16、18阳性率差异有极显著性(P<0.0001)。宫颈糜烂(Ⅰ°、Ⅱ°、Ⅲ°),CIN(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级)及鳞癌HPV16、18阳性标本平均拷贝数分别为:3.58×103、1.80×105、1.19×107,随着病变程度加重而逐渐增加,差异有极显著性(P<0.0001)。结论宫颈病变程度与HPV16、18型负荷呈正相关。对宫颈病变组织标本行HPV16、18型检测,对判断宫颈病变发展趋势,积极处理癌前病变,阻断病程、预防宫颈癌的发生将起到重要作用。