细胞分子水平的衰老研究进展

本文反映了衰老研究最近在细胞分子水平方面的部分进展,肯定了松果体分泌的褪黑激素可延缓小鼠衰老症状的出现,延长其寿命;说明了随增龄人成纤维细胞端粒DNA数量的减少及基因表达的降低;并对当今细胞衰老的主要理论学说予以评价。(吴晶摘)     

他视角

Skp2抑制剂,有望成为肿瘤防治新药物 近年来的研究显示,细胞衰老在肿瘤的发生和发展中起着很重要的作用。因癌基因或抑癌基因的缺失所致的细胞衰老,也一直认为是由p19Arf-p53通路所致。而近期的《自然》杂志中有研究指出,由Skp2基因失活所致的细胞老化,并不依赖于Arf—p53通路。Skp2E3泛素连接酶具有原癌基因活性,在人类癌症组织中经常可以发现其过表达。     

某些植物在皮肤光老化防治中的应用进展

皮肤光老化不仅影响皮肤美容,还可以并发多种皮肤疾病及皮肤肿瘤.它具有特征性的临床表现以及相应的组织学及分子生物学水平的改变.大量研究表明,自然界中的多种植物如人参、绿茶、石榴等具有一定的抗紫外线辐射、抗过敏、抗氧化、清除自由基及抗肿瘤等作用,可以有效防治皮肤光老化;又因其来源广泛,不良反应少,具有广阔的应用前景.概述近年来多种不同植物在皮肤光老化的预防和治疗中的作用机制、疗效等方面的研究.     

UVB应激性衰老成纤维细胞分泌细胞外基质对HaCaT细胞ERK信号的影响

目的 探讨UVB诱导的衰老（UVB-SIPS）成纤维细胞分泌的细胞外基质（ECM）对HaCaT细胞增殖的影响以及细胞外信号调节激酶（ERK）信号途径的作用。方法 采用辐射诱导人皮肤成纤维细胞衰老,分别制备由未衰老和衰老成纤维细胞分泌的ECM包被的培养皿（分别定为PRE-ECM组、SCIP-ECM组）。以空白培养皿（NON-ECM组）为参照,在HaCaT细胞接种于培养皿后,采用MTT法和流式细胞法检测其细胞增殖、细胞周期等指标的变化;免疫印迹法分析ERK活化水平。干预性研究ERK信号通路对上述功能的影响。结果 三组中,SCIP-ECM组可诱导最强烈的ERK1/2的活化。采用U0126抑制ERK信号活化可完全抑制衰老成纤维细胞来源的ECM的促细胞增殖效应。阻断HaCaT细胞的ERK活化,NON-ECM组、PRE-ECM组和SCIP-ECM组S + G2/M期细胞的比例明显下降,分别由处理前37.40%、41.34%和43.31%减少至29.41%、36.48%到39.96%。结论 UVB-SCIP成纤维细胞分泌的ECM通过刺激ERK磷酸化促进HaCaT细胞增殖。     

肝细胞衰老情况预测非酒精性脂肪肝的预后

【据《JHepatol》2012年11月8日报道】题：肝细胞衰老情况预测非酒精性脂肪肝的预后（作者AravinthanA等）非酒精性脂肪肝（NAFLD）模型揭示了如再生障碍等加速细胞衰老的特征及肝癌的风险增加。NAFLD肝细胞加速衰老、疾病的进展和,临床转归之间的关系还未被研究。     

基因Wip1低表达与椎间盘退行性病变的关系

目的探讨基因Wipl异常表达与椎间盘退行性疾病（intervertebraldiscdegeneration,IDD）的关系。方法选取62例患者退行性病变的椎间盘组织,通过实时定量PCR测定w印l基因表达量;siRNA干扰人髓核（nucleuspulposus,NP）细胞Wipl的表达后,通过SA-β-gal染色检测细胞衰老情况;通过MTT检测NP细胞的增殖能力;通过实时定量PCR检测NP细胞衰老分子标记的表达水平;吖射线照射siRNA转染后的NPP3细胞,分别于不同时间点行SA-β-gal染色检查。结果62例病变椎间盘组织中,18例Wipl基因的表达明显下降（P〈0．01）;siRNA干扰人NP细胞Wipl表达后,衰老细胞数量明显增加;MTT结果表明,干扰Wipl的表达能够显著抑制人NP细胞的增殖;P3细胞培养8d,实时定量PCR检测发现,Col2al、Agc、Ver的表达水平显著下调,MMP3的表达水平明显增高。Y射线照射NP细胞后,SA-β-gal染色显示,Wipl表达组出现明显的衰老现象。结论Wipl的低表达与椎间盘退行性病变的发生相关,干扰Wipl的表达能够促进NP细胞衰老,而过表达Wipl可以有效抑制细胞衰老的发生。     

高糖环境诱导视网膜细胞衰老的实验研究

背景 细胞衰老在血管功能失调性疾病中的作用越来越受到人们的重视,人们推测细胞衰老可能参与糖尿病相关血管并发症的发生及发展,而目前检测细胞衰老的主要标志是β-半乳糖苷酶表达的上调.目的 证实高糖环境对牛视网膜血管内皮细胞（BRVECs）及糖尿病小鼠视网膜衰老状态的影响.方法 对BRVECs进行体外培养和传代,取第7代细胞用于实验.将培养的细胞分为对照组和高糖培养组,分别用含5.5 mmol/L或25.0mmol/L葡萄糖的M199内皮细胞培养液培养细胞7d,用5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D半乳糖苷（X-Gal）染色法观察各组离体细胞中β-半乳糖苷酶的阳性表达情况,计算方法为β-半乳糖苷酶阳性细胞/总细胞＆#215;100％.将SPF级8～10周龄C57BL/6J雄性小鼠12只,采用随机数字表法分为对照组和模型组,用链脲佐菌素腹腔内注射法制备糖尿病小鼠模型,3个月后取其双眼视网膜平铺于48孔板,采用X-Gal染色法进行染色,光学显微镜下比较两个组小鼠视网膜细胞中β-半乳糖苷酶阳性表达细胞数.结果 BRVECs复苏并培养24 h后每孔内细胞70％～80％铺满,细胞排列不规则;培养后48 h细胞融合成片,紧密排列.高糖培养组和对照组β-半乳糖苷酶染色阳性细胞比例分别为（51.4±5.4）％和（36.6±3.8）％,差异有统计学意义（t=-3.204,P=0.033）;糖尿病鼠视网膜中β-半乳糖苷酶染色阳性细胞数为（94.0±15.1）个/视野,明显多于对照组的（60.0±5.7）个/视野,差异有统计学意义（t=-2.974,P=0.041）.结论 高糖环境下离体BRVECs和在体小鼠视网膜细胞中β-半乳糖苷酶表达明显上调,高糖引起的细胞早衰可能参与糖尿病视网膜病变的发生.     

血管紧张素Ⅱ诱导人脐静脉内皮细胞衰老及苦碟子注射液的干预研究

目的:观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的诱导作用,及苦碟子注射液的干预作用。方法:体外培养HUVECs,用AngⅡ(在10-6mol/LAngⅡ的DMEM培养液中48h)干预,分为实验对照组、AngⅡ诱导组和苦碟子注射液组(给予AngⅡ刺激前1h先加用10%苦碟子注射液)。采用CCK-8法检测细胞存活率,以衰老相关β-半乳糖苷酶活性和细胞的增殖能力两种衰老标志物为主要观察指标。其中衰老相关β-半乳糖苷酶活性采用免疫化学染色方法,流式细胞术检测细胞周期来反应细胞的增殖能力;利用Western印迹法检测小凹蛋白-1(Caveolin-1,Cav-1)的表达。结果:与对照组比较,AngⅡ诱导组细胞存活率明显下降,β-gal阳性染色率明显增多,细胞周期多停滞于G0/G1期,S期细胞逐渐减少,Cav-1蛋白表达水平明显上调,表明AngⅡ成功诱导了HUVECs衰老,而给予苦碟子注射液干预后上述变化改善。结论:苦碟子注射液可以延缓AngⅡ诱导HUVECs衰老,其作用机制可能与下调Cav-1蛋白表达有关。     

泛素连接酶CUL4A-DDB1复合体参与DNA损伤修复的研究进展

泛素化修饰在DNA损伤信号中发挥重要功能,包括细胞周期监控、DNA修复、细胞衰老和程序性死亡的调控。CUL4A-DDB1泛素连接酶通过DCAFs靶向调控特异性的底物,启动DNA切除修复机制对受损DNA进行修复。近期的研究表明CUL4A-DDB1泛素连接酶协助DNA修复因子与受损DNA的识别,来维持基因组的稳定性和正确性。